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独自のアフィニティマトリックスを用いたエクソソーム単離キット Fab-TACS Exosome Agarose Column Starter Kitシリーズ

掲載日情報:2021/08/23 現在Webページ番号:67343

血清、血漿または細胞培養上清から、高純度のエクソソームを簡便、迅速に単離するキットです。エクソソーム表面マーカータンパク質であるCD9、またはCD81に特異的なFab-Strep(Strep-tag融合Fabフラグメント)をアガロースマトリックスに結合します。そのアガロースマトリックスを充填したカラムを使用し、Fab-TACSポジティブセレクション法により高純度のエクソソームが得られます。

Fab-TACS Exosome Agarose Column Starter Kit製品外観

Fab-TACS Exosome Agarose Column Starter Kitの製品外観

エクソソーム(Exosome)と Fab-TACSテクノロジー

エクソソーム(Exosome)とは

Fab-TACSテクノロジー

エクソソーム(Exosome)はエンドソームに由来した粒径30~150 nmの最小の細胞外小胞です。様々な生理学的および病理学的プロセスに関連している多くの異なる細胞から放出されます。エクソソームは、エンドサイトーシス中における部分的に原形質膜に由来する表面タンパク質を有しています。そのうちテトラスパニンであるCD9、CD63およびCD81は、これらの小胞の膜に特に豊富に含まれており、エクソソームのバイオマーカーとしてよく使用されています。

エクソソームは、DNA、RNA、タンパク質、酵素、脂質など、特定の生体分子を移動させ、細胞間のコミュニケーションを仲介します。この細胞間小胞輸送によって、発達、免疫、組織の恒常性、がん、神経変性疾患など、ヒトの健康と疾患の多くの場面で重要な役割を果たし、迅速で制御されたコミュニケーションが可能になります。

エクソソームの粒子サイズは小さく、また、アポトーシス小体(100~5,000 nm)や、マイクロパーティクル(100~1,000 nm)などの他の細胞外小胞と粒子サイズが一部重複するため、分離は未だに困難です。現在使用されている精製方法には、分画遠心分離、サイズ排除クロマトグラフィー、ろ過、マイクロパーティクルまたはPEGylationなどが含まれます。しかし、エクソソームの由来試料の種類、他の細胞外小胞の混入、低回収率、などの問題点により適用が制限されることがあります。


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製品ラインナップ

商品コードまたは●をクリックすると各製品の価格表を、品名をクリックすると製品の詳細をご覧いただけます。

品名 Fab-TACS Exosome Agarose Column Starter Kit, Human
CD9 Fab-TACS CD81 Fab-TACS
包装 2 columns
商品コード 6-3319-002 6-3381-002
キット内容 CD9 Fab-Strep, Human
CD81 Fab-Strep, Human
Biotin stock solution
Strep-Tactin TACS agarose column
FAb-TACS 0.3 ml column adapter

キット構成品は、単品でもご購入いただけます。

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特長

  • Fab-Strepをコートしたマトリックスにエクソソームが特異的に吸着され、非標的物はフロースルーに排出されます。洗浄後、Biotin stock solutionでエクソソームを溶出します。
  • 高純度、かつ機能性を完全に維持したエクソソームが得られます。
  • 標的物質に可逆的に結合します。
  • 親和性の低いFabフラグメントを使用しており、非標識エクソソームが得られます。
  • 迅速かつ簡便なプロトコルで、超遠心分離は不要です。
  • 適応試料:血清、血漿、細胞培養上清
  • 最大結合量:2~3×109 exosomes/column*

* 試料の種類によって最大結合量は異なります。


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Fab-TACSテクノロジーによる溶出原理

Fab-Strep

Fab-Strepsの構造 エクソソームとFab-Streps

Fab-TACS(Fab-based traceless affinity cell selection)は、エクソソームの非磁性分離のアフィニティクロマトグラフィーシステムです。このシステムは、Twin-Strep-Tagに融合させたエクソソームの表面マーカーに特異的なFabフラグメント(Fab)、Fab-Strepがエクソソームを可逆的に捕捉・放出する原理を用いています。

エクソソームの溶出方法の概略

Fab-Strepとエクソソームの結合

①カラムのアガロースマトリックス上のFab-Strepとエクソソームが結合する。夾雑物質は、洗浄によりフロースルーに流出される。

ビオチンの添加

②Twin-Strep-TagよりStrep-Tactinとの親和性が高いビオチンを添加する。

Fab-Strepとエクソソームの結合

③Strep-Tactin上のTwin-Strep-Tagとビオチンが置き換わることでFab-Strepsが放出され、エクソソームが溶出される。Fab-Strepは、親和性が低いためエクソソーム表面から自己解離するため、完全なエクソソームを回収できる。


エクソソーム溶出のイメージ動画


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価格

[在庫・価格 :2024年04月20日 00時00分現在]

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CD9 Fab-TACS, Exosome Agarose column Starter Kit, human
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CD81 Fab-TACS, Exosome Agarose column Starter Kit, human

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キット別売品

Fab-Strep

Fab-Strepは、Twin-Strep-tagに融合した組換え発現の低親和性Fabフラグメントです。Strep-tag技術を用いたTraceless Affinity Cell Selection (Fab-TACS)用に開発されました。ターゲットに対する親和性が低いため、細胞表面への十分な結合を確保するためには、アビディティの増加が必要です。Fab-StrepsとStrep-Tactinのバックボーンを組み合わせることで、細胞に安定的に結合する複合体の形成が可能になります。

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CD9 Fab-Strep, human

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CD81 Fab-Strep, human

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Strep-Tactin

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Strep-Tactin, TACS Agarose

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Biotin stock solution

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100 mM Biotin stock solution

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Strep-Tactin, TACS Agarose ColumnとAdapter

Fab-TACS Agarose Column2種

Strep-Tactin TACS Agarose columnの
0.3 ml用(左)と1 ml用(右)

TACS Column Adapter

TACS Column Adapterの
0.3 ml用(左)と1 ml用(右)


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Strep-Tactin, TACS Agarose Column (1 ml)
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Strep-Tactin, TACS Agarose Column (0.3 ml)
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TACS Column Adapter (for 15 ml tubes)
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TACS Column Adapter (for 50 ml tubes)
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[在庫・価格 :2024年04月20日 00時00分現在]

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Strep-Tactin, TACS Agarose Column (1 ml)

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Strep-Tactin, TACS Agarose Column (0.3 ml)

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TACS Column Adapter (for 15 ml tubes)

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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