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ヒト全血またはマウス脾細胞から各種T細胞/B細胞を単離するカラム Fab-TACS Agarose Column Starter Kitシリーズ

掲載日情報:2021/07/02 現在Webページ番号:67330

ヒト全血またはマウス脾細胞から直接,高純度,高収率かつ高い生存率で標的T細胞またはB細胞を単離するキットです。CD特異的Fab-Strep(Strep-tag融合Fabフラグメント)を結合した細胞グレードアガロースマトリックスを充填したカラムを用いたFab-TACSポジティブセレクション法により単離します。

キットイメージ

キット外観

Strep-Tactin Agarose Column

Strep-Tactin Agarose Column

TACS Column Adapterイメージ

TACS Column Adapter


使用方法動画



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Fab-TACSポジティブセレクション法とは

Fab-TACSは,Strep-tag/Strep-Tactinをベースにした,新しいアフィニティ細胞選別法です。この技術では,細胞グレードのアガロースマトリックス表面に,Strep-tag/Strep-Tactinを介してCD特異的Fabフラグメント(Fab-Strep)を結合し,免疫アフィニティクロマトグラフィーにより標的細胞を可逆的に捕捉および放出させます。
一般的な高親和性抗体を用いた免疫アフィニティ技術による細胞選別では,ほとんど不可逆的に強固に細胞と結合し,細胞の刺激やレセプターの遮断などの好ましくない影響を引き起こす恐れがあります。これに対し,Fab-TACSポジティブセレクション法では,全血(ヒト)や細胞懸濁液(マウス)などから非標識,非活性の高品質な標的細胞を得ることができます。

原理

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製品ラインナップ

商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

標的T細胞 対象試料 フローサイトメトリー解析結果 商品コード
処理前 処理後
CD3 Fab-TACS Agarose Column Starter Kit, Human
Human
CD3 T細胞
全血,
バフィーコート,
PBMC
CD3 Before CD3 After 6-3201-002
CD4 Fab-TACS Agarose Column Starter Kit, Human
Human
CD4 T細胞
全血,
バフィーコート,
PBMC
CD4 Before CD4 After 6-3202-002
CD8 Fab-TACS Agarose Column Starter Kit, Human
Human
CD8 T細胞
全血,
バフィーコート,
PBMC
CD8 Before CD8 After 6-3203-002
CD31 Fab-TACS Agarose Column Starter Kit, Human
Human
CD31 T細胞
全血,
バフィーコート,
PBMC
CD31 Before CD31 After 6-3216-002
CD19 Fab-TACS Agarose Column Starter Kit, Human
Human
CD19 B細胞
全血,
バフィーコート,
PBMC
CD19 Before CD19 After 6-3213-002
CD3 Fab-TACS Agarose Column Starter Kit, Mouse
Mouse
CD3 T細胞
脾細胞 CD3 Before CD3 After 6-3304-002
CD4 Fab-TACS Agarose Column Starter Kit, Mouse
Mouse
CD4 T細胞
脾細胞 CD4 Before CD4 After 6-3301-002


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特長

  • 全血,バフィーコート,PBMC(ヒト)または脾細胞懸濁液(マウス)をカラムに加えることにより,Fab-Strepをコートしたマトリックスに標的細胞が特異的に吸着され,非標的細胞はフロースルーに排出されます。洗浄後,ビオチンを含む溶出液で標的細胞を溶出します。
  • 非標識のT細胞を単離できます。
  • 遠心分離は必要ありません。
  • 溶出後,Fab-Strepは,標的細胞表面から自己解離します。

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操作方法概略(ヒト全血の場合)

操作法概要

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キット内容

* キットにより内容は異なります。
キット構成品は単品販売も行っております。

Fab-TACS Agarose Column2種

Strep-Tactin TACS Agarose columnの
0.3 ml用(左)と1 ml用(右)

TACS Column Adapter

TACS Column Adapterの
0.3 ml用(左)と1 ml用(右)

Flow Restrictor

Flow Restrictor(5 pieces/pack)


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使用例

アフィニティークロマトグラフィー細胞分離用Fab-TACSを用いて,バフィーコート(A, n=10)またはマウス脾臓細胞(B, n=7)からCD3細胞を分離し(データは平均±SEM),収量,純度,生存率を評価しました。

YIELD(高収率)

高収率の評価

ヒトとマウスの試料の出発材料中に存在するCD3細胞の平均約85%が,CD3特異的濃縮後に回収された。

PURITY(高純度)

高純度の評価

CD3細胞を分離後,細胞をフローサイトメトリーで分析した。濃縮前と濃縮後の代表的なFACSプロットをC(ヒト)とD(マウス)に示す。単細胞を散乱特性に応じてゲートし,DAPI染色により死細胞を除外した。単離されたヒトCD3 T細胞の平均純度は96%,単離されたマウスCD3 T細胞の平均純度は91%だった。

VIABILITY(高い生存率)

高生存率の評価

細胞の生存率は,平均してバフィーコートから分離した場合は99%,マウス脾臓細胞から濃縮した場合は91%だった。


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価格

Human Fab-TACS Agarose Column Starter Kit

[在庫・価格 :2022年06月29日 08時51分現在]

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Fab-Strep

CD4 Fab-Strepは,Twin-Strep-tagに融合した組換え発現の低親和性Fabフラグメントです。Strep-tag技術を用いたTraceless Affinity Cell Selection (Fab-TACS)用に開発されました。ターゲットに対する親和性が低いため,細胞表面への十分な結合を確保するためには,アビディティの増加が必要です。Fab-StrepsとStrep-Tactinのバックボーンを組み合わせることで,細胞に安定的に結合する複合体の形成が可能になります。

Human Fab-Strep

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Strep-Tactin TACS Agarose Column/Adapter/Flow Restrictor

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Strep-Tactin, TACS Agarose Column (1 ml)
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Strep-Tactin, TACS Agarose Column (0.3 ml)
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TACS Column Adapter (for 15 ml tubes)
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TACS Column Adapter (for 50 ml tubes)
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Flow Restrictor for 1ml Strep-Tactin TACS Agarose Column (5pieces)
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Strep-Tactin, TACS Agarose Column (1 ml)

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その他キット別売品

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Buffer CI (10x)

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100 mM Biotin stock solution

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。