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硬度のある樹脂に包埋して作製します 骨非脱灰標本作製受託サービス
掲載日情報：2017/04/14 現在Webページ番号：65579
骨や歯などの硬組織を脱灰せずに、硬度のある樹脂に包埋して作製します。インプラントなどの医療材料も一緒に包埋できます。薄切標本と研磨標本があります。
※「骨検査受託サービス」については、こちらをご覧下さい。
※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
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非脱灰標本の特長
- 脱灰（薬品によるミネラルの除去）を行わず、非脱灰のまま標本を作製します。
- 硬組織に近い硬度の樹脂で包埋することで、研磨もしくは薄切時の物理的な破壊を出来るだけ小さくして切片を作製します。
- 包埋用樹脂は、研磨標本作製においてはMMA（Methylmethacrylate）樹脂が、薄切標本作製ではMMA樹脂やGMA（Glycolmethacrylate） 樹脂が用いられます。
- 骨の摘出前（動物が生きているうち）に、蛍光カルシウムキレート剤（カルセインやテトラサイクリン等）を投与すると、骨芽細胞に取り込まれ新しく形成された石灰化骨が標識されます。こうした標本を蛍光顕微鏡で見ると、骨が形成された場所や、骨の形成速度についての所見を得ることができます。さらに、Caの動態（骨石灰化速度）や、骨の構造および細胞レベルの情報を画像処理（骨形態計測・下記参照）により、パラメータの数値化に用いることができます。
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非脱灰薄切標本
硬組織用の樹脂（MMAまたはGMA）に包埋したブロックを硬組織用のミクロトームで最薄3μmの薄さまで薄切できます。硬組織の石灰化状態と細胞を観察するのに有用です。また、骨形態計測を主目的にする場合に最も適しており、骨形態計測により、骨代謝回転の評価が可能です。
■MMA樹脂包埋薄切標本
MMA(Methylmethacrylate）樹脂は包埋に時間がかかりますが、硬度が骨に近く硬組織用のミクロトームで薄切します。骨形態計測をはじめ、骨の中の細胞観察を主目的にする場合に最も適しています。
骨形態計測を行うための標本としては、組織片をVillanueva bone stain（以下、V. Bone stain）液にて前染色後、MMA樹脂包埋し、5～7μm程度に薄切したものやMMA樹脂包埋し薄切後、Villanueva Goldner stain（以下、V. Goldner stain）を施した標本が多く用いられています。
これらの標本は、石灰化骨と未石灰化骨を色分け出来る（V. Goldner stain）ことや、同一標本で 静的パラメータと動的パラメータ（カルセインやテトラサイクリンの取り込み）の計測が可能（V. Bone stain） であるため、骨組織形態の観察及び計測に有用です。
 Villanueva's Bone 染色ラット大腿骨 海綿骨 （明視野）無色～薄桃色：石灰化骨 濃赤紫色：類骨 |
 （暗視野）カルセイン標識蛍光観察 |
 Villanueva's Goldner 染色サル腸骨 海綿骨 緑色：石灰化骨、赤色：類骨 |
■GMA樹脂包埋薄切標本
GMA（Glycolmethacrylate）樹脂はMMA樹脂に比べ、やや硬度が劣りますが、染色のバラエティが広がります。重合熱の発生が比較的少なく、MMA樹脂ではできない酵素染色なども可能です。
その他にもGMA樹脂は、トルイジン・ブルー染色やV. Goldner stain標本を作製し、骨形態の観察及び骨形態計測に用いることができます。トルイジン・ブルー染色標本はMMA樹脂包埋V. Bone stain標本と同じく同一標本で静的パラメータと動的パラメータの計測が可能です。
 von Kossa染色 サル脛骨 近位端黒～黒褐色：石灰化骨 |
 トルイジンブルー染色サル腸骨 海綿骨 （明視野）薄青色：類骨 青色：軟骨基質 |
 （暗視野）カルセイン標識蛍光観察 |
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非脱灰研磨標本
非脱灰研磨標本は、MMA樹脂包埋した検体を研磨によって薄くしていく、本来の形状を保持したまま観察できる手段です。薄切標本のような薄さにはできませんが、ミクロトームによる歪みを避けたい標本（ex：金属やハイドロキシアパタイト等の埋め込み）、ミクロトームで対応できない大型標本などに用いられます。
- 30～50μm程度の厚みの標本を作製します。
- 歯、顎骨や皮質骨などの緻密構造組織の観察に有用です。
- 内部に金属や人工物を含む検体からも、標本を作製することができます。
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| Villanueva's Bone 染色 研磨標本 蛍光観察 ラット大腿骨骨幹部 横断面 (左)正常モデル (右)副甲状腺機能亢進症モデル 皮質骨のカルセイン骨標識が観察できる。 |
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| Villanueva's Bone染色 研磨標本 イヌ大腿骨骨幹部 無色～薄桃色：石灰化骨 濃赤紫色：類骨 |
Villanueva's Goldner 染色 研磨標本 イヌ下顎骨＋インプラント 緑色：石灰化骨、赤色：類骨 |
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| Villanueva's Bone 染色 研磨標本 ラット下顎骨 |
Villanueva's Bone 染色 研磨標本 ラット脛骨＋インプラント |
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ご注文方法／価格
価格、納期はその都度お見積りします。詳細は当社受託・特注品業務担当までお問合せ下さい。
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