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cDNAディスプレイを用いてVHH抗体をスクリーニング VHH抗体スクリーニング・作製受託サービス

掲載日情報:2017/08/16 現在Webページ番号:65478

動物免疫を行わず,人工合成遺伝子ライブラリーからcDNA ディスプレイ技術により特異的なVHH 抗体遺伝子をスクリーニングし,得られた遺伝子を元に,ブレビバチルスタンパク質生産系にて,VHH 抗体を分泌生産させます。

VHH抗体スクリーニング受託サービス

MEMO

VHH抗体とは



ラクダ科動物(ラマ,アルパカ等)はH鎖のみで構成される抗体(重鎖抗体)を有し,その可変領域はVHH(variable domain of heavy chain of heavy chain antibody)抗体と呼ばれます。VHH抗体は温度やpHなどに対し高い安定性を持ち,微生物での低コスト生産も可能です。また,多価抗体や多重特異性抗体,薬物・化合物の修飾など,タンパク質工学的な改変も容易です。これらの特長により,様々な分野での応用が期待されているものの,希望するVHH抗体の取得方法に関しては,多くの課題(免疫する動物の確保や飼育等)が存在します。


特長

  • VHH抗体遺伝子ライブラリーからcDNAディスプレイ技術より,特異的なVHH抗体遺伝子をスクリーニングし,得られたVHH抗体遺伝子を元に,ブレビバチルスタンパク質生産系にて,大量にVHH抗体を分泌生産させることができます。
  • 遺伝子の取得からVHH抗体タンパク質の生産までをワンストップで対応することができます。各ステップで用いる技術により,それぞれ既存の競合する技術が持つ課題を克服することができます。
  • VHH抗体は高い安定性を持ちます。
  • 二重特異性化などの高付加価値抗体を検討される方にお勧めいたします。
  • 低分子抗原や動物種間での相同性の高い抗原に対する抗体を得ることができます。

■VHH抗体遺伝子ライブラリー

終止コドンを排除し,高い多様性を保持したライブラリーとなります。化学合成のため,動物では持ちえない配列を含んでいます。(株)プロテインエクスプレスは本ライブラリー特許の使用許諾を受けています。

(競合する技術とそれぞれの課題)

ラクダ科動物由来ナイーブライブラリー,免疫ライブラリー

  • 動物が高額,飼育が容易でない。
  • 免疫に必要な抗原量が多い。

ランダムライブラリー

  • 一定の比率で終止コドンが出現してしまう。

■cDNAディスプレイ

鋳型をcDNAとすることで安定性が高く,膨大なライブラリーサイズを取り扱うことができます。

cDNAディスプレイ

(競合する技術とそれぞれの課題)

ファージディスプレイ

  • ライブラリーサイズが小さい。
  • 大腸菌での生産能に影響を受ける。

mRNAディスプレイ,リボソームディスプレイ

  • mRNAの不安定性に課題がある。

■ブレビバチルスによるVHH抗体タンパク質の生産

グラム陽性菌でエンドトキシンを持たず,菌体外に大量(~g/L)に目的タンパク質を分泌生産します。分泌生産のため,分子内SS結合が正しく維持され,精製工程も容易です。

cDNAディスプレイ

(競合する技術とそれぞれの課題)

大腸菌

  • 菌体内生産のため,精製が困難。
  • 封入体になりやすい。
  • エンドトキシンを保有する。

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概要

■基本サービス (納期;3~4か月)

  1. 抗原の提供(タンパク質発現受託サービスをご利用いただくこともできます)

    ↓ cDNAディスプレイによるスクリーニング
  2. 候補遺伝子配列の取得

    ↓ ブレビバチルスでの生産
  3. 候補VHHタンパク質の取得

    ↓ ELISAによる評価
  4. 納品 (3クローン・各0.5 mg)

■オプション

  • VHH抗体のアミノ酸配列開示
  • クローン数,抗体量の変更
  • 高親和化(二次スクリーニング,多価化)
  • 製造プロセス向上
  • 多検体,年間契約等

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ご注文方法

納期および価格などの詳細は,当社受託・特注品業務担当(下記参照)までお問い合わせ下さい。

クローンの遺伝子/アミノ酸配列開示には別途費用を請求いたします。
抗原(0.5mg)はお客様でご用意下さい。当社のタンパク質受託発現サービスを利用いただくことも可能です。
抗原の性状により,スクリーニング方法が特殊な場合は追加費用が発生する場合がございます。

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