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RNA試料からqPCRまでの時間を大幅に短縮する定量PCR用マスターミックス Volcano3G RT-PCR 2x Master Mix(RT-PCR用マスターミックス)

掲載日情報:2020/02/12 現在Webページ番号:65179

リアルタイムRT-PCRによる遺伝子発現量の解析に!

逆転写反応とPCR反応を同時に行える,One-Step RT-PCRならぬZero-Step RT-PCR用マスターミックスです。RNA試料からqPCRまで一気に行えるため,操作時間を短縮でき,結果を迅速に得ることができます。

定量PCRマスターミックス

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Volcano3Gによるゼロステップ リアルタイムPCR

Volcano DNA polymeraseは,逆転写酵素活性とDNAポリメラーゼ活性を併せ持つ改変型Taqポリメラーゼです。

  • ひとつの酵素で,mRNAをテンプレートとしてPCRまで行えます。
  • 従来のone-step PCRポリメラーゼのように,個別に逆転写反応のステップを設ける必要はありません。
  • 熱安定性が非常に高く,高温で逆転写反応が行えるため複雑な二次構造のRNAに対しても有用です。

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無料サンプルのご案内

無料サンプル品をご用意しています。ご希望の方はテクニカルサポート試薬担当までお問い合わせいただくか,下記オンラインフォームからお申込み下さい。

1研究室につき2点までお申込みいただけます。
サンプル品ご使用後,通知メールに記載の アンケートフォームからご使用アンケートにご回答いただけますよう,お願い致します。
在庫なくなり次第終了とさせていただきます。予めご了承下さい。

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特長

  • 定量PCRに必要な試薬(改変型ホットスタートDNAポリメラーゼ,dNTP,二本鎖DNA(dsDNA)結合蛍光色素,バッファー)があらかじめ含まれたマスターミックスです。
  • Volcano DNAポリメラーゼに加え,ホットスタートタイプのTaq DNAポリメラーゼが含まれており, DNAおよびRNAに対して高い反応性を示します。
  • 60~300 bpのDNA増幅に最適化されています。
  • GreenDyeは,リアルタイムPCR実験にお勧めのPCR用蛍光色素です。SYBR Greenと比較してPCRを阻害しにくく,SYBR/FAMフィルターチャンネルで検出可能です。
  • TaqManプローブまたは蛍光色素 GreenDyeでの検出に適したタイプがあります。
定量PCRマスターミックス 定量PCRマスターミックス 定量PCRマスターミックス

製品外観

500 bp以上のRNAの逆転写には適しません。

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適用

  • DNAまたはRNAの迅速な検出/同定
  • 逆転写定量PCR (RT-qPCR)
  • DNAまたはRNAの定量PCR
  • マルチプレックスPCR
  • リアルタイムPCR
  • Probe-based PCR
  • 病原体検出
  • プライマー伸長
  • エンドポイントPCR
  • スクリーニング / ハイスループットPCR
  • SELEX


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製品の種類

商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

Volcano3G RT-PCR 2×Master Mix
検出方法 含まれる蛍光色素の種類 包装 商品コード
GreenDye ROX
low high
GreenDyeでの検出 100 tests 6301S
100 tests 6401LoS
100 tests 6401HiS
TaqManプローブでの検出 100 tests 6101S
500 tests 6101M
100 tests 6201LoS
100 tests 6201HiS


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使用例(HPRT1遺伝子の増幅)

使用例(HPRT1遺伝子の増幅)

Volcano3G RT-PCR 2x Master Mix with GreenDye(#6301S) を用いてmRNA(500,000~500 total copies / reactionの希釈系列)から標準的なRT-PCRを行った。500 copiesという微量の試料の検出も可能であることがわかる。

  • :HPRT1遺伝子のmRNA(500,000~500 total copies / reactionの希釈系列)
  • :NTC (No template control,ネガティブコントロール)

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メーカー推奨のマスターミックス調製方法

マスターミックス調製方法


* 推奨テンプレート濃度:0.004 ng/μl~0.1μg/μl(トータルRNAまたはゲノムDNA)

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PCRのプロトコル例

定量PCR用逆転写酵素/DNAポリメラーゼ活性を併せ持つ改変型ポリメラーゼのアプリケーション例





2段階および3段階のPCRプロトコルを使用できます。
* Volcano3G DNAポリメラーゼは,サイクルPCR伸長ステップ中のDNA増幅と同時に逆転写も行われるため,RNAテンプレートから直接「ゼロステップ」RT-PCRを可能にします(等温逆転写ステップなし)。したがって、逆転写ステップはオプションであり,場合によっては省略できます。
** 新しいRT-PCRは,各プライマーペアに最適な逆転写/アニーリング/伸長温度を見つけるために,温度勾配を実行することにより理想的に確立されます。プライマーのアニーリング温度は,その核酸配列と反応バッファーの組成(塩とpH)に強く影響されます。一般に,Volcano3G DNAポリメラーゼは完全に熱安定性があり,55~95℃で最も活性があります。
PCR条件は,使用するサーマルサイクラーや鋳型,増幅産物の大きさによって異なるため,最適化が必要です。


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関連製品 蛍光色素 GreenDye

関連製品 蛍光色素 GreenDye (クリックで開閉します)
  • 1×の濃度での使用が推奨されます。
  • 通常のSYBR/FAMフィルターチャンネルで検出可能です。
  • 熱安定性が高く,50サイクル以上でも検出を行うことができます。
  • 融解曲線分析やHigh Resolution Melting (HRM) 解析にも適しています。

融解曲線分析

本製品(GreenDye)が最もシャープなmelting peakを示している。



関連製品 蛍光色素 GreenDye

[在庫・価格 :2021年04月21日 23時08分現在]

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詳細 商品名
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納期 文献数
GreenDye 20× (200reactions)
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
HiDi DNA polymerase を使用したリアルタイムPCR実験にお勧めのPCR用蛍光色素。通常のSYBR/FAMフィルターチャンネルで検出可能。
法規制等
保存条件 -20℃,暗所保存 法規備考
掲載カタログ ニュース2020年5月15日号 p.36
ニュース2019年12月1日号 p.24

製品記事 HiDi Taq / HiDi DNA Polymerase
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GreenDye 20× (200reactions)

文献数:0

説明文 HiDi DNA polymerase を使用したリアルタイムPCR実験にお勧めのPCR用蛍光色素。通常のSYBR/FAMフィルターチャンネルで検出可能。
法規制等
保存条件 -20℃,暗所保存 法規備考
掲載カタログ ニュース2020年5月15日号 p.36
ニュース2019年12月1日号 p.24

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価格

蛍光色素 GreenDyeでの検出に適したタイプ(GreenDyeを含む)

[在庫・価格 :2021年04月21日 23時08分現在]

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詳細 商品名
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納期 文献数
Volcano3G RT-PCR 2x Master Mix (+GreenDye)
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
逆転写反応とPCRが同時に行えるリアルタイムPCR用マスターミックス。蛍光色素 GreenDyeでの検出に適したタイプ(GreenDyeを含む)。
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年12月1日号 p.25

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Volcano3G RT-PCR 2x Master Mix (+GreenDye, +low ROX)
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
逆転写反応とPCRが同時に行えるリアルタイムPCR用マスターミックス。蛍光色素 GreenDyeでの検出に適したタイプ(GreenDyeを含む)。
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年12月1日号 p.25

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Volcano3G RT-PCR 2x Master Mix (+GreenDye, +high ROX)
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
逆転写反応とPCRが同時に行えるリアルタイムPCR用マスターミックス。蛍光色素 GreenDyeでの検出に適したタイプ(GreenDyeを含む)。
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年12月1日号 p.25

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[在庫・価格 :2021年04月21日 23時08分現在]

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Volcano3G RT-PCR 2x Master Mix (+GreenDye)

文献数:0

説明文 逆転写反応とPCRが同時に行えるリアルタイムPCR用マスターミックス。蛍光色素 GreenDyeでの検出に適したタイプ(GreenDyeを含む)。
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年12月1日号 p.25

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Volcano3G RT-PCR 2x Master Mix (+GreenDye, +low ROX)

文献数:0

説明文 逆転写反応とPCRが同時に行えるリアルタイムPCR用マスターミックス。蛍光色素 GreenDyeでの検出に適したタイプ(GreenDyeを含む)。
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年12月1日号 p.25

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Volcano3G RT-PCR 2x Master Mix (+GreenDye, +high ROX)

文献数:0

説明文 逆転写反応とPCRが同時に行えるリアルタイムPCR用マスターミックス。蛍光色素 GreenDyeでの検出に適したタイプ(GreenDyeを含む)。
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年12月1日号 p.25

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TaqManプローブでの検出に適したタイプ(GreenDyeを含まない)

[在庫・価格 :2021年04月21日 23時08分現在]

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納期 文献数
Volcano3G RT-PCR 2× Master Mix
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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逆転写反応とPCRが同時に行えるリアルタイムPCR用マスターミックス。加水分解プローブでの検出に適したタイプ(GreenDyeを含まない)。
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Volcano3G RT-PCR 2× Master Mix
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
逆転写反応とPCRが同時に行えるリアルタイムPCR用マスターミックス。加水分解プローブでの検出に適したタイプ(GreenDyeを含まない)。
法規制等
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掲載カタログ ニュース2019年12月1日号 p.25

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Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+low ROX)
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 2
説明文
逆転写反応とPCRが同時に行えるリアルタイムPCR用マスターミックス。加水分解プローブでの検出に適したタイプ(GreenDyeを含まない)。
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年12月1日号 p.25

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Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+high ROX)
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 2
説明文
逆転写反応とPCRが同時に行えるリアルタイムPCR用マスターミックス。加水分解プローブでの検出に適したタイプ(GreenDyeを含まない)。
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年12月1日号 p.25

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[在庫・価格 :2021年04月21日 23時08分現在]

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Volcano3G RT-PCR 2× Master Mix

文献数:0

説明文 逆転写反応とPCRが同時に行えるリアルタイムPCR用マスターミックス。加水分解プローブでの検出に適したタイプ(GreenDyeを含まない)。
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製品記事 新型コロナウイルス(SARS-CoV-2/COVID-19)特集
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Volcano3G RT-PCR 2× Master Mix

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説明文 逆転写反応とPCRが同時に行えるリアルタイムPCR用マスターミックス。加水分解プローブでの検出に適したタイプ(GreenDyeを含まない)。
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Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+low ROX)

文献数:2

説明文 逆転写反応とPCRが同時に行えるリアルタイムPCR用マスターミックス。加水分解プローブでの検出に適したタイプ(GreenDyeを含まない)。
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Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+high ROX)

文献数:2

説明文 逆転写反応とPCRが同時に行えるリアルタイムPCR用マスターミックス。加水分解プローブでの検出に適したタイプ(GreenDyeを含まない)。
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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