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hTERT不死化細胞株
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hTERT不死化細胞株
hTERT-immortalized Primary Cell hTERT不死化細胞株
掲載日情報：2019/10/02 現在Webページ番号：64920
hTERT不死化細胞とは、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素（hTERT; Human Telomerase Reverse Transcriptase）遺伝子を初代培養細胞に導入して作製した、正常2倍体の染色体を持つ細胞株です。初代培養細胞の性質に近い状態を保持したまま、安定的に継代が可能です。
追加しました。
特長
- 正常な核型（2倍体）を示します。
- 初代培養細胞に近い性質を保持しています。
- in vivoの細胞を再現しています。分化した細胞から作製され、組織特異的な特徴、タンパク質の発現、およびin vivoでの細胞に類似した構造を形成しています。
- in vitroで拡大増殖能を示します。初代培養細胞とは異なり、2～3回の継代後にも老化しません。
- 安定した核型と遺伝子型を示し、発がん性のような形質転換に関連する変化を示しません。
- 拡大増殖能、組織からの選択した遺伝型、安定遺伝型、およびhTERTの連続発現を検証しています。
- がんモデルや、創薬スクリーニングに有用です。
追加しました。
hTERTによる初代細胞の不死化
テロメア（Telomere）は、染色体末端に存在する繰り返し配列を持ったDNAで、染色体末端を保護する役目を持っています。細胞分裂のたびにテロメアは末端から50～200 bpずつ失われ、染色体は短縮し、複製老化が起こります。テロメラーゼ（Telomerase）は、RNA構成要素（hTERC）と逆転写酵素活性を持つ触媒成分（hTERT）から成る酵素で、細胞分裂の際に失われたテロメアを伸長させます。テロメラーゼが活性化している細胞では、染色体の長さは一定に保たれ、老化することなく分裂し続けることができます。
テロメラーゼのRNA成分は普遍的に発現していますが、触媒活性成分であるhTERTの発現は胚発生の初期段階に限定されており、成体では幹細胞の他、血液細胞の一部（白血球など）、生殖細胞、皮膚や消化管の一部の細胞に見られます。ほとんどの正常体細胞でテロメラーゼ活性は見られず、in vivoでも複製老化の影響を受けやすいため、in vitroでの維持は困難です。
hTERT遺伝子を初代培養細胞にトランスフェクションで導入すると、染色体のテロメア末端が伸長・維持されます。多くの場合、hTERT単独での発現でも細胞の複製老化は抑えられ、分裂限界を超えて不死化します。
しかし、ある種の初代培養細胞ではhTERTのほか、ウイルス性遺伝子（SV40 large T antigen、HPV-16 E6/E7）または非ウイルス性（Cdk-4やBmi-1）のがんタンパク質などが不死化に必要です（細胞の不死化関連ツール参照）。
初代細胞
- 染色体末端にテロメアを保持している。
- 細胞分裂のたびにテロメアが消失する。
- テロメアが完全に消失すると複製老化が起こる。
hTERT不死化細胞
- テロメラーゼ酵素の触媒サブユニットを持つ標的細胞をトランスフェクトする（hTERT）。
- hTERTはテロメアサブユニットの繰り返し部分を触媒する。
- hTERT発現細胞は複製老化を回避。
- 生理機能を維持したまま細胞寿命が約5倍に伸びる。
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初代細胞株とhTERT不死化細胞株の相違点
hTERT不死化細胞は、初代細胞のin vitroでの本質とがん細胞の継続培養能力を兼ね備え、その利点性を持ちながら双方の限界を回避しています。
| 細胞株の種類 | 初代細胞株 | hTERT不死化細胞株 | がん細胞株 |
|---|---|---|---|
| in vivoにおける 組織表現型の類似性 |
 |
 |
 |
| 遺伝子型の安定性 | 二倍体 | 二倍体／偽二倍体 | 異数体 |
| 実験間の一貫性 | ドナーごとに変化 | 良い | 良い |
| 増殖能 | 低い | 良い | 良い・継続的 |
| 費用 | 高 | 中 | 低 |
| 使いやすさ | 低 | 中 | 高 |
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hTERT不死化細胞株の検証例
腎近位尿細管上皮hTERT不死化細胞株RPTEC/TERT1（ATCC® CRL-4031TM）の検証例です。
正常な核型（2倍体）の検証
左図：RPTEC/TERT1不死化細胞株を凍結保存から回復後、ウェルに播種し、160日間無血清培地で培養しても正常遺伝子型を維持していた。
一方、RPTEC初代培養細胞は20回程度の分裂回数で増殖が止まる。
右図：hTERTを導入したRPTEC/TERT1不死化細胞株は、60回以上分裂を繰り返しているにも関わらず、核型は2倍体を維持している。
発現タンパク質の検証
RPTEC/TERT1不死化細胞株が、RPTEC初代培養細胞と同様の膜輸送タンパク質（マーカー）の発現していることを確認した。
細胞増殖と上皮形態の検証
RPTEC/TERT1不死化細胞株は初代培地中で、増殖と上皮形態についてRPTEC初代培養細胞と同様だが、より均質な細胞集団を示した。
RPTEC/TERT1不死化細胞株は、E-cadherinとCD13/Aminopeptidase Nの両方を均一に発現しているが、一方RPTEC初代培養細胞ではこれらのマーカーの発現に大きなばらつきがあった。
上皮バリア形成による検証
水分と細胞膜を透過して捕獲された溶質により、ドーム状構造物が形成される（矢印）。そのためこれらの構造物の発生が上皮バリアー形成の良い目印になる。同時に、上皮バリアー形成は経上皮電気抵抗（TEER）を測定することによっても示される。RPTEC/TERT1不死化細胞株はドーム状構造物の観察と測定可能なTEER値の両方を示すが、RPTEC初代培養細胞ではそのいずれも示さない。
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製品ラインナップ
品名をクリックすると製品詳細情報を、商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。
| 組織 | 品名 | 詳細 | 状態 | 使用論文 | ATCC® No. （商品コード） |
|---|---|---|---|---|---|
| 気道（Airway） | NuLi-1 | 気管支由来上皮細胞 | 正常（hTERTとHPV-16 E6/E7導入） | 有 | CRL-4011TM |
| CuFi-1 | 気管支由来上皮細胞 | 嚢胞性線維症（hTERTとHPV-16 E6/E7導入） | 有 | CRL-4013TM | |
| CuFi-4 | 気管支由来上皮細胞 | 嚢胞性線維症 (hTERTとHPV-16 E6/E7-LXSN, pBABE-Hyg-TERT導入) |
有 | CRL-4015TM | |
| CuFi-5 | 気管支由来上皮細胞 | 嚢胞性線維症 （HPV-16 E6/E7-LXSN導入) |
有 | CRL-4016TM | |
| CuFi-6 | 気管支由来上皮細胞 | 嚢胞性線維症 (HPV-16 E6/E7-LXSN導入) |
有 | CRL-4017TM | |
| HBEC3-KT | 気管支由来上皮細胞 | 正常 | 有 | CRL-4051TM | |
| HSAEC1-KT | 小気道由来上皮細胞 | 正常 | 有 | CRL-4050TM | |
| 肺（Lung） | Lung Fibroblast | 肺線維芽細胞 | 正常 | 無 | CRL-4058TM |
| 大動脈（Aortic） | TeloHAEC | 大動脈内皮細胞 | 正常 | 無 | CRL-4052TM |
| TeloHAEC-GFP | 大動脈内皮細胞 | 正常 (レポーターとしてEF1αプロモーターにEmGFP導入) |
無 | CRL-4054TM | |
| 食道（Esophageal） | CP-A (KR-42421) | 食道上皮細胞 | 非異形成の化生 | 有 | CRL-4027TM |
| CP-B (CP-52731) | 食道上皮細胞 | 高度異形成（バレット食道） | 有 | CRL-4028TM | |
| CP-C (CP-94251) | 食道上皮細胞 | がん（バレット食道） | 有 | CRL-4029TM | |
| CP-D (CP-18821) | 食道上皮細胞 | がん（バレット食道） | 有 | CRL-4030TM | |
| 軟骨（Chrondrocyte） | CHON-001 | 長骨の軟骨細胞 | 正常 | 無 | CRL-2846TM |
| CHON-002 | 長骨の軟骨細胞 | 正常 | 有 | CRL-2847TM | |
| 血管 （Dermal Microvascular） |
TIME | 包皮微小血管内皮細胞 | 正常 | 有 | CRL-4025TM |
| TIME-GFP | 包皮微小血管内皮細胞 | 正常 （レポーターとしてCMVプロモーターにGFP導入） |
無 | CRL-4045TM | |
| NFκB-TIME | 包皮微小血管内皮細胞 （レポーターとしてNFκB応答エレメントの下流にNanoLuc luciferase導入） |
正常 | 無 | CRL-4049TM | |
| Dermal Microvascular Endothelial Cell, Neonatal | 包皮微小血管内皮細胞 | 正常 | 無 | CRL-4060TM | |
| HUVEC/TERT 2 | HUVEC（臍帯静脈内皮細胞） | 正常 | 無 | CRL-4053TM | |
| 子宮（Endometrial） | T HESCs | 子宮内膜由来線維細胞 | 非悪性筋腫 | 有 | CRL-4003TM |
| 皮膚（Skin） | Ker-CT | 包皮角化細胞 | 正常 | 有 | CRL-4048TM |
| BJ-5ta | 包皮皮膚線維芽細胞 | 正常 | 有 | CRL-4001TM | |
| TelCOFS02MA | 皮膚線維芽細胞 | COFS | 有 | CRL-4005TM | |
| Dermal Melanocytes | 皮膚メラノサイト | 正常 | 無 | CRL-4059TM | |
| TIGKs | 歯肉上皮細胞 | 正常 | 無 | CRL-3397TM | |
| 乳腺 （Mammary Epithelial Cell） |
hTERT-HME1 [ME16C] | 乳腺上皮細胞 | 正常 | 有 | CRL-4010TM |
| 間葉系幹細胞 （Mesenchymal Stem Cell） |
ASC52telo | 脂肪組織由来の間葉系幹細胞 | 正常 | 有 | SCRC-4000TM |
| A41hBAT-SVF | 深頸部脂肪組織細胞 | 正常 | 有 | CRL-3385TM | |
| A41hWAT-SVF | 表層頸部脂肪組織細胞 | 正常 | 有 | CRL-3386TM | |
| 神経膠 （NTAP Schwann Cell） |
NF1 ipNF05.5 | 手部神経組織由来のシュワン細胞 | 叢状神経線維腫 （非悪性） |
有 | CRL-3388TM |
| NF1 ipNF05.5 (Mixed clones) | 手部神経組織由来のシュワン細胞 | 叢状神経線維腫 （非悪性） |
有 | CRL-3387TM | |
| NF1 ipNF95.6 | 脳神経XII組織由来のシュワン細胞 | 叢状神経線維腫 （非悪性） |
有 | CRL-3389TM | |
| NF1 ipNF95.11b | 腕神経叢組織由来のシュワン細胞 | 叢状神経線維腫 （非悪性） |
有 | CRL-3390TM | |
| NF1 ipnNF95.11c | 神経線維腫症I型（NF1）患者の非腫瘍部末梢神経組織由来のシュワン細胞 | 叢状神経線維腫 （非悪性） |
有 | CRL-3391TM | |
| NF1 ipn02.3 2λ | 健常な腓腹神経組織由来のシュワン細胞 | 叢状神経線維腫 （非悪性） |
有 | CRL-3392TM | |
| 膵臓 （Pancreas） |
HPNE | 膵管上皮細胞 | 正常 | 有 | CRL-4023TM |
| HPNE E6/E7 | 膵管上皮細胞 | (hTERTとHPV-16 E6/E7導入) | 有 | CRL-4036TM | |
| HPNE E6/E7/K-RasG12D | 膵管上皮細胞 | (hTERTとHPV-16 E6/E7導入およびK-RASのG12D変異導入) | 有 | CRL-4038TM | |
| HPNE E6/E7/K-RasG12D/st | 膵管上皮細胞 | (hTERTとE6/E7/SV40 small t antigen導入およびK-RASのG12D変異導入) | 有 | CRL-4039TM | |
| HPNE E6/E7/st | 膵管上皮細胞 | (hTERTとE6/E7/SV40 small t antigen導入) | 有 | CRL-4037TM | |
| 前立腺（Prostate） | EP156T | 前立腺由来上皮細胞 | 正常 | 有 | CRL-3289TM |
| PF179T CAF | 前立腺由来線維芽細胞 | がん | 有 | CRL-3290TM | |
| SMC PM151T | 前立腺由来線維芽細胞 | 正常 | 有 | CRL-3291TM | |
| 腎臓（Renal） | RPTEC/TERT1 | 腎近位尿細管上皮細胞 | 正常 | 有 | CRL-4031TM |
| RPTEC/TERT1 OAT1 | 腎近位尿細管上皮細胞OAT1安定発現 | 正常 | 有 | CRL-4031-OAT1TM | |
| RPTEC/TERT1 OAT3 | 腎近位尿細管上皮細胞OAT3安定発現 | 正常 | 有 | CRL-4031-OAT3TM | |
| RPTEC/TERT1 OCT2 | 腎近位尿細管上皮細胞OCT2安定発現 | 正常 | 有 | CRL-4031-OCT2TM | |
| SV7tert PDGF tumor-1 | 腎臓上皮細胞 | 血管筋脂肪腫 | 有 | CRL-4008TM | |
| UMB1949 | 腎臓上皮細胞 | 結節硬化症の血管筋脂肪腫 | 有 | CRL-4004TM | |
| 網膜（Retinal） | RPE-1 | 網膜色素上皮細胞 | 正常 | 有 | CRL-4000TM |
追加しました。
細胞の不死化関連ツール
[在庫・価格 ：2024年04月25日 16時35分現在]
| 詳細 | 商品名 |
|
文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
|
pGRN145 plasmid; in E. coli GC10 |
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0 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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|
SV40, strain Baylor molecular clone pUCSV40-B2E |
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0 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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|
PA317 LXSN 16E6E7 MOUSE, EMBRYO FIBROBLAST, |
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0 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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|
Human papilloma virus; type 16 genome; purified phagemid DNA |
|
0 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
[在庫・価格 ：2024年04月25日 16時35分現在]
pGRN145 plasmid; in E. coli GC10
文献数： 0
- 商品コード：MBA-141
- メーカー：ACC
- 包装：0.4ml
- 価格：¥105,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：ご照会下さい ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：カルタヘナ該当品
| 説明文 |
※営利団体のお客様は分譲依頼書と別途書類の提出が必要です。また，本製品を創薬研究において，スクリーニングに使用される場合は，年間使用料として $4,000 が掛かります。詳しくはお問い合わせください。 |
||
|---|---|---|---|
| 法規制等 | カルタヘナ該当品 | ||
| 保存条件 | -80℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
|
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SV40, strain Baylor molecular clone pUCSV40-B2E
文献数： 0
- 商品コード：VRMC-3
- メーカー：ACC
- 包装：0.05ml
- 価格：¥173,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：ご照会下さい ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：カルタヘナ該当品
| 説明文 |
※分譲依頼書またはオンラインフォームでご依頼いただく必要があります。 |
||
|---|---|---|---|
| 法規制等 | カルタヘナ該当品 | ||
| 保存条件 | 法規備考 | ||
| 掲載カタログ |
|
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||
PA317 LXSN 16E6E7 MOUSE, EMBRYO FIBROBLAST,
文献数： 0
- 商品コード：CRL-2203
- メーカー：ACC
- 包装：1ml
- 価格：ご照会ください
- 在庫：無(未発注)
- 納期：ご照会下さい ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：カルタヘナ該当品
| 説明文 |
※分譲依頼書またはオンラインフォームでご依頼いただく必要があります。 |
||
|---|---|---|---|
| 法規制等 | カルタヘナ該当品 | ||
| 保存条件 | 液体窒素中での保存 | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
|
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Human papilloma virus; type 16 genome; purified phagemid DNA
文献数： 0
- 商品コード：45113D
- メーカー：ACC
- 包装：0.3ml
- 価格：ご照会ください
- 在庫：無(未発注)
- 納期：ご照会下さい ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
※分譲依頼書またはオンラインフォームでご依頼いただく必要があります。 |
||
|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
|
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ご注文方法
ご注文は専用の分譲依頼書またはオンラインオーダーフォームをご利用下さい。
ATCCR製品は、ご所属の研究機関・企業でATCC Material Transfer Agreement（MTA）にご同意いただいた上で、ご所属部門でユーザー登録書（New Account Application）を提出いただいたお客様が分譲のご依頼・ご購入いただくことができます。
MTAの締結・ユーザー登録の詳細につきましては、こちらをご覧下さい。
※MTAの締結・ユーザー登録がされていない場合、専用注文書／オンラインオーダーフォームをご提出いただいても、ご注文を受け付けることはできませんので、ご了承下さい。
© 2019 American Type Culture Collection. The ATCC trademark and trade name, and any other trademarks listed in this publication are trademarks owned by the American Type Culture Collection unless indicated otherwise.
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