昆虫ホルモンに関連する20-ヒドロキシエクジソン測定キット 20-Hydroxyecdysone EIA Kit
掲載日情報：2020/06/12 現在Webページ番号：64488
20-Hydroxyecdysone（20-ヒドロキシエクジソン）を競合法により比色定量するELISAキットです。
活性型Ecdysoneである 20-Hydroxyecdysoneの検量線
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Ecdysoneとは
Ecdysone（エクジソン、エクダイソン）は昆虫の変態ホルモンとして、1954年にマックス・プランク研究所のButenandtとKarlsonによって単離・結晶化されました。Ecdysoneを含む、昆虫の機能に関わるステロイドを総称してエクジステロイドと呼んでいます。一方、Ecdysonは昆虫以外にも、脊椎動物・無脊椎動物、植物にも存在することが分かってきました。
昆虫などの体内でEcdysonが変換されて生じる主要なポリ水酸化体は20-Hydroxyecdysone（20HE、20-ヒドロキシエクジソン）で、節足動物の成長、発達、変態、再生に大きな役割を果たしています。20Eは、核内レセプターのEcdysone Receptor（EcR）とUltraspiracle（USP）とが形成するヘテロダイマーと結合し機能しますが、これによる作用は変態や分化といった一方向性のものだけではなく、概日時計のような周期性の機構にも関与し、また原始的な昆虫を初めとする普遍的な現象であることも示唆されています。
参考文献
- Butenandt A. and Karlson P., Z. Naturforsch (in Germany), 9b, 389～391 (1954).
- Karlson P., Int. J. Dev. Biol., 40, 93～96 (1996).
- Iga M. and Kataoka H., Biol. Pharm. Bull. 35(6) 838～843 (2012).
- Hill R. J. et al., Annu. Rev. Entomol., 58, 251～71 (2013).
- Kamae Y. et al., PLoS ONE, 9 (12): e114899 (2014).
α-Ecdysone（前駆体、左図）および20-Hydroxyecdysone（活性体、右図）の構造式
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特長
- トレーサーとしてAChE（Acetylcholinesterase）標識20-Hydroxyecdysone、基質としてエルマン試薬を用いています。
- 96ウェルフォーマットを用い、1キットで34試料をデュプリケートで測定できます。
- 測定試料：EIA buffer中の試料（Haemolymph：血リンパなどの生物学的試料のメタノール抽出物*）
- 試料量：50μl
- 測定範囲：39～5,000 pg/ml
- 測定方法：比色
- 測定波長：405 nm～414 nm
＊本キットはEIA buffer中の試料を測定する様に最適化されています。生物学的試料（体液）を抽出せず測定する場合は、適切な希釈条件の選択や妨害物質の検討が必要となります。尚、体液試料の抽出に関しては、下記のプロトコールを推奨します。
試料調製方法
- メタノールによる体液試料の抽出
- 遠心して上清を回収
- エバポレーターで完全に乾固
- EIA bufferで希釈
詳細は、以下の参考文献の実験法を参照して下さい。
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参考文献
- Porcheron, P., et al., Insect Biochem, 19(2), 117～122(1989).
- Pascual, N., et al., Z. Naturforsch., 50c, 862～867(1995).
- Iga, M., et al., Arch. Insect. Biochem. Physiol., 00, 1～15(2012).
- Keshan, B., et al., Eur. J. Entomol., 112(4), 632～641(2015).
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使用例
Decapoda CRUSTACEAN（ARTHROPODS）における20-Hydroxyecdysoneの評価
本キットを用いて、1993までフランス西部のインド諸島で広く用いられていた殺虫剤のクロルデコン（CLD, chlordecone）の十脚目節足動物（Macrobrachium rosenbergii）の筋組織中の内分泌ホルモン20-Hydroxyecdysoneへの影響を研究した。測定結果から、CLD処理4日後を除き、コントロールに比べて低い20-Hydroxyecdysone濃度が測定された。このことから、十脚目節足動物においては、CLD処理濃度によって20-Hydroxyecdysoneの濃度に有意に影響されることが示された。下の画像をクリックすると詳細をご覧いただけます。
Environmental Stresses and Biomonitoring of Aquatic Ecosystems (SEBIO), UMR I 02, FR CNRS 3730,
Normandie University, UNILEHAVRE (France), Laboratory of Animal Ecology and Ecotoxicology (LEAE), University of Liège (Belgium)
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交差性
20-Hydroxyecdysone EIA Kitの定量キットの交差性*
| 化合物名 | 交差性（％） |
|---|---|
| 20-hydroxy-ecdysone | 100% |
| Ecdysone | 100% |
| 2-deoxy-20-hydroxy-ecdysone | 88% |
| Polypodine B | 70% |
| 2-deoxy-ecdysone | 63% |
| Ponasterone A | 43% |
| Cyasterone | 5% |
| Podecdysone C | 4.5% |
| Makisterone A | 4% |
| 26-hydroxy-ecsydone | 1.4% |
| Muristerone A | 1.2% |
| Kaladasterone | 1% |
| 22-epi-ecdysone | ＜0.1% |
| Posterone | ＜0.1% |
＊Porcheron, P., et al., Insect Biochem, 19(2), 117～122(1989).
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キット内容
- Mouse anti-rabbit precoated 96-well strip plate
- 20-Hydroxyecdysone tracer
- 20-Hydroxyecdysone antiserum
- 20-Hydroxyecdysone standard
- 20-Hydroxyecdysone quality control
- EIA buffer
- Wash buffer
- Tween 20
- Ellman's reagent_50
- Well cover sheet
※別途、UltraPure water*、405 nmあるいは 414 nmのフィルターを装備したプレートリーダが必要です。
※20℃付近で操作・反応を行って下さい。25℃を超えると反応効率の低下が起こります。
＊本キット中のEIA用試薬やバッファーの調製には、有機物の混入のない超純水が必要です。有機物のコンタミネーションにより、トレーサー（アセチルコリンエステラーゼ）の活性は大きく影響を受けます。蒸留水、HPLCグレード水、滅菌水は使用できません。
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価格
[在庫・価格 ：2025年04月25日 20時55分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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20-Hydroxyecdysone EIA Kit |
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[在庫・価格 ：2025年04月25日 20時55分現在]
20-Hydroxyecdysone EIA Kit
文献数： 1
- 商品コード：A05120
- メーカー：SPB
- 包装：1kit
- 価格：¥110,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：医薬用外毒物
| 説明文 | 測定試料：Haemolymph/Insect larvae，測定試料量：50 µL，測定範囲：39 - 5000 pg/mL |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | 医薬用外毒物 | ||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2019年8月1日号 p.27 ニュース2018年10月15日号 p.25
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| 製品記事 | 概日リズム(体内時計)研究関連製品特集 |
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