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in vivo腫瘍検出に有用な低分子抗体(VHH) Anti-Her2 (llama VHH domain antibody)

掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:64092

乳がんなどの腫瘍のマーカーであるHer2(ErbB2)に対する高品質なモノクローナルVHH抗体です。また、ビオチンやHRPなどで標識可能なC-tagを有しています。クリアランスが早いため、Her2を標的としたin vivoを含む各種イメージングに最適です。
QVQ社では、本製品の他にも、腫瘍マーカー、感染症関連ウイルス、心臓疾患、神経筋疾患、組織修復などに関連するタンパク質に対する高品質なモノクローナルVHH抗体を取りそろえています。
乳肺がんなどの腫瘍のマーカーであるEGFR(Epidermal Growth Factor Receptorに対する高品質なモノクローナルVHH抗体はこちらをご覧下さい。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。


ラマVHH抗体とは

ウサギやマウスなどの一般的なIgGは軽鎖と重鎖の2種類の組み合わせで構成されるのに対して、ラクダ科の動物は重鎖のみから構成されるIgGを有しています(図A)。
QVQ社のVHHはラマ由来の約15 kDaのシングルドメインからなるモノクローナル抗体です。VHHは通常の抗体の約10分の1の分子量で、高いアフィニティー、組織透過性、早い血中クリアランスを示し、ELISAや免疫沈降のみならずin vivo イメージングやin vitro ライブセルイメージングに有用です。また、C末端にフリーのシステインとC-tagが付加されています。マレイミド標識された蛍光色素やビオチンなどVHHへの任意の標識が可能であり(詳細は下記プロトコールをご参照下さい)、抗C-tag抗体による検出やアフィニティーレジンを用いた免疫沈降実験が簡単に行えます(図B)。

ラマVHH


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VHH抗体の特長

  • 高親和性
    IPまたはimmunoaffinity purificationに有用です。
  • 簡単に蛍光色素やビオチンなどで標識可能
    生細胞イメージングやin vivo イメージングに有用です。
  • 高い組織透過性
    in vivo イメージングやimmunohistochemistryに有用です。
  • 迅速な血液クリアランス
    高いSN比および短期間でin vivo イメージングが行えます。
  • 低分子量
    電子顕微鏡や超解像STED顕微鏡などの高分解能イメージングに有用です。

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抗Her2 VHH抗体(11A4)の使用例

抗Her2 VHH抗体(11A4)の使用例1

免疫蛍光染色像
Her2を過剰発現するBT474細胞の免疫蛍光染色像。1μMの抗Her2 VHH抗体(11A4)と細胞をインキュベートした後、ウサギ抗VHH抗体およびDAPIで検出した。Her2を過剰発現しないMDA MB 231細胞は、同様の濃度において11A4の結合を示さなかった。



抗Her2 VHH抗体(11A4)の使用例2

抗Her2 VHH抗体(11A4)の特異性
抗Her2 VHH抗体(11A4)の特異性について、ファミリータンパク質の細胞外ドメインをプラスチックプレート上にコーティングしたELISAによって確認した。抗Her2 VHH抗体(11A4)は、Her2に特異的に結合する。ELISAによりKd値は約1 nMと推定された。



抗Her2 VHH抗体(11A4)の使用例3

in vivo イメージング
部位特異的なIRDye 800CW(LI-COR)標識抗Her2 VHH抗体とランダム標識された従来の抗Her2マウスモノクローナル抗体(trastuzumab)を用いて、光学イメージングを比較した。Her2陽性SKBR3異種移植ヌードBALBcマウスまたはHer2陰性MDA-MB-231異種移植ヌードBALBcマウスにIRDye標識抗Her2 VHH抗体(11A4)およびIRDye標識trastuzumab 50μgを注射した。11A4は急速にSKBR3の腫瘍に蓄積し、4時間以内に腎臓を介して除去され、高いクリアランスを示した。MDA-MB-231異種移植マウスにおいて、11A4は腎臓を介してのみ除去されるため、この現象はHer2に特異的である。Her2陰性MDA-MB-231細胞に由来する腫瘍から11A4は検出されなかった。一方、trastuzumabは肝臓を介して非常にゆっくりと除去され、組織比腫瘍率を得るために長時間を要し、従来のtrastuzumab抗体は遅いクリアランスを示した。



抗Her2 VHH抗体(11A4)4

近赤外蛍光イメージガイド
Her2陽性SKBR3細胞を有する異種移植マウスにIRDye 800CW (LI-COR) 標識抗Her2 VHH抗体(11A4) 50μgを注射した。11A4は特異的に腫瘍に蓄積され、腎臓を介して除去された。赤矢印:腫瘍、緑矢印:腎臓。

Reference : Kijanka, et al., Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging, 40, 1718~1729 (2013).


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抗Her2 VHH抗体(11A4)の価格

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品 名Anti-Transferrin Receptor VHH
<Anti-TfR VHH>
Anti-Carbonic Anhydrase Ⅸ VHH
<Anti-CAⅨ VHH>
商品
コード
Q52cQ29c
使用例 抗Her2 VHH抗体(11A4)の使用例3
免疫蛍光染色像
試料:hTfR発現MDCK細胞
検出:Rabbit anti-VHH, Goat anti-rabbit-alexa488 (Emmerson, thesis, 2013)


抗Her2 VHH抗体(11A4)の使用例3
ELISA測定
試料:TfR発現MDCK細胞
検出:Mouse anti-myc, DAMPO
(Emmerson, thesis, 2013)
抗Her2 VHH抗体(11A4)の使用例3
免疫蛍光染色像
試料:CAIX-FLAG発現細胞
検出:Rabbit anti-VHH, Goat anti-rabbit-alexa488 (van Brussel, 2014)


抗Her2 VHH抗体(11A4)の使用例3
in vivoイメージング
低酸素前侵襲的性乳がんのDCIS腫瘍+CAIX異種移植片に50μgのVHHを注入し、3時間後に解析した。
ピンセットで挟んでいる部分が腫瘍部分。
(van Brussel, 2014)

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ラマVHH抗体の作製受託サービス

in vivoイメージングなどに有用な、ラマ由来モノクローナルVHH抗体を作製する受託サービスです。6クローンを選別し、各0.5 mgの精製VHHを納品します。 詳細はこちらをご覧下さい。

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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