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ほぼすべての種類のRNAからcDNAを合成できるキット RNA-Quant cDNA Synthesis Kit

掲載日情報:2012/07/09 現在Webページ番号:6298

mRNAやmiRNA、snRNAなど、様々な種類のRNAから定量的PCR解析に使用するcDNAを合成できるキットです。各種RNAを含むtotal RNAにpolyAタグの付加反応を行ってから、oligo dTアダプターでcDNA合成を行います。

本製品でcDNA合成が行えるRNA

RNAの種類 機 能
メッセンジャーRNA(mRNA) タンパク質をコードする
microRNA(miRNA) mRNAの翻訳を制御する
核内低分子RNA(snRNA) 転写されたpre-mRNAのスプライシングに関与する
核小体低分子RNA(snoRNA) メチル化の標的となるRNAへ修飾酵素を導く
長鎖ノンコーディングRNA(LncRNA) エピジェネティック的変化時にクロマチンに結合し、タンパク質複合体の足場となる
リボソームRNA(rRNA) リボソームの構成要素で、触媒活性を有する

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特  長

  • polyAポリメラーゼによりRNA分子にpolyAタグを付加後cDNA合成反応を行うという独自の手法により、ほぼすべての種類のRNAからcDNAを合成することができます。
  • 定量的PCR解析時にキット付属の3' universal primerを使用することにより、minus RTコントロールや残存ゲノムDNAからの増幅をほぼ完全に抑えることができます。
  • コントロールとしてmiR-16 microRNA、Y RNA、GAPDH RNA用(ヒト・マウス共用)に対するプライマーセットが含まれています。
  • キットにはpolyAタグの付加およびcDNA合成を20回行うのに十分な量の試薬が含まれています。

本製品を使用した解析例

ヒトHT1080細胞よりtotal RNAを抽出し、本製品を使用して合成したcDNAを試料として、定量的PCR解析を行った。mRNAやsnRNA、snoRNA、rRNAと、種類の異なるRNA由来のcDNAを増幅できている。

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操作方法概略

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キット内容

  • PolyA polymerase buffer
  • PolyA polymerase
  • MnCl2
  • ATP
  • Oligo dT adaptor
  • Reverse transcriptase buffer + random primer mix
  • Reverse transcriptase
  • Dithiothreitol
  • dNTP mix
  • RNase-free water
  • 3' universal reverse primer
  • miR-16 microRNA qPCR assay
  • Y RNA lncRNA qPCR assay
  • GAPDH mRNA qPCR assay

本製品にはSYBR® Green qPCR Mastermixは含まれていません。2× Maxima SYBR® Green with ROX(Fermentas社)、Power SYBR® Master Mix(Thermo Fisher Scientific 社)のご使用をお勧めします。

[在庫・価格 :2024年04月25日 00時00分現在]

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RNA-Quant cDNA Synthesis Kit (20reactions)
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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