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PURO-Fluor Protein Synthesis Labeling Kit
細胞内におけるタンパク質合成を緑色蛍光で測定するキット PURO-Fluor Protein Synthesis Labeling Kit
掲載日情報：2015/03/17 現在Webページ番号：62970
細胞内におけるタンパク質合成を、放射性同位体標識アミノ酸を用いずに、蛍光色素で測定できるキットです。ピューロマイシンアナログが細胞内の翻訳中のペプチドに取り込まれ、蛍光色素のクリックケミストリーによるラベリングで検出します。
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特長
- タンパク質合成を、放射性同位体標識アミノ酸を用いずに測定できます。
- O-Propargyl-puromyin (OPP) は、分子内にアルキン基を有する膜透過性のピューロマイシン類縁体で、翻訳中のポリペプチド鎖のC末端に取り込まれます。
- お手持ちの蛍光測定装置（フローサイトメーター、蛍光顕微鏡、プレートリーダー）で測定が可能です。
- 1キットで、フローサイトメーター20回分、96ウェルプレート1枚分の測定が可能です。
- 測定波長：励起485 nm／蛍光535 nm（5-Carboxyfluorescein；5-FAM）。
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測定原理
- 細胞をOPP working solutionで処理する。OPP添加によりタンパク質の合成が阻害される。
- タンパク質のC末端に付加されたOPPのアルキン基を、クリックケミストリーを利用して、5-FAM-azideと反応させる。
- 5-FAM標識されたタンパク質の蛍光を観察・測定する。
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使用例
本キットを用いて、タンパク質合成阻害作用を有するシクロヘキシミドの細胞への影響を調べた。
蛍光顕微鏡による観察
RAW264.7細胞を、50μg/mlのシクロヘキシミドの存在下（C）、または非存在下（A, B）で30分間培養した。その後培地（A）、OPP(B)、またはOPPとおよび50μg/mlのシクロヘキシミドで細胞を1時間処理し、蛍光を観察した。
フローサイトメトリーによる測定
THP-1細胞を50μg/mlのシクロヘキシミドで30分間処理した後、培地（黒線）、OPP（青線）、またはOPPと50μg/mlのシクロヘキシミドで1時間処理し、蛍光を測定した。
プレートリーダーによる測定
HEK293T細胞を50μg/mlのシクロヘキシミドで処理した後、OPPおよび5-FAMを添加し、蛍光を測定した。
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キット内容
- Cell-based assay wash buffer
- Cell-based assay fixative
- Cell-based assay TBS (10X)
- O-Propargyl-Puromycin stock solution
- Copper sulfate solution
- Ascorbic acid solution
- Cell-based assay 5 FAM-Azide stock solution
- Cell-based assay cycloheximide
※本製品に、培養用のマイクロプレートは含まれておりません。
※測定には、フローサイトメーター、蛍光顕微鏡、プレートリーダーなどの測定機器が必要です。
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価格
[在庫・価格 ：2025年04月25日 14時15分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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PURO-Fluor Protein Synthesis Labeling Kit |
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[在庫・価格 ：2025年04月25日 14時15分現在]
PURO-Fluor Protein Synthesis Labeling Kit
文献数： 0
- 商品コード：601100
- メーカー：CAY
- 包装：96tests
- 価格：¥105,300
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：医薬用外劇物
| 説明文 | 細胞内におけるタンパク質合成を，放射性同位体標識アミノ酸を用いずに，蛍光色素で測定できるキット。 |
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| 法規制等 | 医薬用外劇物 | ||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2018年12月15日号 p.6
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