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尿中の銅を高感度に定量できるキット メタロアッセイ低濃度銅測定LSキット

掲載日情報:2019/06/11 現在Webページ番号:5914

尿試料中の銅をマイクロプレートリーダーなどで迅速に定量できるキットです。多数の試料を室温で短時間かつ高感度に測定できます。


MEMO

尿中銅定量の意義について


銅は金属運搬タンパク質であるセルロプラスミンや,活性酸素の除去酵素であるSODの構成要素として生体内で欠かすことのできない必須微量元素です。経口摂取された銅は小腸で吸収され,血清中ではそのほとんどがセルロプラスミン結合型として存在しています。

代表的な銅過剰症疾患であるWilson病では,染色体劣性遺伝により銅輸送タンパク質(ATPase)が欠損しています1。この欠損によって肝細胞内に銅が過剰に蓄積され,血中非セルロプラスミン銅が増加し,錐体外路症状(知能障害),腎障害,二次性Fanconi症候群,Kayser-Fleisher角膜輪,セルロプラスミン合成阻害による血清銅の低下が起こり,その一方で肝細胞壊死による劇症肝炎,肝不全,溶血発作,肝炎を経て肝硬変へ至ります。その発症は肝臓から胆汁中への銅排泄障害が主因であり,肝臓,大脳基底部,角膜,腎臓などに過剰な銅沈着を生じ,上述以外にも全身諸臓器障害を起こすことが明らかになっています。銅キレート剤を投与後に尿中銅が高値であった場合はWilson病が疑われます2, 3

参考文献

1. Wilson, S. A. K., Brain, 34, 295~309 (1912).
2. Osman, M.A., et al., Clin. Pharmacol. Ther., 33, 465~470 (1983).
3. Taira, K., et al., Jpn. J. Pediatr. Med., 29, 139~144 (1997).

特  長

  • 銅輸送タンパク質から銅イオンを解離させ,キレート発色により濃度を求めます。
  • 尿中に含まれる銅濃度に測定範囲を最適化してあります。
  • 尿試料以外にも同測定範囲を対象とした試料へ応用可能です。
  • 分光光度計やプレートリーダーによる測定に加え,キットに添付の標準液で色見本を調製することにより,目視による簡易検出も可能です(下記参照)。
  • 尿試料の場合,複雑な前処理は不要で直接測定可能です。
  • 増感剤の処方により高感度に定量可能です。
  • 3,5-Br-PAESAキレート反応を利用することにより,高い特異性で銅イオンを検出可能です。
  • 必要試料量は,96ウェルプレートを使用する場合わずか100μlです。
  • 発色反応は10分で完結し,長時間安定なため,多数の試料のスクリーニングにも最適です。
  • 100μg/dlのFe,Znの共存による測定値への影響は5%以内です。
  • 測定範囲:10~80μg/dl(目視判定),2~80μg/dl(紫外可視吸光光度法による定量)
  • 測定感度:ΔOD:0.4~0.8(試薬をブランクとして銅標準液(100μg/dl)を測定)
  • 同時再現性:CV値≦5%(同一試料を5回測定時)
  • 測定波長:582 nm(波長域:570~590 nm,補正波長:650~700 nm)

本キットは尿中の銅定量に最適化されています。血清銅を定量する場合は,メタロアッセイ銅測定LS-MPRをご使用下さい。
試料にはEDTAなどの他のキレート剤を添加しないで下さい。

本法とICP-OES法による銅測定値の比較(高濃度銅含有尿試料)

色見本の調製例

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測定原理

発色試薬である3,5-DiBr-PAESAは銅イオンと結合すると,銅キレート錯体を生成し,赤色から紫色に色調が変化します。この発色レベルにより,尿中の銅濃度を求めることができます。

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参考文献

Abe, A., et al., Clin. Chem., 35 (4), 552~554 (1989).

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測定試料の調製例

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操作方法概略

1. R-A緩衝液とR-Rキレート試液を混合して発色試液とする(用時調製)。

2. 銅標準液を蒸留水で希釈する(用時調製)。

3. 試料,標準液,発色試液を試験管,マイクロプレートなどの清浄な容器に分注し,十分に混合する。

4. 常温で10分間静置後,紫外可視分光光度計またはマイクロプレートリーダーで測定する。目視判定の場合は試料と標準液の色調を目視により比較する。

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キット内容

  • R-A緩衝液
  • R-Rキレート試液
  • 銅標準液

[在庫・価格 :2019年09月21日 00時12分現在]

※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
Copper,Low Concentrate,Assay Kit <メタロアッセイ 低濃度銅 測定LS(尿中銅計量キット)(100測定用)>
- 2
説明文
測定試料:尿,唾液,測定範囲:2-80 μg/d (UV),検出方法:呈色,測定波長:582 nm,アッセイ法:Assay,アッセイ数:100 tests
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年4月15日号 p.27
ニュース2017年10月15日号 p.18

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説明文
測定試料:尿,唾液,測定範囲:2-80 μg/d (UV),検出方法:呈色,測定波長:582 nm,アッセイ法:Assay,アッセイ数:200 tests
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年4月15日号 p.27
ニュース2017年10月15日号 p.18

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[在庫・価格 :2019年09月21日 00時12分現在]

※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。

Copper,Low Concentrate,Assay Kit <メタロアッセイ 低濃度銅 測定LS(尿中銅計量キット)(100測定用)>

文献数:2

  • 商品コード:CU20M
  • メーカー:AKJ
  • 包装:1kit
  • 価格:¥49,800
  • 在庫:1個
  • 納期:-
  • 法規制等:

説明文 測定試料:尿,唾液,測定範囲:2-80 μg/d (UV),検出方法:呈色,測定波長:582 nm,アッセイ法:Assay,アッセイ数:100 tests
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年4月15日号 p.27
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文献数:1

  • 商品コード:CU21M
  • メーカー:AKJ
  • 包装:1kit
  • 価格:¥79,800
  • 在庫:無(未発注)
  • 納期:1週間程度 
  • 法規制等:

説明文 測定試料:尿,唾液,測定範囲:2-80 μg/d (UV),検出方法:呈色,測定波長:582 nm,アッセイ法:Assay,アッセイ数:200 tests
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年4月15日号 p.27
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(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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