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未固定の多能性幹細胞を観察できる蛍光標識抗体セット GloLIVE Human Pluripotent Stem Cell Live Cell Imaging Kit

掲載日情報:2020/02/14 現在Webページ番号:5378

ヒト多能性幹細胞を、固定せずに生きたまま蛍光染色できる抗体のセットです。染色後の細胞は、生存能や幹細胞性を維持したまま培養を行うことができます。

特長

  • 未固定のヒト多能性幹細胞(ES細胞、iPS細胞を含む)を生細胞のままで蛍光染色する製品です。
  • フィーダー細胞使用・未使用のいずれの培養条件でも染色できます。
  • ヒト多能性幹細胞のポジティブマーカー(SSEA-4, TRA-1-60(R), TRA-1-81)およびネガティブマーカー(SSEA-1)に対する抗体がセットになっています。
  • 各抗体はいずれも強い蛍光を発し、退色しにくい蛍光色素NorthernLights(NL)で標識されており、PBS溶液(50×)で供給されます。
    蛍光色素 励起波長(nm) 蛍光波長(nm)
    NL493 493 514
    NL557 559 575
  • 染色後の細胞の増殖性および多能性が維持されることを確認しています。(下記参照
  • 1回に500μl使用した場合、25回の染色が可能です。
  • 低エンドトキシン(5 EU/ml以下)です。

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操作方法概略

  1. 抗体を培地で希釈する。
  2. 培養した細胞から培地を除去し、1.の抗体を加えて30分間インキュベートする。
  3. 2.の抗体を含む培地を除去し、新しい培地で1回洗浄した後、さらに新しい培地を加えて培養する。
  4. 細胞を観察し、必要に応じて培養を継続する。

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解析例

本製品によるヒト多能性幹細胞の蛍光染色

GloLIVE Human Pluripotent Stem Cell Live Cell Imaging KitによるヒトiPS2細胞の蛍光染色

ヒトiPS2細胞
Irradiated Mouse Embryonic Fibroblasts(#PSC001)を用いて培養し、本製品で染色した。
iPS2は、R&D Systems独自の方法で樹立した細胞株です。
緑色:NL493標識抗SSEA-4抗体
赤色:NL557標識抗SSEA-1抗体 (A)
赤色:NL557標識抗TRA-1-60(R) 抗体 (B)
青色:Hoechst 33342(核染色)

GloLIVE Human Pluripotent Stem Cell Live Cell Imaging KitによるJOY1ヒトiPS細胞の蛍光染色

TRA-1-81を発現しているJOY1ヒトiPS細胞

ヒトES細胞の生存率と多能性維持の検証

GloLIVE Human Pluripotent Stem Cell Live Cell Imaging Kitで蛍光染色した細胞の生存率の検証

細胞生存率の検証

ヒトES細胞(BG01V、0.5×106個)を播種し(0日目)、培養1日目にNL標識抗体で染色した細胞(緑色)と、非染色の細胞(水色)を、培養4日目に回収してそれぞれの細胞数を計測した。NL標識抗SSEA-4 / TRA-1-60(R) / SSEA-1抗体が、細胞の生存率に影響を及ぼしていないことが確認できた。

GloLIVE Human Pluripotent Stem Cell Live Cell Imaging Kitで蛍光染色した細胞の多能性維持の検証

多能性維持の検証

NL標識抗体で染色(緑色)または非染色(水色)のヒトES細胞(BG01V)を3日間培養した。細胞を回収し、抗Oct-3/4 抗体(#IC1759P)またはアイソタイプコントロール(灰色:#IC013P)で染色した。NL標識抗SSEA-4 / TRA-1-60(R) / SSEA-1抗体が、細胞の多能性に影響を及ぼしていないことが確認できた。

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キット内容

Positive Markers

  • Anti-h/mSSEA-4 monoclonal antibody, NL493-conjugated (mouse IgG3)
  • Anti-TRA-1-60(R) monoclonal antibody, NL557-conjugated (mouse IgM)
  • Anti-TRA-1-81 monoclonal antibody, NL493-conjugated (mouse IgM)

Negative Marker

  • Anti-h/mSSEA-1 monoclonal antibody, NL557-conjugated (mouse IgM)

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マーカー抗体単品

商品コードをクリックすると、価格表をご覧いただけます。
製品の詳細は、ES/iPS細胞を固定せずに染色できる抗体「GloLIVEシリーズ」をご覧下さい。

抗体名 交差性 クローン 標識 商品コード
抗SSEA-1抗体 ヒト、マウス MC-480 NL493 NLLC2155G
NL557 NLLC2155R
抗SSEA-4抗体 ヒト、マウス MC-813-70 NL493 NLLC1435G
NL557 NLLC1435R
抗TRA-1-60抗体 ヒト TRA-1-60 NL493 NLLC4770G
NL557 NLLC4770R
抗TRA-1-81抗体 ヒト TRA-1-81 NL493 NLLC16581G

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価格

[在庫・価格 :2024年03月29日 00時00分現在]

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GloLIVE Human Pluripotent Stem Cell Live Cell Imaging Kit
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GloLIVE Human Pluripotent Stem Cell Live Cell Imaging Kit

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  • 商品コード:SC023B
  • メーカー:RSD
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Anti-Human/Mouse Oct-3/4 Phycoerythrin MAb (Clone 240408)
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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クローン:240408
Genbank No: 5460
Protein Accession No: Q01860
法規制等
保存条件 4℃,暗所保存,凍結禁止 法規備考
抗原種 免疫動物 Rat クラス IgG 標識 PE
交差性 Human 適用 FCM
クロナリティ Monoclonal フォーマット 性状 Protein A/G Affinity Purified 吸収処理
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標識 PE 性状 Protein A/G Affinity Purified
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クロナリティ Monoclonal フォーマット
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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