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エクソソームにmiRNAを導入するシステム XMIR Exosome miRNA Packaging System

掲載日情報:2019/06/18 現在Webページ番号:53149

System Biosciences社は、膨大なエクソソーム次世代シークエンスデータを分析し、エクソソームに取り込まれるsmall RNAに特異的なRNA配列“XMotif”を同定しました。目的のmiRNAまたはAnti-miRNAにXMotif配列をタグ付けすることにより、エクソソームを介して標的細胞に導入することができます(左下図参照)。目的RNAが導入されたエクソソームは、標的細胞中の特定のタンパク質の発現量の調節を行うことが可能です。

Exosome(エキソソーム、エクソソーム)特集バナー

使用例

XMIR-1およびXMIR-122のエクソソームへのトランスフェクションの確認とエクソソームを介した3'UTRレポター細胞のルシフェラーゼ活性

WB analysis Quantitation analysis
XMIR-1およびXMIR-122をトランスフェクションしたエクソソームのqPCRによる定量 XMIRを用いた3'UTRレポーター細胞へのmiR-1およびmiR-122の導入により、ルシフェラーゼ活性は減少する。

XMIR-21による内在性PDCD4タンパク質レベルのノックダウン

WB analysis Quantitation analysis
miRNA-21 XMIRオリゴ(#XMIR-21)または抗miRNA-21 AXMIRオリゴ(#AXMIR-21)をトランスフェクションしたHEK-293細胞由来のエキソソームを培養中のナイーブHEK-293細胞に添加した。24時間後、全細胞ライセートを採取し、既知のmiR-21の標的であるPDCD4についてウエスタンブロッティングを行った。GAPDHをローディングコントロールおよびリファレンスシグナルとして用いて、バンド強度定量分析を行った。 左図のバンド強度定量分析結果。XMIR-21を導入したエクソソームで処理した細胞はPDCD4の発現量が低下し、AXMIR-21エクソソームで処理した細胞はPDCD4の発現量の増加が確認できる。

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操作方法概略

XMIR Exosome miRNA Packaging System操作方法概略

  1. XMotifタグ付きRNA(XMIR / AXMIR)を、エクソソーム産生細胞*1にトランスフェクション*2する。
  2. 24時間後、RNAを取り込ませたエクソソームを、ExoQuick-TCを用いて濃縮する。
  3. エクソソームをPBSに懸濁し、目的のアッセイに使用する。

*1 細胞培養の際にはエクソソームの混入が起きないよう、エクソソーム除去FBSをご使用下さい。
*2 トランスフェクション試薬には、PureFection (#LV750A-1)がお勧めです。

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特長

  • RNAによりmiRNA(XMIR)またはAnti-miRNA(AXMIR)を直接エキソソームに導入する製品、およびレンチウイルスを介したトランスダクションにより導入する製品(XMIRpress)があります。
  • XMIRXpressには、miRNAが組み込み済みのプリメイドタイプと、任意のRNA配列を組み込めるベクターがあります。
  • RNAを取り込ませたエクソソームを用いて、細胞機能のノックダウン実験や、エクソソームによるmiRNA輸送経路の解析を行うことができます。
  • エクソソーム受容細胞におけるmiRNA標的の発現調節や、エクソソームを介したmiRNA療法の開発への応用も期待されます。

RNAを取り込ませたエクソソームのイメージ

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製品ラインナップ

商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。

製品フォーマット RNA oligo Lentivector
製品イメージ
RNA oligo

XMotifタグ付きRNA発現用レンチウイルスベクター(XMIRXpress)のプラスミドマップ

シリーズ名 XMIR AXMIR XMIRpress
取り込ませるRNA miRNA Anti-miRNA miRNA
包装 10 tests 10 tests 10μg
miRNA名 商品コード
miRNA-1-3p XMIR-1 AXMIR-1 XMIRXP-1
miRNA-10a-5p XMIR-10a XMIRXP-10a
miRNA-21-5p XMIR-21 AXMIR-21 XMIRXP-21
miRNA-29a-3p XMIR-29a AXMIR-29a XMIRXP-29a
miRNA-29b-3p - - XMIRXP-29b
miRNA-31-5p XMIR-31 AXMIR-31 XMIRXP-31
miRNA-34a-5p XMIR-34a AXMIR-34a XMIRXP-34a
miRNA-122-5p XMIR-122 AXMIR-122 XMIRXP-122
miRNA-124a-3p XMIR-124a AXMIR-124a XMIRXP-124a
miRNA-125a-5p XMIR-125a AXMIR-125a XMIRXP-125a
miRNA-125b-5p XMIR-125b AXMIR-125b XMIRXP-125b
miRNA-127-3p XMIR-127 XMIRXP-127
miRNA-145-5p XMIR-145 AXMIR-145 XMIRXP-145
miRNA-146a-5p XMIR-146a AXMIR-146a XMIRXP-146a
miRNA-150-5p XMIR-150 AXMIR-150 XMIRXP-150
miRNA-155-5p XMIR-155 AXMIR-155 XMIRXP-155
miRNA-200c-3p XMIR-200c AXMIR-200c XMIRXP-200c
miRNA-203a-3p XMIR-203 AXMIR-203 XMIRXP-203
miRNA-205-5p XMIR-205 AXMIR-205 XMIRXP-205
miRNA-219a-5p XMIR-219 AXMIR-219 XMIRXP-219
miRNA-221-3p XMIR-221 AXMIR-221 XMIRXP-221
miRNA-222-3p XMIR-222 AXMIR-222 XMIRXP-222
miRNA-223-3p XMIR-223 AXMIR-223 XMIRXP-223
miRNA-224-5p XMIR-224 AXMIR-224 XMIRXP-224
miRNA-486-5p XMIR-486 XMIRXP-486
miRNA-let7a-5p XMIR-let7a AXMIR-let7a XMIRXP-let7a
Texas-Red*3 XMIR-POS

*3 ポジティブコントロール用

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製品フライヤーダウンロード

下の画像をクリックすると、製品の使用例などを含むフライヤーをダウンロードいただけます。



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クローニングベクター/コントロール用ベクター

任意のRNA をエクソソームに取り込ませたい場合は、クローニングベクター(#XMIRXP-Vect)をご使用下さい。

特定のRNA をターゲティングしない、コントロール用ベクター(#XMIRXP-NT)もあります。

[在庫・価格 :2024年12月01日 00時00分現在]

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XMIRXpress cloning lentivector with Xmotif
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掲載カタログ ニュース2023年11月15日号 p.23
ニュース2022年10月15日号 p.29

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ニュース2022年10月15日号 p.28

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XMIRXpress cloning lentivector with Xmotif

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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