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好中球の形成したNETに含まれるエラスターゼの活性を測定するキット Neutrophil Extracellular Trap (NET) Assay Kit

掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:53100

好中球の形成したNET(Neutrophil Extracellular Trap:好中球細胞外トラップ)に含まれるエラスターゼの酵素活性を測定するキットです。NETの形成量が推測できます。
エラスターゼ基質が分解されることで生じる呈色反応により、エラスターゼ活性を測定します。キットには、好中球のNET形成を促進するPMA、Calcium inophore A-23187が付属します。

NETとは

Production of neutrophil extracellular traps (NETs) is a key feature of the neutrophil antimicrobial response in which neutrophils weave web-like nets from DNA, histones, and antimicrobial macromolecules upon encountering a bacterial challenge. These NETS, which are also comprised of myeloperoxidase, neutrophil elastase, and lactotransferrin, are extruded to capture and possibly kill any nearby bacteria. Once released, NETs are rapidly cleared by the action of plasma DNAse and by macrophages via scavenger receptor-mediated phagocytosis of the NET/neutrophil complex. Previous methods for detection of NET generation have used fluorescent DNA-intercalating dyes. However, because DNA release can also occur as a result of mechanical cellular injury or necrosis, the use of DNA as a definitive readout of NET production has been called into question.

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使用例

本製品を用いて作成した標準曲線

本製品を用いたエラスターゼ活性の測定例

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操作方法概略

  1. ウェルに好中球を添加する。
  2. 好中球をウェル底面に接着させる。
  3. 好中球を刺激し、可溶型エラスターゼを放出させ、NET形成を促す。
  4. ウェルを洗浄し、NETに結合していないフリーのエラスターゼを除去する。
  5. ウェルにS7ヌクレアーゼを添加し、NETを分解する。
  6. 試料を低速で遠心する。
  7. 上清を96ウェルプレートに移し、エラスターゼ基質を添加する。
  8. 基質が黄色に呈色する。

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キット内容

  • PMA assay reagent
  • NET assay S7 nuclease
  • NET assay EDTA
  • NET assay neutrophil elastase substrate
  • Human neutrophil elastase assay reagent
  • A-23187 assay reagent
  • Bovine serum albumin assay reagent
  • Calcium chloride assay reagent
  • 96 well solid plate
  • 96 well cover sheet

[在庫・価格 :2024年04月25日 10時15分現在]

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Neutrophil Extracellular Trap (NET) Assay Kit
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Neutrophil Extracellular Trap (NET) Assay Kit

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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