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メーカー：	Horizon社Dharmacon製品 OriGene Technologies TransOMIC Technologies
	Horizon社Dharmacon製品(メーカー略称：DHA)のRNAiコレクション，cDNAコレクション，Yeastコレクションなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら OriGene Technologies社(メーカー略称：ORI)のTrueClone / TrueORF / TrueORF Gold cDNAクローンなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら TransOMIC Technologies社(メーカー略称：TOT)のRNAiコレクション，cDNAコレクション，Yeastコレクションなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら
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HOME> 試薬> 天然物／有機化合物／糖質> 天然物／有機化合物> 毒素およびターゲットトキシン> セカンドイムノトキシン

標的細胞に選択的な細胞死を誘導するサポリン標識二次抗体セカンドイムノトキシン

掲載日情報：2021/03/19 現在Webページ番号：5113

アドバンストターゲッティングシステムズ /
Advanced Targeting Systems
[メーカー略称：ATS]

二次抗体にサポリン（ZAP）を標識したセカンドイムノトキシン（Ab-ZAP）および、一次抗体のスクリーニングに必要なすべての試薬をセットにした☞ ZAP Antibody Internalization Kitがあります。お手持ちの未標識一次抗体を用いて標的細胞に選択的な細胞死を誘導できます。

※本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

ZAP Antibody Internalization Kitの概要

セカンドイムノトキシンとは
特長
製品ラインナップ
キット内容
使用例
ビデオチュートリアル

セカンドイムノトキシンとは

セカンドイムノトキシンは、各種二次抗体にサポリンを結合させた製品です。未標識一次抗体を用いた☞ ターゲットトキシン実験が可能です。
サポリンはサボンソウ（Saponaria officinalis ）の種子に含まれる毒素タンパク質で、直接リボソームを不活性化することでタンパク質合成を阻害し、極めて低濃度で細胞死を引き起こします。

抗体またはリガンドとサポリンが結合した☞ ターゲットトキシン（イムノトキシン）は、標的細胞膜上の抗原またはレセプターを介して細胞内に取り込まれ、サポリンの作用によりリボソームを不活性化します。これによりタンパク質合成阻害が起こり、その結果、標的細胞のみに細胞死を誘導します。

ターゲットトキシンの原理

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特長

抗ニワトリ、ヤギ、モルモット、ヒト、マウス、ウサギ、ラット抗体の製品があります。お手持ちの一次抗体に適した製品をご選択下さい。
セカンドイムノトキシンは一次抗体と結合した後、細胞内へ取り込まれます。その後、遊離したサポリンが細胞内リボソームを不活性化します。これにより特定の細胞のみに細胞死を引き起こすことができます。
一次抗体にサポリンを直接標識する必要がありません。

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製品ラインナップ

セカンドイムノトキシンは、以下の3つの製品群より構成されます。各製品群をクリックすると、詳細をご覧いただけます。

☞ ZAP Antibody/ZAP Antibody Internalization Kit
サポリン標識二次抗体

☞ Streptavidin ZAP Antibody Kit

☞ Streptavidin ZAP Peptide Kit

ZAP Antibody／ZAP Antibody Internalization Kit

二次抗体にサポリンを標識したセカンドイムノトキシン（Ab-ZAP）です。キットにはそれに加え、細胞毒性評価試験に必要なブランクコントロール（BIg-SAP、Ab-ZAPと同一動物種・同一アイソタイプのサポリン標識イムノグロブリン）,サポリン、PMS/XTTが含まれます。商品コードをクリックすると各製品の価格表、をクリックすると各製品の使用例をご覧いただけます。

一次抗体の動物種	製品種別	商品コード
二次抗体の種別		IgG（IgY）（二価）			IgG Fab（一価）
標的とする一次抗体の認識部位		全IgG分子	全IgM分子	VHHドメイン	全IgG分子	Fcドメイン	IgMのFcドメイン
Human	Ab-ZAP	IT-22	IT-43	－	IT-51	IT-65	IT-78
Human	ZAP Ab Kit	KIT-22	KIT-43	－	KIT-51	KIT-65	KIT-78
Mouse	Ab-ZAP	IT-04	IT-30	－	IT-48	－	－
Mouse	ZAP Ab Kit	KIT-04	KIT-30	－	KIT-48	－	－
Rabbit	Ab-ZAP	IT-05	－	－	IT-57	－	－
Rabbit	ZAP Ab Kit	KIT-05	－	－	KIT-57	－	－
Rat	Ab-ZAP	IT-26	－	－	IT-55	IT-88	－
Rat	ZAP Ab Kit	KIT-26	－	－	KIT-55	KIT-88	－
Goat	Ab-ZAP	IT-36	－	－	－	－	－
Goat	ZAP Ab Kit	KIT-36	－	－	－	－	－
Checken (IgY)	Ab-ZAP	IT-62	－	－	－	－	－
Checken (IgY)	ZAP Ab Kit	KIT-62	－	－	－	－	－
Guinea pig	Ab-ZAP	IT-64	－	－	－	－	－
Guinea pig	ZAP Ab Kit	KIT-64	－	－	－	－	－
Alpaca	Ab-ZAP	－	－	IT-87	－	－	－
Alpaca	ZAP Ab Kit	－	－	KIT-87	－	－	－

Streptavidin ZAP Antibody Kit

in vivoにおける内在化アッセイにおいて、セカンドイムノトキシンとして使用されるサポリン標識二次抗体（Ab-ZAP）に対応したブランクコントロール（BIg-SAP、非標的サポリン標識イムノグロブリン）とサポリン標識ストレプトアビジン（Streptavidin-ZAP, #IT-27）のセットです。ご使用される二次抗体の免疫動物種に対応した製品をご選択下さい。商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

標的物質	結合物質	セカンドイムノトキシンのタイプ		商品コード
細胞膜表面抗原タンパク質	抗原特異的一次抗体	サポリン標識二次抗体（Ab-ZAP）		25μg each	100μg each	250μg each
		一次抗体の免疫動物種	Human	KIT-27-Ahu25	KIT-27-Ahu100	KIT-27-Ahu250
			Mouse	KIT-27-Amu25	KIT-27-Amu100	KIT-27-Amu250
			Rabbit	KIT-27-Arb25	KIT-27-Arb100	KIT-27-Arb250
			Rat	KIT-27-Ara25	KIT-27-Ara100	KIT-27-Ara250
			Goat	KIT-27-Agt25	KIT-27-Agt100	KIT-27-Agt250

Streptavidin ZAP Peptide Kit

in vivoにおける内在化アッセイにおいて、ビオチン標識ペプチドをセカンドイムノトキシンとして使用する場合のブランクコントロール（Blank-Strep-SAP, #IT-27B）とStreptavidin-ZAP（#IT-27）のセットです。Blank-Strep-SAP（#IT-27B）は、結合するレセプターが存在しない非標的のビオチン標識ペプチド（G-タンパク質結合レセプターのアミノ酸残基を有するメラノサイト刺激ホルモンからランダムに混合した11aaのペプチドであり、NCBI/BLASTにより相同配列がないことを確認済み）とサポリンを結合したものです。商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

標的物質	結合物質	セカンドイムノトキシンのタイプ	商品コード
標的物質	結合物質	セカンドイムノトキシンのタイプ	25μg each	100μg each	250μg each
レセプタータンパク質	ビオチン標識リガンド（ペプチド）	サポリン標識ストレプトアビジン（Streptavidin-ZAP）	KIT-27-B25	KIT-27-B100	KIT-27-B250

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キット内容

キット種別		ZAP Antibody Internalization Kit	Streptavidin ZAP Antibody Kit	Streptavidin ZAP Peptide Kit
キット内容	サポリン標識二次抗体（Ab-ZAP）^*1	●	●	－
	ブランクコントロール（BIg-SAP）^*1	●	●	－
	ブランクコントロール（Blank-Strep-SAP）^*1	－	－	●
	サポリン	●	－	－
	PMS^*2	●	－	－
	XTT^*3	●	－	－
	サポリン標識ストレプトアビジン（Streptavidin-ZAP）	－	●	●

＊1 キットにより内容は異なります。
＊2 PMS：N-methyl dibenzopyrazine methyl sulfate
＊3 XTT：Sodium 3'-[1（-phenylaminocarbonyl)-3,4－tetrazolium]-bis(4-methoxy-6-nitro) benzene sulfonic acid hydrate

使用例

ZAP Antibody／ZAP Antibody Internalization Kit

Hum-ZAP（#IT-22）による細胞毒性効果

PC12細胞を96ウェルプレートに播種（5,000 cells/90μl/well）し、一晩インキュベートした。コントロール用サポリン（#PR-01）、OX7-SAP（#IT-02）、抗OX7抗体（#>AB-N08）＋最終濃度4.5 nM Hum-ZAP（2種類のロット）を各ウェルにそれぞれ10μlずつ添加し、72時間インキュベートした後、MTS/PMS（テトラゾリウム塩／電子輸送試薬）で細胞毒性効果を検証した。

Mab-ZAP（#IT-04）による細胞毒性効果

PC12細胞を96ウェルプレートに播種（5,000 cells/90μl/well）し、一晩インキュベートした。コントロール用サポリン（#PR-01）、OX7-SAP（#IT-02）、抗OX7抗体（#AB-N08）＋最終濃度4.5 nMMab-ZAP（2種類のロット）を各ウェルにそれぞれ10μlずつ添加し、72時間インキュベートした後、MTS/PMS（テトラゾリウム塩／電子輸送試薬）で細胞毒性効果を検証した。

Rab-ZAP（#IT-05）による細胞毒性効果

サポリン標識抗NGFレセプター（p75）抗体：mu p75-SAP（#IT-16）、または抗NGFレセプター（p75）抗体（#AB-N01AP）＋Rab-ZAPを用いて、細胞毒性効果を調べた。いずれも同程度の細胞毒性効果を発揮することが確認できた。

Rat-ZAP（#IT-26）による細胞毒性効果

HT-2細胞を96ウェルプレートに播種（2,000 cells/90μl/well）し、一晩インキュベートした。コントロール用サポリン（#PR-01）、抗CD25-SAP（#IT-24）、抗CD25抗体（#AB-19）＋最終濃度で50 ng/10μlのRat-ZAP（2種類のロット）を各ウェルにそれぞれ10μlずつ添加し、72時間インキュベートした後、MTS/PMS（テトラゾリウム塩／電子輸送試薬）で細胞毒性効果を検証した。

Goat-ZAP（#IT-36）による細胞毒性効果

3T3細胞を96ウェルプレートに播種（1,000 cells/90μl/well）し、一晩インキュベートした。コントロール用サポリン（#PR-01）または抗EGFレセプター抗体＋Goat-ZAPを各ウェルにそれぞれ10μlずつ添加し、72時間インキュベートした後、MTS/PMS（テトラゾリウム塩／電子輸送試薬）で細胞毒性効果を検証した。

Fab-ZAP Rabbit（#IT-57）による細胞毒性効果

NG6細胞を96ウェルプレートに播種（1,000 cells/90μl/well）し、一晩インキュベートした。
コントロール用サポリン（#PR-01）、mu p75-SAP（#IT-16）、抗NGFレセプター（p75）抗体（#AB-N01AP）＋Rab-ZAPまたはFab-ZAP Rabbitを各ウェルにそれぞれ10μlずつ添加し、72時間インキュベートした。
培地を取り除き、細胞を氷冷した10％TCAで固定（4℃、1時間）し、蒸留水で洗浄後、風乾した。
0.4％スルホローダミンB（1％酢酸溶液）を50μlずつ加え、室温で30分間インキュベートした。
1％酢酸で3回洗浄した後、風乾した。
10 mMトリス塩基を100μlずつ加え、5分間穏やかに撹拌し、564 nmの吸光度を測定した。

Fab-ZAP Rat（#IT-55）による細胞毒性効果

HT-2細胞を96ウェルプレートに播種（2,000 cells/90μl/well）し、一晩インキュベートした。コントロール用サポリン（#PR-01）、抗CD25-SAP（#IT-24）、抗CD25抗体（#AB-19）＋Rat-ZAPまたはFab-ZAP Ratを各ウェルにそれぞれ10μlずつ添加し、72時間インキュベートした後、MTS/PMS（テトラゾリウム塩／電子輸送試薬）で細胞毒性効果を検証した。

Fab-ZAP human（#IT-51）による細胞毒性効果

SK-BR-3細胞を1,000cells/90μl/wellで播種し、一晩インキュベートした。Trastuzumabとサポリンを細胞培地で希釈し、各ウェルに10μl添加した。また、Trastuzumabを最終濃度4.5 nM/10μlのFab-ZAPを含む細胞培地で希釈し、各ウェルに10μlを添加した。次に、プレートを72時間インキュベートした後、XTT/PMSで細胞毒性効果を検証した。

製品ラインナップへ — **サポリンによる生育阻害（％）**
抗体濃度は25 mMで一定とし、Fab-ZAP humanの濃度は50 nMおよび100 nMを用いた。

標的細胞に選択的な細胞死を誘導するサポリン標識二次抗体セカンドイムノトキシン

セカンドイムノトキシンとは

特長

製品ラインナップ