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多孔性に優れた三次元細胞培養用Scaffold 3D Insert-PCL / -PS

掲載日情報:2017/09/01 現在Webページ番号:3700

均一なポアサイズを有し、多孔性に優れた培養用器材です。生分解性プラスチック製で再生医療研究におけるScaffold(足場材)として有用なPCLシリーズと、汎用性が広いPSシリーズの2種類のラインナップがあります。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

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特長

  • 構造上、閉じた部分がないため、細胞や培養液が繊維間へ浸透しやすくなっています。また、溶液の循環性が高いため、細胞老廃物の蓄積を軽減できます。
  • 本製品のポアサイズは、3D Biotek社の精密な製造技術によって、均一かつロット間での差が少なく、規則性に優れています。
  • 通常のディッシュまたはプレートを用いた二次元培養と同様に、トリプシン処理で容易に細胞を回収することが可能です。
  • 本製品で培養した細胞は、RNA精製、DNAおよびタンパク質解析、形質転換、免疫染色、細胞増殖アッセイなど、様々な用途に適用できます。
  • 様々なサイズのプレートに適合する製品があり、6ウェルプレートに3個、12ウェルプレートに6個、24ウェルプレートに12個、48ウェルプレートに16個、96ウェルプレートに24個の3D Insertがあらかじめセットされています。
  • クロロホルムや塩化メチレンなどの有機溶媒を含みません。
三次元細胞培養用Scaffold 3D Insert-PCL/-PS 12ウェルプレート適合タイプ(6個入り)

12ウェルプレート適合タイプ(6個入り)

三次元細胞培養用Scaffold 3D Insert-PCL/-PS 96ウェルプレート適合タイプ(24個入り)

96ウェルプレート適合タイプ(24個入り)

3D Insertの構造

3D Insertの構造

3D Insertの構造(断面模式図)

3D Insertの構造


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製品ラインナップ

商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます

サイズ 素材
(シリーズ)
繊維径 繊維間隔 商品コード
6ウェルプレート用
(スキャフォールド3個セット済み)
PCL300μm300μmPCL303006-3
PCL300μm500μmPCL305006-3
PS150μm200μmPS152006-3
PS300μm400μmPS304006-3
12ウェルプレート用
(スキャフォールド6個セット済み)
PCL300μm300μmPCL303012-6
PCL300μm500μmPCL305012-6
PS150μm200μmPS152012-6
PS300μm400μmPS304012-6
24ウェルプレート用
(スキャフォールド12個セット済み)
PCL300μm300μmPCL303024-12
PCL300μm500μmPCL305024-12
PS150μm200μmPS152024-12
PS300μm400μmPS304024-12
48ウェルプレート用
(スキャフォールド16個セット済み)
PS150μm200μmPS152048-16
PCL300μm300μmPCL303048-16
96ウェルプレート用
(スキャフォールド24個セット済み)
PCL300μm300μmPCL303096-24
PS150μm200μmPS152096-24
PS300μm400μmPS304096-24

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3D Insert-PCL(PCLシリーズ)

材質は、手術の縫合糸などに用いられている生分解性ポリエステルのポリカプロラクトン(Polycaprolactone:PCL)です。幹細胞などを用いた再生医療研究に有用な製品です。

  • 繊維径:~300μm
  • 繊維間隔:300μm / 500μm
3D Insert-PCLでの培養実績

3D Insert-PCLでの培養例

3D Insert-PCLで培養したヒト線維芽細胞の増殖
緑:F-actin、青:DAPI(細胞核)


3D Insert-PCLでの培養実績

幹細胞 ヒト間葉系幹細胞
肝臓細胞 Huh-7, HepG2
角化細胞 HEKn
骨芽細胞 7F2,
ヒト間葉系幹細胞由来骨芽細胞
線維芽細胞 NIH-3T3, L929

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3D Insert-PCLの使用文献

  • Marino, G., et al., "Growth and endothelial differentiation of adipose stem cells on polycaprolactone.″ J. Biomed. Mater. Res. A, 100(3), 543(2012). PMID:22162251
  • Kumar, G., et al., "The determination of stem cell fate by 3D scaffold structures through the control of cell shape.″ Biomaterials, 32(35), 9188(2011). PMID:21890197

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3D Insert-PCLの価格

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[在庫・価格 :2024年03月29日 14時15分現在]

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3D Insert-PS(PSシリーズ)

材質は、培養用ディッシュと同じポリスチレン(Polystyrene:PS)です。コストパフォーマンスが高く、様々な細胞に使用可能です。透明性と多孔性に優れており、高度な装置を使用せずに、倒立光学顕微鏡で細胞成長をリアルタイムに観察できます。

  • 繊維径:~150μm / ~300
  • 繊維間隔:200μm / 400μm
3D Insert-PS
3D-Insert-PSで培養したNIH-3T3細胞

3D-Insert-PSで培養したNIH-3T3細胞
上:蛍光顕微鏡画像、下:共焦点画像
緑:F-actin、赤:Fibronectin、青:DAPI(細胞核)


3D Insert-PSでの培養実績

幹細胞 ヒト間葉系幹細胞、
マウス骨髄間質幹細胞
腫瘍細胞 MCF-7, MCF-7:WS8, ECC1
肝臓細胞 Huh-7, HepG2
角化細胞 HEKn
神経細胞 CHP212, SY5Y
骨芽細胞 7F2、
ヒト間葉系幹細胞由来骨芽細胞
心筋細胞 H9c2、ラット初代心筋細胞
線維芽細胞 NIH-3T3, L929

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3D Insert-PSの使用文献

  • Laganá, M. and Raimondi, M.T., et al., "A miniaturized, optically accessible bioreactor for systematic 3D tissue engineering research.″ Biomed Microdevices, 14(1), 225(2012). PMID:21984034

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3D Insert-PSの価格

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FAQ

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Q-1. 二次元細胞培養とは?
A-1. 通常、細胞を培養する際には細胞培養用プレートなどを使用します。この場合、細胞は培地の中で二次元的に単層を形成して増殖します。これを二次元細胞培養(2D cell culture)といいます。



Q-2. なぜ三次元培養を行うのか?
A-2. 上記の二次元細胞培養は、in vitroでの因子、細胞、薬剤などとの相互作用の観察や研究に便利な方法ですが、in vivoでの細胞増殖とは形態が異なります。実際の生体内においては、細胞は三次元的に増殖して組織や臓器を形成しています。従ってより生体内に近い培養環境を実現するために、三次元細胞培養(3D cell culture)が重要となってきます。

■参考

線維芽細胞の蛍光染色像

線維芽細胞の蛍光染色像
細胞外マトリックス様の構造が形成されたことがわかる。
A:細胞核をDAPIで青色に染色(40倍)
B:F-アクチンをAlexa Fluor®488標識ファロイジンで緑色に染色(40倍)



Q-3. 三次元細胞培養の利点は?
A-3. (1)健常組織と病的組織の構造や機能の違いを理解するのに役立ちます。

【例1】
椎間板の線維輪細胞を三次元培養してみると、二次元培養とは異なる形態を観察できます。単層培養と比較してプロテオグリカンの合成量が増加し、細胞外マトリックスの決定を伴う細胞コロニーが形成されます。また、二次元培養では見られないⅠ型およびⅡ型コラーゲンの産生も確認されました。

【例2】
骨細胞や軟骨細胞は、二次元培養と三次元培養ではまったく異なる形態を示すことがよく知られています。最近の研究で、ヒト骨形成細胞(正常および細胞株)が、ハイドロゲルマトリックスを用いて三次元培養されました。これにより骨肉腫細胞が増殖し、骨形成細胞コロニーが3週間程できたと示されています。

■参考

骨芽細胞の染色像

骨芽細胞の染色像
培養14日目の骨芽細胞のコッサ染色を行った。二次元培養(A)と比べ三次元培養(B)では石灰化した小塊の量が増加していることがわかる。

【例3】
動物細胞の in vitro三次元増殖は、上皮細胞の極性形成と分化を促進します。また、生体内の組織細胞と比べて、これらの細胞は速やかに移動、分裂し、非対称性の形態を獲得します。

(2)成長因子などの各種物質との相互作用を研究する際のモデルとなります。

【例1】
三次元培養されたがん細胞では、腫瘍細胞増殖因子に対するレセプターの発現の様式が二次元培養とは異なっています。乳がん細胞では、三次元培養ががん細胞の増殖や抗がん物質の評価などのモデルシステムとして活用されています。

【例2】
単層培養や分散培養と比較して、三次元培養細胞は、細胞毒性のある薬剤に対して抵抗性を示します。三次元培養は in vitroにおける抗がん物質による細胞毒性の評価に、有用な研究モデルになると考えられます。

■参考

乳がん細胞株(MCF-7)に対するタモキシフェン(抗がん物質)の影響

乳がん細胞株(MCF-7)に対するタモキシフェン(抗がん物質)の影響
各濃度のタモキシフェンでMCF-7細胞を処理し、MTTアッセイにより細胞生存率を算出した。
乳がん細胞株(MCF-7)に対するタモキシフェン(抗がん物質)の影響

乳がん細胞株(MCF-7)に対するタモキシフェン(抗がん物質)の影響
MTTアッセイにより算出した。

(3)幹細胞の培養にも有用です。

【例】
三次元培養されたヒトES細胞は、細胞培養用プレートで二次元培養した場合に比べ、30日後で細胞数の顕著な増加を示しました。

■参考

間葉系幹細胞(MSC)の染色像

間葉系幹細胞(MSC)の染色像
脂肪細胞への分化誘導を行った後、MSCをOil-Red-Oで染色した。細胞内に脂肪滴が形成されていることが確認でき、二次元培養(A)と比べ三次元培養(B)ではその量が増加していることがわかる。

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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