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1度の凍結融解で自己融解するE. coli XJ Autolysis E. coli Strain

掲載日情報:2013/08/06 現在Webページ番号:2710

1度の凍結融解で自己融解するE. coliです。培養途中でアラビノースを加えることにより、λ lysozymeが緩やかに発現します。凍結融解など物理的な刺激によって細胞膜が破壊され、自己融解を引き起こすため、発現タンパク質や核酸の精製に有用です。
JM109, JM109(DE3)のゲノムを改変したXJa, XJa(DE3)と、BL21, BL21(DE3)のゲノムを改変したXJb, XJb(DE3)があります。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。


1 度の凍結融解操作の前後で、吸光度(OD600)を測定した。



XJb(DE3)およびBLR(DE3)でのタンパク質発現量の比較
pETプラスミドのT7-lacプロモーター下流にピロホスファターゼ遺伝子を挿入し、それぞれのE. coliに導入した。IPTGで発現誘導後、細胞抽出液のピロホスフォトランスフェラーゼ活性を測定した。XJbでは、発現用宿主としてよく用いられるBLR(DE3)と同程度の発現量が得られたことがわかる。LB:LB培地(未誘導)、LB+IPTG:LB培地(IPTG添加)、OB:OB培地(Dual Media Set)
Dual Media Setは培養用培地であるExpansion Broth(EB)と発現用培地であるOverexpression Broth(OB)のセットで、組換え体タンパク質を大量に発現できます。詳細はこちらをご参照下さい。

特長

  • 約10分の簡単な操作でE. coliを融解できます。
  • 界面活性剤などによる細胞溶解は不要です。
  • 様々なバッファーに適用できます。
  • ハイスループット化やスケールアップが容易です。
  • 製品にはアラビノースが添付されています。
  • XJb, XJb(DE3)は組換えタンパク質の発現用宿主として特に優れています。
  • Mix & Go E. coli Competent Cellは、DNAと混合するだけで形質転換できます(形質転換効率:108 ~109 transformants/μg)。

E. coliグリセロールストック(#T5021, #T5031, #T5041, #T5051)からコンピテントセルを作製する際は、Mix & Go E. coli Transformation Kitのご使用をお勧めします。


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原理

アラビノースオペロンのプロモーター(PBAD)直下の araBを、λ lysozyme遺伝子に置換しています。アラビノースの添加によってλ lysozymeの発現が誘導され、凍結融解によって自己融解が起こります。アラビノースは代謝されないため、発現誘導物質として効率良く機能します。


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価格

XJa(DE3)または XJb(DE3)Autolysis E. coli StrainはT7発現システム関連製品のため、購入時にご使用者確認書が必要です。

■ グリセロールストック

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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