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わずか10分でアスコルビン酸(ビタミンC)を測定するキット EnzyChrom Ascorbic Acid Assay Kit

掲載日情報:2018/08/21 現在Webページ番号:67038

試料中のアスコルビン酸を、比色法/蛍光法により簡便かつ迅速に測定するキットです。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

BioAssay Systems社では、2018年1月1日より緑化推進のために製品へのプロトコルの添付を廃止しました。各製品のプロトコルについては、メーカーホームページよりダウンロードしてご利用下さい。

BioAssay Systems社では各種アッセイキットをご用意しております。 キットの検索にはこちら(アッセイキット選択ガイド)が便利です。

アスコルビン酸とは

アスコルビン酸は、生体内で抗酸化物質としてROSによる酸化ストレスから細胞を守る役割をもちます。そのL-光学異性体はビタミンCとしても知られており、食品や様々な産業で添加物として利用されています。



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測定原理

試料中のアスコルビン酸と試薬中のアスコルビン酸オキシダーゼが反応し、アスコルビン酸が酸化されます。その際生成された過酸化水素により、試薬中の色素が呈色を示すことを利用して測定します。



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特長

  • 試料中のアスコルビン酸の測定が可能です。
  • 96ウェルプレートフォーマットのため、自動化およびハイスループットアッセイにも最適です。
  • 高感度で直線性に優れています。
  • 測定対象試料:血清、血漿、尿、唾液、母乳、組織、細胞培養液
  • 測定対象動物種:すべて
  • アッセイ数:100アッセイ分
  • 測定方法:比色法/蛍光
  • 測定時間:10 分
  • 測定波長:
    • 比色法:570 nm
    • 蛍光法:530 nm(励起)/585 nm(蛍光)
  • 測定範囲:
    • 比色法:300~1,000 μM
    • 蛍光法:30~100 μM

メルカプトエタノールなどの還元剤はアッセイ結果に影響を及ぼすため、試料へ混入しないようにしてください。



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キット内容

  • Assay buffer
  • Enzyme mix
  • Dye reagent
  • Standard(10 mM アスコルビン酸)

96ウェルプレートおよびプレートリーダーは別途ご用意下さい。



測定方法の概要

  1. 試料を調製する。

    血清・血漿などの液体試料:そのまま使用できます。

    組織・細胞試料:以下のステップで固形部分を除去してから使用してください。

    1. 組織または細胞に冷PBSを加え、ホモジネートする。
    2. 遠心し、得られた上清を測定に使用する。

    母乳試料:以下のステップでタンパク質を除去してから使用して下さい。

    1. 試料と6N HClを6:1の割合で混和する。
    2. 遠心し、上清を採取する。
    3. 上清を6N NaOHで中和し、測定に使用する。

  2. 付属の試薬を室温に戻す。
  3. 付属のStandardを検量線用の各濃度に調整する。
  4. 96ウェルプレートの各ウェルに測定試料を20μLづつ分注する。
    (比色法は透明平底プレート、蛍光法は黒色プレートを使用してください)
  5. Assay buffer, Enzyme mix, Dye reagentを85:1:1の割合で混ぜたものを必要量調製する。
  6. 4.の混合液を各ウェルに80 μlずつ加え、タップで混和し、室温で10分インキュベートする。
  7. プレートリーダーで吸光度/蛍光強度を計測する。
  8. 測定結果を以下の数式に当てはめ、アスコルビン酸の濃度を算出する。

    • RSAMPLE:試料の吸光度/蛍光強度
    • RBLANK:ブランクの吸光度/蛍光強度
    • Slope:検量線の傾き
    • :試料の希釈率

    (アスコルビン酸1 mM当たり17.6 mg/dl,0.0176%,176ppmと換算できます。)




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検量線例

  • A. 比色法による検量線
  • B. 蛍光法による検量線

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価格表

[在庫・価格 :2024年04月28日 00時00分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
Ascorbic Acid Assay Kit, EnzyChrom (100tests)
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 5
説明文
測定試料:血清,血漿,唾液,尿,培養上清,ミルク,組織,測定範囲:6-1,000μl (比色)/1-100μl (蛍光),測定波長:570, 530/590 nm,感度:6μl (比色), 1μl (蛍光),検出方法:呈色, 蛍光,アッセイ法:Assay,アッセイ数:100 tests
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ

製品記事 BioAssay Systems社 アッセイキット選択ガイド/製品リスト
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Ascorbic Acid Assay Kit, EnzyChrom (100tests)

文献数: 5

説明文 測定試料:血清,血漿,唾液,尿,培養上清,ミルク,組織,測定範囲:6-1,000μl (比色)/1-100μl (蛍光),測定波長:570, 530/590 nm,感度:6μl (比色), 1μl (蛍光),検出方法:呈色, 蛍光,アッセイ法:Assay,アッセイ数:100 tests
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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