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カタラーゼ活性測定キット EnzyChrom Catalase Assay Kit

掲載日情報:2018/08/21 現在Webページ番号:67033

試料中のカタラーゼ活性を、比色法および、蛍光法により簡便かつ迅速に測定することが出来ます。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

BioAssay Systems社では、2018年1月1日より緑化推進のために製品へのプロトコルの添付を廃止しました。各製品のプロトコルについては、メーカーホームページよりダウンロードしてご利用下さい。

BioAssay Systems社では各種アッセイキットをご用意しております。 キットの検索にはコチラ(アッセイキット選択ガイド)が便利です。

カタラーゼ(Catalase)とは

カタラーゼは、過酸化水素を酸素と水へ分解する、細胞内に普遍的に存在する酵素です。過酸化水素を酸素と水に分解し無毒化することによって、細胞内の過度な蓄積を防ぎます。

生体内におけるカタラーゼ活性の欠乏は、白髪化やペルオキソーム障害、無カタラーゼ血液症の発症の原因であることが分かっています。



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測定原理

試料中に含まれるカタラーゼが試薬中の過酸化水素を分解することで酸素と水に分解されます。分解されずに残った過酸化水素とHRP酵素により色素が酸化されることで呈色します。カタラーゼ活性が低いほど呈色を強く示し、活性が高いほど弱い呈色を示します。

得られた吸光度または蛍光強度を元に、試料中に含まれるカタラーゼが分解した過酸化水素の量を求め、酵素活性(ユニット)を算出することができます。



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特長

  • カタラーゼ活性の吸光度測定・蛍光測定が可能です。
  • あらかじめ調製した試薬を加え、室温下で反応させるだけの簡便な操作です。
  • 96ウェルプレートフォーマットのため、自動化およびハイスループットアッセイにも最適です。
  • 高感度で直線性に優れています。
  • 測定対象試料:血清、血漿、尿、唾液、細胞培養液など
  • 測定対象動物種:すべて
  • アッセイ数:100テスト分
  • 測定方法:比色法、蛍光
  • 測定波長:比色法で570 nm(550~585 nm)または蛍光法で励起:530 nm/蛍光:585 nm
  • 測定範囲:1.4 ~ 4.7 U/L
  • 検出限界:0.2 U/L


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キット内容

  • Assay buffer (25 ml)
  • HRP enzyme (120 μl)
  • Dye reagent (120 μl)
  • 3% H2O2 solution (100 μl)
  • Positive control (8 μl)

96ウェルプレートおよびプレートリーダーは別途ご用意下さい。



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測定方法の概要

  1. 試料を調製する。

    液体試料はそのまま測定可能です。

    細胞のような固形試料はホモジネートした後遠心し、上清を使用して下さい。

  2. 試料を10 μlずつ加える。

    比色法では透明平底プレートを、蛍光法では黒色平底プレートを使用して下さい。

  3. 3% H2O2 solutionから、必要量の50 μM H2O2基質を作製する。
  4. H2O2基質90 μlを試料に加え、タップして混和し、室温で30 分酵素反応させる。
  5. 検量線試料用のH2O2を調製する。
  6. Assay buffer、Dye reagentおよびHRP酵素を102:1:1の割合で必要量混和する。これをDetect reagentとする。
  7. 酵素反応終了後にDetect reagentを各ウェル100 μlずつ加え、混和して10分反応させる。
  8. 吸光度または蛍光強度を測定する。
  9. 得られた値を以下の数式に当てはめ、カタラーゼ活性を算出する。

    • RSample blank:ブランクの吸光度/蛍光強度
    • RSample:試料の吸光度/蛍光強度
    • slope:検量線の傾きの値
    • 30 min:カタラーゼ反応時間
    • n:試料の希釈倍率

検量線用のH2O2は必ず用事調製して下さい。



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使用例

検量線例

H2O2の量とHRP吸光度の関係
縦軸:ΔOD570(RSampleーRSample blankの値)
横軸:H2O2濃度

上記の検量線を基に算出された試料のカタラーゼ活性の例

分解されたH2O2の量とカタラーゼ活性のユニット数の関係
縦軸:ΔOD570(試料中のカタラーゼによって分解されたH2O2の量)
横軸:各試料中のカタラーゼのユニット数



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価格表

[在庫・価格 :2024年04月28日 00時00分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
Catalase Assay Kit, EnzyChrom (100tests)
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 21
説明文
測定試料:血清,血漿,唾液,尿,培養上清,感度:0.2 U/L,測定範囲:0.2-5 U/L,検出方法:呈色, 蛍光,測定波長:570, 530/590 nm,アッセイ法:Assay,アッセイ数:100 tests
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年9月15日号 p.12

製品記事 BioAssay Systems社 アッセイキット選択ガイド/製品リスト
Obesity/Diabetes Research Kits(BioAssay Systems社)
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Catalase Assay Kit, EnzyChrom (100tests)

文献数: 21

説明文 測定試料:血清,血漿,唾液,尿,培養上清,感度:0.2 U/L,測定範囲:0.2-5 U/L,検出方法:呈色, 蛍光,測定波長:570, 530/590 nm,アッセイ法:Assay,アッセイ数:100 tests
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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