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アガロースゲルからのDNA精製に便利なDNA染色試薬 Gel IndicatorTM DX Kit

掲載日情報:2008/02/18 現在Webページ番号:910

Gel IndicatorTM KitのDNA検出感度を増強したキットで、高感度プロトコルの場合、従来の2倍の感度でDNAを検出できます。迅速に操作を行える方法と、DNAをより高感度(>20 ng)に検出できる方法の2種類のプロトコルが用意されています。
取り扱いや廃棄は、細胞染色用色素の処理方法に準じた方法で行って下さい。

特長

  • 高感度(>20 ng)でDNAを検出できます(ProtocolⅡの場合)。
  • エチジウムブロミドや紫外線を用いないため、損傷の少ないDNA断片を切り出すことができ、プラスミドベクターへのクローニング時に高い形質転換効率が得られます。
  • UVトランスイルミネーター、暗室は不要です。
  • キットに含まれる6×Orange loading dyeにより、試料のゲルへのアプライがしやすく、また、色調が異なるためDNAバンドと容易に識別できます。
  • 電気泳動中にもDNAバンドを確認できます。
  • 市販されているキットを使用して、切り出したゲルからDNAを精製できます。

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操作法概略

ProtocolⅠ:迅速法(検出感度:>500 ng)

  1. アガロースゲル作製時に0.1%濃度になるように Gel indicator solution DX を添加し、ゲルを着色する。
  2. 分離する DNA 試料を 6×Orange loading dye と混合し、1. のゲルにアプライする。
  3. Four-colors indicator を同じゲルの末端のレーンにアプライする。
  4. 電気泳動し、試料を分離する。分離されたバンドは可視光条件下で青紫色で判別でき、容易に切り出すことができる。

ProtocolⅡ:高感度法(検出感度:>20 ng)

  1. Gel indicator solution DX を添加せずに、アガロースゲルを作製する。
  2. 分離する DNA 試料を 6 × Orange loading dye と混合し、1. のゲルにアプライする。
  3. 電気泳動後のゲルを 0.2% GI coloring solution で、2 時間以上振とうしながら染色する。
  4. DNA が青紫色に染色され、判別できるようになったら切り出す。

Gel indicator solution DX を添加して作製したアガロースゲルでも ProtocolⅡを行えます。

Gel Indicator DX Kitによるアガロース染色像
Gel indicator solution DXを添加して作製した0.8%アガロースゲルで、図に示した量のDNA断片を電気泳動し、GI coloring solutionで染色した。

Gel Indicator DX Kitを使用した高効率クローニング
2 kbのDNA断片をGel Indicator DX Kitを使用してアガロースゲル電気泳動し、DNAを切り出し抽出(左)、または通常の方法でアガロースゲル電気泳動し、エチジウムブロミドで染色したゲルを3分間紫外線照射した後DNAを切り出し抽出(右)した。DNAの量をそろえ、ベクターにライゲーションし、形質転換した。縦軸は形質転換体のコロニー数を示す。

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キット内容

  • Gel indicator solution DX(1×3 ml)
  • GI coloring solution(15 ml)
  • 6×Orange loading dye(1 ml:2μl/lane)
  • Four-colors indicator(1 ml:10μl/lane)

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価格

[在庫・価格 :2024年04月17日 00時00分現在]

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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