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アガロースゲルからのDNA精製に便利なDNA染色試薬 Gel IndicatorTM Kit

掲載日情報:2013/05/01 現在Webページ番号:907

電気泳動後のアガロースゲルから可視光条件下でDNA断片を切り出せる便利なキットです。迅速に操作を行える方法(>500 ng)(ProtocolⅠ)と、DNAをより高感度(> 50 ng)に検出できる方法(ProtocolⅡ)の2種類のプロトコルが用意されています。紫外線損傷のないDNA断片により、高いクローニング効率が得られます。
取り扱いや廃棄は、細胞染色用色素の処理方法に準じた方法で行って下さい。

特長

  • エチジウムブロミドや紫外線を用いないため、損傷の少ないDNA断片を切り出すことができ、プラスミドベクターへのクローニング時に高い形質転換効率が得られます。
  • UVトランスイルミネーター、暗室は不要です。
  • キットに含まれる6×Orange loading dyeにより、試料のゲルへのアプライがしやすく、また、色調が異なるためDNAバンドと容易に識別できます(Protocol Iの場合)。
  • 電気泳動中にもDNAバンドを確認できます(ProtocolⅠの場合)。
  • 市販されているキットを使用して、切り出したゲルからDNAを精製できます。

本キットとUV照射による切り出し後の形質転換効率
それぞれの条件で回収したDNA断片をプラスミドベクターにクローニングし、E. coliの形質転換効率を比較した。図の縦軸は形質転換体の個数を示す。UV照射をしない本キットの方が高い効率であることがわかる。

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キット内容

  • Gel indicator solution(1 ml×3)
  • 6×Orange loading dye(1 ml:2μl/lane)
  • 3-Colors indicator(1 ml:10μl/lane)

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操作法概略

■ProtocolⅠ:迅速法(検出感度:> 500 ng)

  1. アガロースゲル作製時に0.1%濃度になるようにGel indicator solutionを添加し、ゲルを着色する。
  2. 分離するDNA試料を6×Orange loading dyeと混合し、1.のゲルにアプライする。
  3. 3-Colors indicatorを同じゲルの末端のレーンにアプライする。
  4. 電気泳動し、試料を分離する。分離されたバンドは可視光条件下で青紫色で判別でき、容易に切り出すことができる。

ProtocolⅡによるアガロースゲル電気泳動像


■ProtocolⅡ:高感度法(検出感度:> 50 ng)

  1. 通常の方法で、アガロースゲルを作製する。
  2. 分離するDNA試料を6×Orange loading dyeと混合し、1.のゲルにアプライする。
  3. 電気泳動後のゲルを0.1% Gel indicator solutionで、2時間以上振とうしながら染色する。
  4. DNAが青紫色に染色され、判別できるようになったら切り出す。

ProtocolⅡによるアガロースゲル染色像

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価格

[在庫・価格 :2024年03月29日 14時15分現在]

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Gel Indicator Kit

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  • 商品コード:DM510
  • メーカー:BDL
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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