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NK細胞を容易に大量培養可能なキット BINKIT for NK Cells Expansion from PBMCs

掲載日情報:2014/05/29 現在Webページ番号:9035

ヒト末梢血単核球(PBMC)からNK(ナチュラルキラー)細胞が、より増殖するよう最適化された培地・フラスコを用いることで高活性な多量のNK細胞が得られる培養用キットです。

本製品を用いて選択・培養した高活性なNK細胞については、「凍結ヒトNK細胞」をご覧下さい。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

特長

  • 20~50 mlの全血より分離したPBMCから、高活性な多量のNK細胞が得られます。
  • NK細胞の精製や、フィーダー細胞の使用をせずに培養できます。
  • 健常人由来のNK細胞を3週間以上培養し、数100倍から数1,000倍に増殖させることができます(がん患者由来の場合には、血液状態により増殖率は低下します)。
  • 培養キットは、動物由来タンパク質を含みません。

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使用例

フローサイトメトリー解析によるNK細胞拡大培養結果

NK細胞拡大培養結果

PBMC(左)と比べ、本キットで14日間培養した細胞群(右)では、多量にNK細胞(CD3- CD56+)が増加することにより、その割合が大幅に高まったことが確認できる。

NK細胞の増幅実験結果のグラフ

NK細胞の増幅

健常人(HD)由来のPBMCを本キットで培養した。左のグラフは細胞数を、右のグラフは増幅率を示す。

NK細胞の細胞傷害活性の比較グラフ

NK細胞の細胞傷害活性の比較

本キットで増幅したNK細胞(実線)と、血液試料から精製して間もないNK細胞(破線)それぞれの、K562細胞に対する細胞傷害活性を比較した。本キットで培養したNK細胞の細胞傷害活性が大幅に増幅されている(P<0.01)ことが分かる。

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操作方法概略

  1. Ficoll-Paque(GE Healthcare社)を用いて、20~50 mlの全血からPBMC(末梢血単核球)を分離する。
  2. NK cell initial flaskをPBSで2回洗浄後、NK cell initial mediumで懸濁したPBMCとNK cell initial cocktailを加える。
  3. 37℃、5% CO2の条件で、3日間培養する(このステップで主としてNK細胞に増殖刺激が入る)。
  4. 培養液をチューブに移し、200×gで8分間遠心後、上清を捨てる。
  5. 熱不活性化したFBSまたは自己血漿を5%(v/v)添加したNK cell subculture mediumで細胞を懸濁した後、新しい培養用フラスコに移し、37℃、5% CO2の条件で培養する。
  6. 2~3日毎に、NK cell subculture mediumを用いて0.8×106 cells/mlになるように継代する。

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キット内容

  • NK cell initial flask
  • NK cell initial medium
  • NK cell initial cocktail
  • NK cell subculture medium

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価格

[在庫・価格 :2024年03月29日 17時15分現在]

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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