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BRG1ブロモドメイン結合阻害物質の活性測定キット BRG1 Bromodomain TR-FRET Assay Kit

掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:8769

BRG1のブロモドメインとアセチル化ヒストン間の結合を阻害する物質の阻害活性を、TR-FRET(Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer)法により迅速かつハイスループットに測定できるキットです。


BRG1について

SWI / SNFファミリーはヒストンとDNAの結合性を変化させるATP依存性のクロマチン再構成因子です。哺乳動物のSWI / SNFは、1.5 MDaを超える大きな複合体を形成しており、BRG1は触媒サブユニットとしてこの複合体に含まれています。BRG1は、中心的な触媒活性を担うsnf2 helicase様ドメインに加え、ヒストンのアセチル化残基に結合するブロモドメインをC末端領域に有しており、このBRG1ブロモドメインの結合活性は、通常のBETファミリーブロモドメイン阻害物質では阻害されないことが知られています。また、SWI / SNF複合体に含まれるいくつかのサブユニットはがん抑制活性を示し、非小細胞肺がんの多くの症例においてBRG1の変異や発現欠損が報告されています。

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特長

  • ユウロピウム(Eu3+)キレートで標識したBRG1ブロモドメインと、APC標識されたアセチル化リジンを含む標的ペプチドが結合することで蛍光共鳴エネルギー移動が生じ、蛍光が放射される反応を利用して測定します。
  • ユウロピウムやテルビウムなどのランタノイドをベースとした蛍光プローブは蛍光半減期が長く、バックグラウンド蛍光の消光後に測定することにより高いシグナル/ノイズ比の測定が行えます。
  • 測定波長:励起340 nm/蛍光620 nmおよび670 nm
BRG1ブロモドメイン結合阻害物質の活性測定キット BRG1 bromodomain TR-FRET Assay Kit

ユウロピウムキレートとバックグラウンドの蛍光消光比較

BRG1ブロモドメイン結合阻害物質の活性測定キット BRG1 bromodomain TR-FRET Assay Kit

H3ポジティブコントロールによる抑制曲線 (Veh:vehicle control)

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測定原理

ブロモドメイン-アセチル化リジン結合阻害物質の測定 Bromodomain TR-FRET Assay Kit

ブロモドメインに標識されたユウロピウムキレートがドナー、標的ペプチドにビオチン-ストレプトアビジンを介して標識されたAPCがアクセプターとなり、ブロモドメインとペプチドの結合により蛍光を生じる。

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キット内容

  • BRG1 bromodomain europium chelate
  • BRG1 bromodomain ligand/APC acceptor mixture
  • TR-FRET assay buffer
  • TR-FRET assay buffer additive
  • H3 positive control
  • 384-well solid plate
  • Foil plate cover

[在庫・価格 :2024年03月29日 17時15分現在]

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BRG1 bromodomain TR-FRET Assay Kit
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別名:ATP-dependent helicase SMARCA4,BAF190A Mitotic growth and transcription activator,BRG1-associated factor 190A,Protein BRG-1
別包装品 別包装品あり
法規制等 医薬用外毒物
保存条件 -80℃ 法規備考
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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