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サーマルサイクラーの性能を検証するキット PCR Cycler Check

掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:8718

お手持ちのサーマルサイクラーが正常に機能しているかどうかを診断するキットです。PCR反応液ミックスやコントロールなどがセットになっています。

本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
リアルタイムPCR用サーマルサイクラーの温度コントロールが正確に行われているかどうかを検証するキットについてはこちらをご覧下さい。


PCR Cycler Check

サーマルサイクラーの性能検証

PCR Cycler Check

PCR Cycler Check
©樹庵じゅあん

目的のPCRを行えない、非特異的産物が増幅されるといったPCRの問題は、サーマルサイクラーが原因である場合があります。

  • サーマルサイクラーでは、設定温度と実際の温度のズレや、ヒートブロックの場所による温度差が生じる場合があります。
  • 例えば、設定温度より実際の温度が低い場合は、テンプレートが変性されず、全く増幅されないという問題が起こります。一方設定温度より実際の温度が高い場合、例えば98℃に達すると、Polymeraseの失活という問題が起こり増幅量が低下します。
  • また、チューブをセットする場所で結果が異なる、再現性が取れないという問題が生じます。

しかし、サーマルサイクラーの温度コントロールを日常的に検証することは大変煩雑であり、また使用機種に適合する検証条件を満たすのは容易ではありません。

  • 温度センサーをセットしてプレートの各位置の温度を測定する方法では装置が必要であり、定期的な確認には不向きです。
  • また、ヒートブロックの温度を測定する電子機器等では、PCR反応に関わる全てのパラメータを必ずしも反映しているとは言えず、実際のPCR反応液をサーマルサイクラー補正のリファレンスとして設定する必要があります。

参考文献:Span, Mary, Marc Verblakt, and Tom Hendrikx. "Measurement uncertainty in calibration and compliancy testing of PCR and qPCR thermal cyclers." 18th International Congress of Metrology. EDP Sciences, 2017.

Minerva Biolabs社のPCR Cycler Checkは、通常のPCRおよびqPCR用のキットが用意されています。
PCR産物を電気泳動によって確認することで、ヒートブロックの設定温度と実際の温度の乖離を簡単に調べることができます。


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特長

  • 通常のサーマルサイクラーの温度が、正確かつ均一にコントロールされているかどうかを検証できるキットです。
  • PCR反応時の温度が、設定温度よりも高温側または低温側に振れていないかどうかを、1回のPCRでモニターできます。
  • 2℃以上の温度差が生じた場合に、異なるバンドパターンを示すように設計されています。

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使用例

本製品を使用し、異なるアニーリング温度でPCRを行った検証例。
A:マーカー、B:低温、C:適正温度、D:高温

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操作方法概略

1. あらかじめチューブに分注されている反応ミックスを、Rehydration bufferで溶解する。

2. サーマルサイクラーに下図のようにセットする。
96ウェルの場合(上段)、48ウェルの場合(中段)、24ウェルの場合(下段)

サーマルサイクラーの性能を検証するキット Thermal Cycler Validation Kit

3. 以下の条件でPCRを行う。

サーマルサイクラーの性能を検証するキット Thermal Cycler Validation Kit

4. 得られたPCR産物を、マーカーとともに1.5%アガロースゲルで電気泳動し、解析する。

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キット内容

  • Qualification tube
  • Cap
  • Marker
  • Rehydration buffer

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価格

6 strips, 8 vials

[在庫・価格 :2024年06月18日 00時01分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
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  • 価格
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納期 文献数
PCR Cycler Check Advance(6strips)
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説明文
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[在庫・価格 :2024年06月18日 00時01分現在]

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PCR Cycler Check Advance(6strips)

文献数: 0

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100 reactions

[在庫・価格 :2024年06月18日 00時01分現在]

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詳細 商品名
  • 商品コード
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納期 文献数
PCR Cycler Check One Step
2週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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お手持ちのPCR用サーマルサイクラーの温度が,正確かつ均一にコントロールされているか検証するキット。PCR産物を電気泳動によって確認することで,ヒートブロックの設定温度と実際の温度の乖離を簡単に調べることができる。
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[在庫・価格 :2024年06月18日 00時01分現在]

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PCR Cycler Check One Step

文献数: 0

説明文 お手持ちのPCR用サーマルサイクラーの温度が,正確かつ均一にコントロールされているか検証するキット。PCR産物を電気泳動によって確認することで,ヒートブロックの設定温度と実際の温度の乖離を簡単に調べることができる。
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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