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Liquid Phase Immunosandwich Assayにより迅速にタンパク質を測定するキット KwikQuant Assay Kit

掲載日情報:2017/08/15 現在Webページ番号:8684

新しいタンパク質測定アッセイ系Liquid Phase Immunosandwich Assayにより、迅速(15~45分)・簡便(3ステップ操作)・正確に、目的タンパク質を検出するキットです。
2種類の抗体で目的因子をサンドイッチし、KwikQuantカセットにて目的因子を蛍光検出します。測定される蛍光強度は、試料中の目的タンパク質濃度と相関します。

Liquid Phase Immunosandwich Assayにより迅速にタンパク質を測定するキット KwikQuant Assay

特長

  • ビオチン標識抗体とユウロピウム標識抗体のペアを用いて、迅速かつ正確に、タンパク質を検出するシステムです。
  • アッセイ系の構築は、ELISAなどのほかのアッセイ系の構築に比べ、非常に簡便です。
  • 市販のELISA構築抗体セットを、KwikQuantアッセイに応用することも可能です*1
  • 精製マウスモノクローナル抗体、マウス腹水、精製/未精製ポリクローナル抗体が使用できます。
  • 濃度既知のスタンダードを用いて検量線を作成することもできます。
  • 測定に用いる試料量は1~3 μlと少量で済みます。
  • 測定試料:血清、血漿、組織抽出物、細胞抽出物、細胞培養上清*2
  • 測定波長:615 nm

測定感度は、検出に用いる抗体の性能に依存します。
*1 R&D Systems社のELISA構築に必要な試薬セットDuoSet Kitには、目的因子に対する未標識抗体、ビオチン標識抗体、スタンダードが含まれており、Liquid Phase Immunosandwichアッセイに応用することも可能です。
*2 0.5%以上のSDS、Triton X-100、Tween 20などの界面活性剤を含む試料は使用できません。

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KwikQuantアッセイの測定原理

  1. 測定因子をサンドイッチさせる抗体ペアを用意し、片方をビオチン標識、もう片方をユウロピウム標識する。
  2. ビオチン標識抗体、ユウロピウム標識抗体、測定試料を混合し、5~15分間インキュベートして、測定因子と抗体の免疫反応複合体を形成する。
  3. 反応溶液5~8 μlを、KwikQuantカセットのストリップ末端にアプライし、Cell wash buffer 50μlを卵型のウェルにアプライする。15分間静置し、溶液を反対側の末端まで拡散させる。
  4. ストリップの検出ゾーンを溶液が通過すると、ゾーンに固定されたストレプトアビジンに、ビオチンを介して先の複合体が結合する。
  5. UVトランスイルミネーターまたはDNAゲルイメージャーで、免疫反応複合体の蛍光を測定し、Image Jなどの画像解析ソフトで解析する。蛍光強度は、測定因子の濃度に相関する。
Liquid Phase Immunosandwich Assayにより迅速にタンパク質を測定するキット KwikQuant Assay

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KwikQuantアッセイとウェスタンブロット・ELISAの比較

特長 KwikQuantアッセイ ウェスタンブロット ELISA
アッセイ時間 15~45分 4~8時間 3~5時間
操作ステップ 3回、簡便 複数回、煩雑 複数回、煩雑
測定機器 DNAゲルイメージャー フィルムスキャナー プレートリーダー
感度 1~100 pg/ml 1,000~100,000 pg/ml 1~100 pg/ml
試料容量 1~3 μl 5~20 μl 50~200 μl

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KwikQuant製品ラインナップ

種類 用途 キット内容 商品コード 包装
Cassette Kit KwikQuantアッセイ用カセット。
KwikQuantアッセイに必要。
KwikQuantカセット K1 1 kit
(48カセット)
Antibody Labeling Kit 抗体標識試薬キット。
お手持ちの抗体のビオチン/ユウロピウム標識に必要。
  • ビオチン標識試薬
  • ユウロピウム懸濁液
  • ユウロピウムクロスリンカー
  • 抗体精製カラム
  • NaH2PO4(1M, pH9.0~9.5)
  • Glycerol
  • Matrix buffer
  • KQ buffer
  • 抗体hCG抗体#1
  • 抗体hCG抗体#2
  • Control hCG
  • Wash buffer
  • Cell lysis solution A / B
  • PanNuclease
  • K2 1 kit
    (約200検出分)

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    KwikQuantの使用例

    Liquid Phase Immunosandwich Assayにより迅速にタンパク質を測定するキット KwikQuant Assay

    KwikQuant Assayにより、hCG量を定量した。
    上図:hCGをPBS with 5% bovine serumに段階希釈した結果
    下図:hCGをneat bovine serumに段階希釈した結果

    Lane1、2:0 pg/ml
    Lane3、4:3 pg/ml
    Lane5、6:8 pg/ml
    Lane7、8:25 pg/ml
    Lane9、10:74 pg/ml


    Lane11、12:222 pg/ml
    Lane13、14: 667pg/ml
    Lane15、16:2,000 pg/ml
    Lane17、18:6,000 pg/ml


    KwikQuant Assay

    上記アッセイの結果を、Image Jで処理後、グラフ化した。

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    KwikQuantアッセイ解説動画



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    価格

    ■カセットキット

    KwikQuant Assay

    [在庫・価格 :2024年04月25日 18時55分現在]

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    KwikQuant Assay Cassette Kit
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    KwikQuant Assay Cassette Kit

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    • 商品コード:K1
    • メーカー:KIB
    • 包装:1kit
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    ■抗体標識キット

    お手持ちの抗体ペアに、ビオチンおよびユウロピウムをそれぞれ標識するキットです。約200回分の検出に必要な抗体を標識することができます。

    KwikQuant Assay

    [在庫・価格 :2024年04月25日 18時55分現在]

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    KwikQuant Antibody Labeling Kit

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    • 商品コード:K2
    • メーカー:KIB
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    お問い合わせ先

    (テクニカルサポート 試薬担当)

    reagent@funakoshi.co.jp

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