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メーカー：	Horizon社Dharmacon製品 OriGene Technologies
	Horizon社Dharmacon製品(メーカー略称：DHA)のRNAiコレクション，cDNAコレクション，Yeastコレクションなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら OriGene Technologies社(メーカー略称：ORI)のTrueClone / TrueORF / TrueORF Gold cDNAクローンなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら
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HOME > 試薬 > 細胞情報伝達 > ユビキチン化・SUMO化 > ユビキチン化・SUMO化 > E2^scan Kit

複数のE2酵素が入ったアッセイプレート E2^scan Kit

掲載日情報：2015/03/19 現在Webページ番号：8448

ユビキジェント /
Ubiquigent Ltd
[メーカー略称：UBI]

※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

複数のE2酵素が入ったプレートです。E1酵素・E3酵素・ユビキチン化基質などを混合して、ユビキチン化アッセイを行うことができます。
基質特異性の解析や酵素活性の測定などに最適です。

※脱ユビキチン化酵素（DUB）のScan Kitもあります。詳細はこちらをご覧下さい。

複数のE2酵素が入ったアッセイプレート E2 Scan Kit

ニュースレター

⇒2014年2月号のニュースレターのダウンロードはこちら。

特長
解析例
使用例
操作方法概略
キット内容
使用文献

特長

プレートの各ウェルに34種類のE2酵素が2セット入っており、二重測定する際に便利です。
キットに付属のユビキチン化試薬（E1酵素Ube1、E3酵素CHIP、ユビキチン、ATP、アッセイバッファー）と、お手持ちの酵素を組み合わせて、任意のユビキチン化・オートユビキチン化のアッセイ系を構築することができます。
E3酵素オートユビキチン化アッセイを行う際に使用できるコントロール（CHIPおよびプレート上のUbeD4）も付属しています。
アッセイ後の反応液は、SDS-PAGEやウェスタンブロットなどで解析できます。

※各ウェル中のE2酵素は、個別購入することも可能です。フナコシホームページの製品検索で「メーカー略称：UBI」「キーワード：お探しの因子名（英語）」から検索下さい。

プレート上に分注されたE2酵素アレイ
positive control：E3酵素オートユビキチン化アッセイを行う際に使用できるE2酵素Ube2D4
buffer control：E2^scan enzyme storage buffer (50mM HEPES pH7.5 (NaOH), 5mM MgCl2, 5mM DTT, 5% Glycerol)

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解析例

任意のE3酵素と相互作用するE2酵素の同定や機能活性の評価
E3酵素によるオートユビキチン化／基質のユビキチン化に関与するE2酵素の同定
野生型／変異型E3酵素を用いた、E2酵素－E3酵素相互作用メカニズムの解析
ユビキチン化反応を促進／阻害する物質のスクリーニング

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使用例

E1酵素（Ube1）、E2酵素（本製品）、E3酵素（NEDD4）、基質タンパク質（hDCNL1）、ATP、ユビキチンを混合し、基質のユビキチン化アッセイを行った。
E3酵素（NEDD4）を含む系では、基質タンパク質（hDCNL1）がユビキチン化された。また、そのユビキチン化は特定のE2酵素により触媒された。
E3酵素（NEDD4）を含まない系では、基質タンパク質（hDCNL1）のユビキチン化は生じなかった。
このことから、NEDD4へユビキチンを移行させるE2酵素に特異性があることが分かる。

E1酵素（Ube1）、E2酵素（本製品）、E3酵素（NEDD4）、基質タンパク質（hDCNL1）、ATP、ユビキチンを混合し、基質のユビキチン化アッセイを行った。

E1酵素（Ube1）、E2酵素（本製品）、E3酵素（CHIP）、ATP、ユビキチンを混合し、CHIPのオートユビキチン化アッセイを行った。
最初に基質にユビキチンを付加するE2酵素 Ube2Wと、ユビキチンが付加された基質上にポリユビキチン鎖を伸長させるE2酵素 Ube2NおよびUbe2V1をすべて混合すると、E3酵素（CHIP）上にポリユビキチン鎖が形成された。
Ube2Wを含まない系では、CHIP上の著しいポリユビキチン鎖形成は観察されなかった。
このことから、Ube2W / Ube2V1によるCHIPのオートポリユビキチン化には、Ube2Wによるプライミング（CHIPのモノユビキチン化）が必要であることが分かる。

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