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[BDL]大腸菌コンピテントセル&分子量マーカー 10~30%OFFキャンペーン[~2022/02/28]

掲載日情報:2021/11/15 現在Webページ番号:81583

[期間:2021/11/15~2022/02/28]

株式会社バイオダイナミクス研究所(メーカー略称:BDL)のコンピテントセル,分子量マーカーを10%~30%OFFのキャンペーン価格でご提供します。ぜひこの機会をご利用下さい。

キャンペーン対象製品

製品説明 製品名
コンピテントセル
分注して再凍結可能・操作6分・高形質転換効率のコンピテントセルDynaCompetent Cells JetGiga DH5α
ヒートショックが不要なクローニング用コンピテントセルDynaCompetent Cells Jet DH5α
ヒートショックが不要な発現用コンピテントセルDynaCompetent Cells Zip BL21(DE3)
スタンダードなクローニング用コンピテントセルDynaCompetent Cells DH5α/JM109
スタンダードな発現用コンピテントセルDynaCompetent Cells BL21(DE3)/BL21(DE3)pLysS
ISによる変異がプラスミドに入りにくいコンピテントセルDynaCompetent Cells IS-mutation Safe
DNA分子量マーカー
概算定量可能なDNA分子量ラダーマーカーDynaMarker® DNA Ladder Marker
RNA分子量マーカー
概算定量可能なRNA分子量ラダーマーカーDynaMarker® RNA Ladder Marker
非変性アガロースゲルでのRNA電気泳動が簡単に行えるバッファーとマーカーのセットDynaMarker® RNA High for Easy Electrophoresis
二本鎖RNA分子量ラダーマーカーDynaMarker® dsRNA Ladder Marker
small RNA分子量ラダーマーカーDynaMarker® Small RNA II Ladder Marker
着色済みの一本鎖RNA分子量ラダーマーカーDynaMarker® Prestain Ladder Marker for RNA
タンパク質分子量マーカー
冷蔵保存できる着色済みタンパク質分子量マーカーDynaMarker® Protein MultiColor Ladder Marker, Stable


分注して再凍結可能・操作6分・高形質転換効率のコンピテントセル
DynaCompetent Cells JetGiga DH5α

溶解後,再凍結(分注)してもギガ(109)レベルの形質転換効率!

6分間の迅速な形質転換方法で,1×109 CFU/μgの高い形質転換効率を持つDH5αコンピテントセルです。好みの容量に分注・再凍結して使用可能です

製品添付データシート記載の指定の方法により分注・再凍結を行うことで1×109CFU/μgを維持(当社データより)。
特注サイズ(20mLから)も承ります。お問い合わせください。
分注は1 mL単位から承ります。

特長

  • わずか6分間で迅速に形質転換を行えます。
  • 1×109 CFU/μgの超高形質転換効率です。
  • お好みの容量に分注後,再凍結し使用可能です。
  • 再凍結はディープフリーザーでOK! 液体窒素やドライアイスは不要です。
  • 未使用状態で,-80℃で12か月ほとんど形質転換効率の低下がなく安定です。

操作方法概略

  1. 分注するためのチューブ、ピペットチップをあらかじめ冷却する。
  2. コンピテントセルを氷水上で融解する。
  3. 任意の容量に分注する。
  4. ディープフリーザー (-80℃)で再凍結する。

詳しい方法は,製品添付のデータシートをご参照下さい。

使用例

各社の迅速形質転換コンピテントセルとの比較
各社推奨の形質転換方法でpUC19プラスミドを用いた形質転換を行った。本コンピテントセルは1×109 CFU/μgを十分に上回る効率で,他社と比べても高効率であった。また,プレート上のコロニーもはっきりと大きく,揃っていた。

本コンピテントセルの凍結融解サイクルにおける形質転換効率の変化
製品を氷上にて融解し,ディープフリーザーにて再凍結する操作を繰り返した。本製品は1度凍結融解しても1×109 CFU/μgを十分に維持していた。

特注サイズ(20mLから)も承ります。お問い合わせください。
分注は1 mL単位から承ります。
詳細は,弊社受託サービス・特注品担当(TEL:03-5684-1645,FAX:03-5684-6539,e-mail:jutaku@funakoshi.co.jp)までお問い合わせください。

[在庫・価格 :2021年11月30日 08時51分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
DynaCompetent Cells JetGiga DH5α
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文
6分間の迅速な形質転換方法で,1×109 CFU/μgの高い形質転換効率を持つDH5αコンピテントセル。
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年11月15日号 p.27
ニュース2021年4月15日号 p.30

製品記事 DynaCompetent Cells JetGiga DH5α
Long ssDNA Preparation Kit for 1.5kb & 3.0kb
バイオダイナミクス研究所 製品特集
ダイナコンピテントセル(DynaCompetent Cells)選択ガイド
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[在庫・価格 :2021年11月30日 08時51分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

DynaCompetent Cells JetGiga DH5α

文献数:0

キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文 6分間の迅速な形質転換方法で,1×109 CFU/μgの高い形質転換効率を持つDH5αコンピテントセル。
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年11月15日号 p.27
ニュース2021年4月15日号 p.30

製品記事 DynaCompetent Cells JetGiga DH5α
Long ssDNA Preparation Kit for 1.5kb & 3.0kb
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ヒートショックが不要なクローニング用コンピテントセル
DynaCompetent Cells Jet DH5α

コンピテントセルを用いた形質転換操作では一般的にヒートショックとその後の培養操作が必要になります。DynaCompetent Cells Jet DH5αはBio Dynamics Laboratory社の高度な技術により開発された,ヒートショックおよびその後の培養操作が不要なコンピテントセルです。

特長

  • ヒートショックとプレーティング前の培養操作が不要で,約10分で形質転換操作が完了します。
  • 添付の回復培地(Recovery medium)により>2×108 cfu/μg(pUC19)の高い形質転換効率が得られます。
  • 1回の操作で使い切れるように100μlずつチューブに分注されています。
  • -80℃で12か月間保存しても形質転換効率はほとんど低下しません。
  • 由来:DH5α

操作法概略

Jet Competent E. coli Cell DH5α の操作法概略

[在庫・価格 :2021年11月30日 08時51分現在]

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詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
DynaCompetent Cells Jet DH5α
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文
10分で形質転換が完了するE. coliコンピテントセルDH5α(Competent Cell DH5α)。10×1 ml回復培地(Recovery medium)添付。形質転換効率:>2×108 cfu/μg(pUC19)
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年8月1日号 p.36
ニュース2018年11月15日号 p.56

製品記事 DynaCompetent Cells Jet DH5α
バイオダイナミクス研究所 製品特集
ダイナコンピテントセル(DynaCompetent Cells)選択ガイド
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DynaCompetent Cells Jet DH5α, Large
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文
10分で形質転換が完了するE. coliコンピテントセルDH5α(Competent Cell DH5α)。10×1 ml回復培地(Recovery medium)添付。形質転換効率:>2×108 cfu/μg(pUC19)
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年11月15日号 p.56
ニュース2017年11月15日号 p.52

製品記事 DynaCompetent Cells Jet DH5α
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[在庫・価格 :2021年11月30日 08時51分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

DynaCompetent Cells Jet DH5α

文献数:0

キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文 10分で形質転換が完了するE. coliコンピテントセルDH5α(Competent Cell DH5α)。10×1 ml回復培地(Recovery medium)添付。形質転換効率:>2×108 cfu/μg(pUC19)
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年8月1日号 p.36
ニュース2018年11月15日号 p.56

製品記事 DynaCompetent Cells Jet DH5α
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DynaCompetent Cells Jet DH5α, Large

文献数:0

キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文 10分で形質転換が完了するE. coliコンピテントセルDH5α(Competent Cell DH5α)。10×1 ml回復培地(Recovery medium)添付。形質転換効率:>2×108 cfu/μg(pUC19)
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年11月15日号 p.56
ニュース2017年11月15日号 p.52

製品記事 DynaCompetent Cells Jet DH5α
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ヒートショックが不要な発現用コンピテントセル
DynaCompetent Cells Zip BL21(DE3)

DynaCompetent Cells Zip BL21(DE3)はタンパク質発現用 BL21 (DE3) 株の迅速な形質転換を可能にしたコンピテントセルです。プラスミド DNA をDynaCompetent Cells Zip BL21(DE3)に加え,ヒートショックおよびその後の培養をせずに,そのままプレーティングできます。

特長

  • 約 5 分で形質転換操作を終了でき,操作時間の大幅な短縮が可能です。
  • 形質転換効率:≧ 2 × 106 cfu/μg (pUC19)
  • 1 回の操作で使い切れるように 100 μl ずつチューブに分注されています。
ヒートショック不要のコンピテントセル DynaCompetent Cells Zip BL21(DE3)

操作方法概略

操作方法概略

[在庫・価格 :2021年11月30日 08時51分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
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納期 文献数
DynaCompetent Cells Zip BL21(DE3)
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文
約5分で形質転換が完了する発現用E. coliコンピテントセルBL21(DE3)(Competent Cell BL21(DE3))。形質転換効率:>2×106 cfu/μg(pUC19)
法規制等 カルタヘナ該当品
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2020年7月1日号 p.25
ニュース2019年9月1日号 p.24

製品記事 DynaCompetent Cells Zip BL21(DE3)
pET Expression Pack
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[在庫・価格 :2021年11月30日 08時51分現在]

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DynaCompetent Cells Zip BL21(DE3)

文献数:0

キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文 約5分で形質転換が完了する発現用E. coliコンピテントセルBL21(DE3)(Competent Cell BL21(DE3))。形質転換効率:>2×106 cfu/μg(pUC19)
法規制等 カルタヘナ該当品
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2020年7月1日号 p.25
ニュース2019年9月1日号 p.24

製品記事 DynaCompetent Cells Zip BL21(DE3)
pET Expression Pack
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スタンダードなクローニング用コンピテントセル
DynaCompetent Cells DH5α/JM109

クローニングやライブラリー作製に適した形質転換効率の高いコンピテントセルです。

特長

  • >5 × 108 cfu/μg(pUC19)の高い形質転換効率を示します。
  • 1 回の操作で使い切れるように 100 μl ずつチューブに分注されています。
  • -80 ℃で 6 か月保存しても,形質転換効率はほとんど低下しません。
  • SOC 培地が添付されています。

[在庫・価格 :2021年11月30日 08時51分現在]

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詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
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納期 文献数
DynaCompetent Cells DH5α
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文
E. coli コンピテントセルDH5α(Competent Cell DH5α)。10×1 ml SOC medium添付。形質転換効率:>5×108 cfu/μg(pUC19)
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年11月15日号 p.56
ニュース2017年11月15日号 p.52

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DynaCompetent Cells DH5α, Large
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文
E. coli コンピテントセルDH5α(Competent Cell DH5α)。10×1 ml SOC medium添付。形質転換効率:>5×108 cfu/μg(pUC19)
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年11月15日号 p.56
ニュース2017年11月15日号 p.52

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DynaCompetent Cells JM109
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文
E. coli コンピテントセルJM109(Competent Cell JM109)。10×1 ml SOC medium添付。形質転換効率:>5×108 cfu/μg(pUC19)
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年8月1日号 p.36
ニュース2018年11月15日号 p.56

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DynaCompetent Cells JM109, Large
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文
E. coli コンピテントセルJM109(Competent Cell JM109)。10×1 ml SOC medium添付。形質転換効率:>5×108 cfu/μg(pUC19)
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年11月15日号 p.56
ニュース2017年11月15日号 p.52

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[在庫・価格 :2021年11月30日 08時51分現在]

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DynaCompetent Cells DH5α

文献数:0

キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文 E. coli コンピテントセルDH5α(Competent Cell DH5α)。10×1 ml SOC medium添付。形質転換効率:>5×108 cfu/μg(pUC19)
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年11月15日号 p.56
ニュース2017年11月15日号 p.52

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DynaCompetent Cells DH5α, Large

文献数:0

キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文 E. coli コンピテントセルDH5α(Competent Cell DH5α)。10×1 ml SOC medium添付。形質転換効率:>5×108 cfu/μg(pUC19)
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年11月15日号 p.56
ニュース2017年11月15日号 p.52

製品記事 DynaCompetent Cells DH5α/JM109
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DynaCompetent Cells JM109

文献数:0

キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文 E. coli コンピテントセルJM109(Competent Cell JM109)。10×1 ml SOC medium添付。形質転換効率:>5×108 cfu/μg(pUC19)
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年8月1日号 p.36
ニュース2018年11月15日号 p.56

製品記事 DynaCompetent Cells DH5α/JM109
バイオダイナミクス研究所 製品特集
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DynaCompetent Cells JM109, Large

文献数:0

キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文 E. coli コンピテントセルJM109(Competent Cell JM109)。10×1 ml SOC medium添付。形質転換効率:>5×108 cfu/μg(pUC19)
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年11月15日号 p.56
ニュース2017年11月15日号 p.52

製品記事 DynaCompetent Cells DH5α/JM109
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スタンダードな発現用コンピテントセル
DynaCompetent Cells BL21(DE3)/BL21(DE3)pLysS

大腸菌 BL21 株とは

BL21(DE3)株は広く使われている大腸菌発現システムの宿主です。詳細はこちら「ダイナコンピテントセル(DynaCompetent Cells)選択ガイド」をご覧下さい。

[在庫・価格 :2021年11月30日 08時51分現在]

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詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
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  • 価格
  • 在庫
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納期 文献数
DynaCompetent Cells BL21(DE3)
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文
E. coliコンピテントセルBL21(DE3)(Competent Cell BL21(DE3))株は広く使われているE. coli発現系の宿主。10×1 ml SOC medium添付。形質転換効率:>5×107 cfu/μg(pUC19)
法規制等 カルタヘナ該当品
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年9月1日号 p.24
ニュース2018年11月15日号 p.57

製品記事 DynaCompetent Cells Zip BL21(DE3)
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関連記事
DynaCompetent Cells BL21(DE3)pLysS
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文
E. coliコンピテントセルBL21(DE3)pLysS(Competent Cell BL21(DE3)pLysS)株はBL21(DE3)株にT7リゾチーム遺伝子を持つプラスミドpLysSを導入したT7発現系の宿主。T7リゾチームはT7ポリメラーゼに結合して転写を抑制するため,非誘導時にバックグラウンドとなる発現レベルを抑制できる。毒性を示すタンパク質の発現に有効。10×1 ml SOC medium添付。形質転換効率:>5×107 cfu/μg(pUC19)
法規制等 カルタヘナ該当品
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年9月1日号 p.24
ニュース2019年1月合併号 p.4

製品記事 DynaCompetent Cells Zip BL21(DE3)
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[在庫・価格 :2021年11月30日 08時51分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

DynaCompetent Cells BL21(DE3)

文献数:0

キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文 E. coliコンピテントセルBL21(DE3)(Competent Cell BL21(DE3))株は広く使われているE. coli発現系の宿主。10×1 ml SOC medium添付。形質転換効率:>5×107 cfu/μg(pUC19)
法規制等 カルタヘナ該当品
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年9月1日号 p.24
ニュース2018年11月15日号 p.57

製品記事 DynaCompetent Cells Zip BL21(DE3)
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DynaCompetent Cells BL21(DE3)pLysS

文献数:0

キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文 E. coliコンピテントセルBL21(DE3)pLysS(Competent Cell BL21(DE3)pLysS)株はBL21(DE3)株にT7リゾチーム遺伝子を持つプラスミドpLysSを導入したT7発現系の宿主。T7リゾチームはT7ポリメラーゼに結合して転写を抑制するため,非誘導時にバックグラウンドとなる発現レベルを抑制できる。毒性を示すタンパク質の発現に有効。10×1 ml SOC medium添付。形質転換効率:>5×107 cfu/μg(pUC19)
法規制等 カルタヘナ該当品
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年9月1日号 p.24
ニュース2019年1月合併号 p.4

製品記事 DynaCompetent Cells Zip BL21(DE3)
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ISによる変異がプラスミドに入りにくいコンピテントセル
DynaCompetent Cells IS-mutation Safe

ゲノム中のDNA型転移因子(Insertion Sequence Element, IS)の活性を低下させた大腸菌コンピテントセルです。遺伝子クローニングやプラスミド調製に利用できます。特に大腸菌に負荷のかかる大きなプラスミド等のクローニングに有用です。
本製品は株式会社バイオパレットの特許技術である“切らないゲノム編集®” Target-AID®によって開発されました。

製品名変更のお知らせ

本製品は,2021年4月より,以下のとおり製品名を変更いたしました。
旧品名:DynaCompetent Cells LowInSeq
新品名:DynaCompetent Cells IS-mutation Safe
なお,製品仕様,商品コード,価格,容量に変更はございません。


ISがプラスミドを傷つけている可能性があります。

IS(Insertion sequence element)は大腸菌ゲノム内に存在する「動き回る遺伝子」であり,自身が移動する際に使う酵素であるトランスポザーゼ(Transposase)を持っています。このトランスポザーゼにより,プラスミドにISが挿入されることがあります。その結果,目的インサートの破壊,正常な発現がみられない,プラスミドのコピー数の変化などの問題が生じる可能性があります。

Problem-in-Ecoli

そこでこちら...
DynaCompetent Cells IS-mutation Safe
本製品はDH5αを元株として,大腸菌ゲノム中のISのうち,IS2,IS5,IS10,ISEc63(類似配列)のトランスポザーゼ翻訳領域中にTarget-AID®を用いて終止コドンを導入し,ISの活性を低下させた*1 大腸菌コンピテントセルです。

*1 ISの活性は低下しているものの,ISが転移しないことを保証するものではありません。

LowInSeq-Structure

プラスミドへのIS挿入が減少

IS-insertion-frequency

プラスミドに対するIS挿入頻度の低下の確認
本製品および大腸菌DH5α株をアンピシリン耐性プラスミド(30 kb, pUC Ori)で形質転換後,得られたコロニーを用いて24時間の液体培養を行い,さらに6回まで継代培養を行った。
それぞれの継代培養時にプラスミドを精製し,HiSeqでシークエンシングを行い,プラスミドのうちIS*2の挿入されたものの概算比率を推定した*3, 4
DH5α株に対して本製品ではプラスミドへのISの挿入が抑制された。
*2 IS:IS1, IS2, IS3, IS4, IS5, IS10, IS30, ISEc5, IS609, ISEc63の合計数。
*3 DH5α株は7回継代培養時点で計算上100%を越えており,1つのプラスミドに2つ以上のISが挿入されたことが示唆される。
*4 別途,DH5α株に同プラスミドを挿入し,7回の継代培養後9クローンを単離し,サンガーシークエンシングを行ったところ,すべてのクローンにISEc63類似配列が挿入されており,プラスミドへのIS挿入率の高さが裏付けられた。


IS-insertion-Band-Pattern

上記のプラスミドをBamHⅠで消化し,アガロースゲル電気泳動を行った。
本プラスミドのBamHⅠサイトは2つであり,本来2本のバンドが生じるが,継代回数を重ねることによりDH5α株ではバンドパターンに変化が確認された。プラスミドへのISの挿入が示唆される。
一方,本製品で継代したプラスミドでは,バンドパターンの変化が抑制されていた。


仕様

  • 形質転換効率:>1 × 108 CFU/μg(pUC19)
  • 10×1 ml SOC medium添付

本製品は,カルタヘナ法規制に該当いたしません。


[在庫・価格 :2021年11月30日 08時51分現在]

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DynaCompetent Cells IS-mutation Safe
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説明文
ISによる変異がプラスミドに入りにくいクローニング用コンピテントセル。ゲノム編集によりDNA型転移因子(Insertion Sequence Element)の活性を低下させている。※本製品は,カルタヘナ法規制に該当いたしません。旧品名:DynaCompetent Cells LowInSeq。
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年7月15日号 p.28

製品記事 DynaCompetent Cells IS-mutation Safe (旧製品名:LowInSeq)
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DynaCompetent Cells IS-mutation Safe

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説明文 ISによる変異がプラスミドに入りにくいクローニング用コンピテントセル。ゲノム編集によりDNA型転移因子(Insertion Sequence Element)の活性を低下させている。※本製品は,カルタヘナ法規制に該当いたしません。旧品名:DynaCompetent Cells LowInSeq。
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「切らないゲノム編集® 」塩基編集の開発と応用

神戸大学大学院西田敬二教授

西田 敬二 教授

神戸大学 先端バイオ工学研究センター 副センター長
神戸大学大学院 科学技術イノベーション研究科 教授
(株)バイオパレット 取締役

塩基編集の確立

一般的なCRISPR-Casなどのゲノム編集技術は,そのヌクレアーゼ活性により標的のDNAを切断し,宿主細胞の修復過程においてランダムな欠失挿入あるいは相同組換えを誘発することで配列改変を期待するものである。これまで遺伝子操作が限定的であった高等動植物においても効率よく機能するため,生命科学における革命的なツールとして幅広い用途での利用が広がっている。一方で,大規模な欠損が起こるなど予期せぬ改変結果となったり,DNA切断による細胞毒性があったりなど,技術的な課題が見えてきている。このような「切る」ゲノム編集の課題を解決できるのがいわゆる「切らない」ゲノム編集®である塩基編集技術(Base editing)である。Casヌクレアーゼを失活させたものに脱アミノ化酵素を付加し,標的配列に特異的な塩基変換を誘発するというコンセプトで,神戸大学グループのTarget-AID® 1,およびHarvard大学のBase editor(BE)2がそれぞれ異なる由来のシチジン脱アミノ化酵素を用いて実現し,2016 年に発表している(図1)。
塩基編集技術のバリエーション
図1 塩基編集技術のバリエーション

DNA塩基の脱アミノ化は自然にも頻繁に起こる現象であり,例えばCの脱アミノ化はU を生じる(図2)。通常DNA上のUは,塩基除去修復機構(Base excision repair:BER)により取り除かれて正しく修復されるため変異とならないが,修復が追い付かない場合はUが残ったままDNA複製が進行し,Tとして認識されるため,CからTへの変異が生じる。
実際に用いられる脱アミノ化酵素は,Target-AID®ではヒトAIDオルソログであるヤツメウナギ由来のPmCDA1,BEではラット由来のDNA/RNA脱アミノ化酵素APOBECである。いずれもC:GからT:Aの変換を行うが,それぞれに特性があり変異の導入される部位や幅が異なる。
また,2017年にHarvard大学のグループが,Aの変換も可能にするAdenine Base Editor(ABE)を開発した3。Aの脱アミノ化により生じるヒポキサンチン(イノシンの塩基部分)が,生体内ポリメラーゼによってG と誤認されることにより,A:TからG:Cの変換が行われる(図2)。DNA上のAを変換する酵素は自然界においては知られていなかったため,tRNA編集に関わる大腸菌由来のRNAアデニン脱アミノ化酵素TadAを分子進化工学によってDNA型に変換することにより実現されている。Target- ACE4は,両タイプの酵素を同時に用いてCとAの変換を一度に行うため,より幅広いパターンの変異を生み出すことができる。 シトシンおよびアデニンの脱アミノ化
図2 シトシンおよびアデニンの脱アミノ化

塩基編集の応用と事業展開

動物や植物,幅広い微生物において塩基編集の適用および実用化が進んでおり,従来のCRISPRなどでは困難であった細胞においても有効に機能する例もある。変換できるパターンに制約があるものの,切断を介さずに一塩基変異を導入できることから,特に遺伝子疾患など難病の遺伝子治療法開発の期待が高く,多くの研究が進められている。Harvard大学などの知財が導出されているBEAM therapeutics社では,複数の疾患治療のパイプライン開発が進んでいる。

神戸大学の知財をもとに2017 年に創設された(株)バイオパレットは,BEAM therapeutics 社とクロスライセンス契約を締結し,相互の知財アクセスを可能としている。(株)バイオパレットは特にマイクロバイオームを介した疾患治療の可能性に注目し,Living medicine という新たなモダリティの実現を目指している。

微生物のゲノム改変において,切るゲノム編集は特に致死性が高く,多点同時編集などは塩基編集でなければ困難である5(図3)。(株)バイオダイナミクス研究所と(株)バイオパレットは,大腸菌の主要なトランスポゾン遺伝子4種類の計25コピーのコード領域に終始コドンを導入して不活性化を行ったコンピテントセル「DynaCompetent Cells LowInSeq(フナコシ注:現在の製品名 DynaCompetent Cells IS-mutation Safe )」を共同開発した。これはクローニングの際,特に大きなDNA断片や細胞への負荷が大きい遺伝子などを保持させようとした時に,通常の大腸菌株で見られるようなトランスポゾンが挿入される現象を大幅に低減するものである。日本では,おそらく初めてカルタヘナ法規制に該当しないゲノム編集プロダクトとして販売されたケースであり,社会導出のプロセスとしても意義深いといえる。

今後は,より幅広い分野での実用化に向けた研究開発とともに,社会受容性の醸成も重要になる。そのためには,塩基編集技術として編集自由度の拡大やオフターゲットなどのリスク低減など,さらなる改良を進めることも期待される。

DNA 切断型による多点同時編集
DNA 切断型による多点同時編集

塩基編集による多点同時編集
塩基編集による多点同時編集

図3 塩基編集ではDNA 切断による染色体分断が起こり難い



参考文献
1. Nishida, K., et al., Science, 353, aaf8729 (2016).[PMID: 27492474
2. Komor, A. C., et al., Nature, 533, 420~424 (2016).[PMID: 27096365
3.Gaudelli, N. M., et al., Nature, 551, 464~471 (2017).[PMID: 29160308
4. Sakata, R. C., et al., Nature Biotechnol., 38, 865~869 (2020).[PMID: 32483365
5. Banno, S., et al., Nature Microbiol., 3, 423~429b(2018).[PMID: 29403014



概算定量可能なDNA分子量ラダーマーカー
DynaMarker® DNA Ladder Marker

バンドパターンに特長があり,各バンドの視認性に優れているDNA分子量ラダーマーカーです。DNAの概算定量も可能です。

特長

  • あらかじめloading dyeに溶解されているReady-to-useタイプのDNA分子量ラダーマーカーで,そのままアプライできます。
  • 各バンドは正確に濃度調製されており,試料を概算定量できます。
  • UVイルミネーター上で見やすいバンドパターンです。
  • 識別しやすい青色で,扱いやすい6×BPB loading dyeが添付されています。
DynaMarker DNA Low D DynaMarker DNA High D
DynaMarker DNA Low D DynaMarker DNA
3.5% Agarose Gel, TAE 0.8% Agarose Gel, TAE


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説明文
DNA分子量ラダーマーカー(DNA Ladder Marker)。Ready-to-LoadのDNA分子量マーカー。50~1,000 bp。6×BPB loading dye(1 ml)添付。容量:1 ml(5~10μl/lane)。容量:1 ml(5~10μl/lane)
法規制等
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掲載カタログ ニュース2019年5月1日号 p.27
ニュース2018年11月15日号 p.59

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キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文
DNA分子量ラダーマーカー(DNA Ladder Marker)。Ready-to-LoadのDNA分子量マーカー。300~10,000 bp。6×BPB loading dye(1 ml)添付。容量:1 ml(5~10μl/lane)。容量:1 ml(5~10μl/lane)
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2019年5月1日号 p.27
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DynaMarker, DNA Low D

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キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文 DNA分子量ラダーマーカー(DNA Ladder Marker)。Ready-to-LoadのDNA分子量マーカー。50~1,000 bp。6×BPB loading dye(1 ml)添付。容量:1 ml(5~10μl/lane)。容量:1 ml(5~10μl/lane)
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掲載カタログ ニュース2019年5月1日号 p.27
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説明文 DNA分子量ラダーマーカー(DNA Ladder Marker)。Ready-to-LoadのDNA分子量マーカー。300~10,000 bp。6×BPB loading dye(1 ml)添付。容量:1 ml(5~10μl/lane)。容量:1 ml(5~10μl/lane)
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DNA Small, DynaMarker
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20,30,40,50,60,75,100 bp の長さの平滑末端を有する二本鎖DNA を用いたSmall DNAラダー マーカー(Small DNA Ladder Marker)。6 × BPS loading dye 添付。容量:7μg/50μl (1μl/lane)
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DNA Small, DynaMarker

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キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文 20,30,40,50,60,75,100 bp の長さの平滑末端を有する二本鎖DNA を用いたSmall DNAラダー マーカー(Small DNA Ladder Marker)。6 × BPS loading dye 添付。容量:7μg/50μl (1μl/lane)
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概算定量可能なRNA分子量ラダーマーカー
DynaMarker® RNA Ladder Marker

変性ゲル電気泳動用のRNA分子量ラダーマーカーです。サイズの異なる 2 種類の製品があり( Low,High ),Low Marker には ready - to - use タイプの製品もあります。各バンドの RNA 濃度は 0.1 μg /μl ( Low Easy Load のみ 0.1μg / 5 μl )に調製されているため,バンドの濃淡を比較することで試料 RNA の量が概算できます。

DynaMarker RNA Ladder Markerの電気泳動像

特長

■RNA Low II

  • 20〜500 base の RNA 断片で構成された変性ポリアクリルアミドゲル電気泳動用RNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)です。
  • 各 RNA 断片は,マーカー 1 μl あたり,約 0.1 μg に調製されています。
  • siRNA など低分子 RNA のサイズの推定に最適です。

■RNA Low Easy Load II

  • RNA Low II( #DM152 )と同サイズの RNA 断片から成る,ready - to - use タイプのRNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)です。熱処理後,すぐにアプライできます。
  • 各 RNA 断片は,マーカー 5 μl あたり約 0.1 μg に調製されています。
  • 変性ポリアクリルアミドゲル電気泳動用のローディングバッファー( RNA loading buffer PA )が添付されており,容易に試料を調製できます。

■RNA High

  • 200 〜 8,000 base の RNA 断片で構成された変性アガロースゲル電気泳動用RNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)です。
  • 各 RNA 断片は,マーカー 1 μl あたり,約 0.1 μg に調製されています。

いずれの製品も RNA で構成されているため,ご使用の際はRNaseの混入にご注意下さい。

[在庫・価格 :2021年11月30日 08時51分現在]

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DynaMarker, RNA Low II
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キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文
変性ゲル電気泳動用のRNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)。。RNA断片のサイズ:20, 50, 100, 200, 300, 400, 500 base,形状:溶液,容量:50μg/72μl(0.7 mg/ml)
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2020年4月15日号 p.23
ニュース2019年5月1日号 p.27

製品記事 DynaMarker(R) RNA Ladder Marker
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DynaMarker, RNA Low II Easy Load
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
変性ゲル電気泳動用のRNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)。RNA Loading buffer PA添付。形状:溶液,RNA断片のサイズ:20, 50, 100, 200, 300, 400, 500 base,容量:25μg/125μl(0.2 mg/ml)
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2020年4月15日号 p.23
ニュース2018年11月15日号 p.59

製品記事 DynaMarker(R) RNA Ladder Marker
バイオダイナミクス研究所 製品特集
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DynaMarker, RNA High
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文
RNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)。ミニゲル約120レーン分。形状:溶液,RNA断片のサイズ:200, 500, 1,000, 1,500, 2,000, 3,000, 4,000, 5,000, 8,000 base,容量:50μg/56μl(0.9 mg/ml)
法規制等
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掲載カタログ ニュース2020年4月15日号 p.23
ニュース2019年5月1日号 p.27

製品記事 DynaMarker(R) RNA Ladder Marker
DynaMarker® RNA High for Easy Electrophoresis
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[在庫・価格 :2021年11月30日 08時51分現在]

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DynaMarker, RNA Low II

文献数:0

キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文 変性ゲル電気泳動用のRNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)。。RNA断片のサイズ:20, 50, 100, 200, 300, 400, 500 base,形状:溶液,容量:50μg/72μl(0.7 mg/ml)
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2020年4月15日号 p.23
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製品記事 DynaMarker(R) RNA Ladder Marker
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DynaMarker, RNA Low II Easy Load

文献数:0

説明文 変性ゲル電気泳動用のRNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)。RNA Loading buffer PA添付。形状:溶液,RNA断片のサイズ:20, 50, 100, 200, 300, 400, 500 base,容量:25μg/125μl(0.2 mg/ml)
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製品記事 DynaMarker(R) RNA Ladder Marker
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DynaMarker, RNA High

文献数:0

キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文 RNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)。ミニゲル約120レーン分。形状:溶液,RNA断片のサイズ:200, 500, 1,000, 1,500, 2,000, 3,000, 4,000, 5,000, 8,000 base,容量:50μg/56μl(0.9 mg/ml)
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掲載カタログ ニュース2020年4月15日号 p.23
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製品記事 DynaMarker(R) RNA Ladder Marker
DynaMarker® RNA High for Easy Electrophoresis
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非変性アガロースゲルでのRNA電気泳動が簡単に行えるバッファーとマーカーのセット
DynaMarker® RNA High for Easy Electrophoresis

変性アガロースゲルだけでなく非変性アガロースゲルでのRNA電気泳動を容易にする独自のローディングバッファーと,RNA分子量ラダーマーカーのセットです。

本製品をご使用いただいたユーザー様のレビューはこちら

特長

  • 添付の RNA Loading Buffer AG+にホルムアルデヒドを加えるだけで,ホルムアルデヒド変性ゲルのみならず,1×TAE や 0.5×TBEの非変性ゲルでのRNA電気泳動が容易にできます。
  • DynaMarker® RNA High AGNは DynaMarker® RNA High と同種類の, 200, 500, 1,000, 1,500, 2,000, 3,000, 4,000, 5,000, 8,000塩基のRNAから構成されています。
  • 各バンドのRNA濃度は0.1μg/μlに調製されているため,バンドの濃淡の比較によって試料 NAの量が概算できます。
DynaMarker RNA High for Easy Electrophoresisの電気泳動図

ゲルローディング液の調製法

  1. 本製品の RNA Loading Buffer AG+とホルムアルデヒドを混合し,ホルムアルデヒド添加RNA Loading Buffer AG+を作製する。
  2. 作製したホルムアルデヒド添加RNA Loading Buffer AG+をDynaMaker® RNA High AGN または RNA 試料と混合し,熱処理して,電気泳動に供する。

本製品には含まれていません。

ホルムアルデヒド変性アガロースゲルと非変性アガロースゲルとの比較

DynaMarker® RNA High AGN(0.45μg/well:左端)と,ヒト組織全RNA(0.4μg/well)を,RNA loading buffer AG+(ホルムアルデヒド添加済み)で調製した後,各アガロースゲルで電気泳動を行った。変性ゲルおよび非変性ゲルのいずれでも同様の泳動パターンを示した。

  • ホルムアルデヒド変性アガロースゲル:1×MOPS, 1%アガロース
  • 非変性アガロースゲル:1×TAE, 1.3%アガロース

キット内容

  • RNA loading buffer AG+
  • DynaMarker® RNA High AGN(約25ローディング分)

お客様ご使用例
様々なRNA サンプルのサイズ確認・解析に

国立遺伝学研究所 新分野創造センター 特任研究員 黒川裕美子先生

黒川裕美子先生

細胞内の解析をしていると,研究テーマが意外な分野と繋がることがある。数年前,ふとしたきっかけで急にRNAの解析をすることになった。これまでDNA結合タンパク質の解析をメインにしていたため,DNAの扱いには慣れていたが,どうしてもRNAとなるとハードルが高い。昔と違い,今は簡便な精製キットやin vitro 転写キットのおかげで高純度なRNAが簡単に調製できる。
しかし,問題はその後である。調製したRNAのサイズを正確に調べるためには変性条件が必要であり,ホルムアルデヒド入りのアガロースゲルを用いた電気泳動をする必要がある。吸引毒性のあるホルムアルデヒドの使用は,取り扱いや使用後の処理に注意が必要であり,正直なところ多用は避けたい。泳動バッファーも普段使わないMOPSバッファーを調製し,かつ,RNAの分解にも注意が必要である。うん,やっぱりRNA実験はやめよう。いやちょっと待って,もしかしたら大発見の可能性も,そういえば先週届いたフナコシニュースに確か…
そうして出会ったのがこのDynaMarker® RNA High for Easy Electrophoresis(BioDynamics Laboratory社)だった。
ホルムアルデヒドを付属のRNA Loading Buffer AG+と使う分だけ混合し,RNAマーカーやRNAサンプルに加えて熱処理するだけ。あとはDNA実験のときと同じようにいつものアガロースゲルでいつものTAEバッファーで電気泳動。そんな巧い話があるかと最初は半信半疑だったが,実際のデータを見てもらえば一目瞭然。分離もクリアで泳動もシャープなRNAマーカーによってtotal RNA やin vitro転写で合成したRNA断片のサイズまで正確に同定できている。使用するホルムアルデヒドもごくごく少量。これを知ったおかげで,実験のフットワークが軽くなり,臆することなくRNA実験ができるようになった。おかげで現在までにいくつかの新しい知見が得られている。またこの実験以外にも普段のノーザンブロッティングにも使用している。安全性を考えると学生実験では特にお勧めしたいイチオシの製品だ。

■実験方法

  1. 18S rRNA の部位特異的な機能を解析するため,in vitro転写で各領域のRNA 断片を合成
  2. 精製後の各RNA断片をDynaMarker® RNA High for Easy Electrophoresisを用いてアガロースゲル電気泳動
  
写真1. in vitro転写で合成した18S rRNAの各領域断片の電気泳動 写真2. 大腸菌と分裂酵母それぞれから精製したtotal RNA の電気泳動
in vitro 転写で合成した18S rRNAの各領域断片の電気泳動 大腸菌と分裂酵母それぞれから精製したtotal RNAの電気泳動

本レビューは2016年にご執筆いただいたものです。


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DynaMarker, RNA High for Easy Electrophoresis
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非変性アガロースゲルでの電気泳動にも使用可能なRNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)。RNA断片のサイズ:200, 500, 1,000, 1,500, 2,000, 3,000, 4,000, 5,000, 8,000 base,形状:溶液,容量:25μg/28μl,セット内容:DynaMarker RNA High AGN(0.9 mg/ml),RNA loading buffer AG+(1 ml)
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製品記事 DynaMarker® RNA High for Easy Electrophoresis
バイオダイナミクス研究所 製品特集
RNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)選択ガイド
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[在庫・価格 :2021年11月30日 08時51分現在]

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DynaMarker, RNA High for Easy Electrophoresis

文献数:0

キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文 非変性アガロースゲルでの電気泳動にも使用可能なRNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)。RNA断片のサイズ:200, 500, 1,000, 1,500, 2,000, 3,000, 4,000, 5,000, 8,000 base,形状:溶液,容量:25μg/28μl,セット内容:DynaMarker RNA High AGN(0.9 mg/ml),RNA loading buffer AG+(1 ml)
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年11月1日号 p.28
ニュース2021年5月1日号 p.25

製品記事 DynaMarker® RNA High for Easy Electrophoresis
バイオダイナミクス研究所 製品特集
RNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)選択ガイド
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二本鎖RNA分子量ラダーマーカー
DynaMarker® dsRNA Ladder Marker

siRNAやmiRNAなどをはじめとする二本鎖RNAの分析に使用できるdsRNA分子量ラダーマーカーです。非変性ポリアクリルアミドゲル電気泳動用に調製されており,二本鎖 RNA の分子量の確認に適しています。

特長

■DynaMarker dsRNA

  • 10 〜 1,000 bp の 二本鎖 RNA 断片からなるRNAラダーマーカーです。
  • 20 bp のバンドはマーカー 1 μl あたり 25 ng に調製されています。
二本鎖RNA分子量ラダーマーカー DynaMarker(R) dsRNA Marker

左レーン:DynaMarker dsRNA( 0.5μg )
右レーン:Dicer で分解した二本鎖 RNA
・ゲル組成:7.5 % アクリルアミド, 1 × TBE

[在庫・価格 :2021年11月30日 08時51分現在]

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詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
DynaMarker, dsRNA
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文
非変性アクリルアミドゲル用の二本鎖RNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)。形状:溶液,容量:25μg/100μl(2μl/lane)。形状:溶液,容量:25μg/100μl(2μl/lane)
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2020年4月15日号 p.23
ニュース2019年5月1日号 p.27

製品記事 DynaMarker(R) dsRNA Ladder Marker
バイオダイナミクス研究所 製品特集
RNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)選択ガイド
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[在庫・価格 :2021年11月30日 08時51分現在]

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DynaMarker, dsRNA

文献数:0

キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文 非変性アクリルアミドゲル用の二本鎖RNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)。形状:溶液,容量:25μg/100μl(2μl/lane)。形状:溶液,容量:25μg/100μl(2μl/lane)
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2020年4月15日号 p.23
ニュース2019年5月1日号 p.27

製品記事 DynaMarker(R) dsRNA Ladder Marker
バイオダイナミクス研究所 製品特集
RNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)選択ガイド
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small RNA分子量ラダーマーカー
DynaMarker® Small RNA II Ladder Marker

miRNAやsiRNA 等をはじめとするsmall RNAの分析に最適な一本鎖small RNA分子量ラダーマーカーです。各バンドはシャープで視認性に優れています。

特長

■ DynaMarker® Small RNA II Ladder Marker

  • 5 種類の一本鎖 RNA, 20, 30, 40, 50, 100 塩基で構成されているsmall RNA分子量ラダーマーカーです。
  • 変性ポリアクリルアミドゲルを用いた電気泳動に適しています。
small RNA Ladder Markerの使用例

[在庫・価格 :2021年11月30日 08時51分現在]

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詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
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  • 法規制等
納期 文献数
DynaMarker, Small RNA II
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文
変性ポリアクリルゲル電気泳動用のsmall RNA分子量ラダーマーカー(small RNA Ladder Marker)。形状:溶液,容量:30μl(約30回分),RNA断片のサイズ:20, 30, 40, 50, 100 base
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2020年4月15日号 p.23
ニュース2019年5月1日号 p.27

製品記事 DynaMarker® Small RNA II Ladder Marker
バイオダイナミクス研究所 製品特集
RNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)選択ガイド
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[在庫・価格 :2021年11月30日 08時51分現在]

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DynaMarker, Small RNA II

文献数:0

キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文 変性ポリアクリルゲル電気泳動用のsmall RNA分子量ラダーマーカー(small RNA Ladder Marker)。形状:溶液,容量:30μl(約30回分),RNA断片のサイズ:20, 30, 40, 50, 100 base
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2020年4月15日号 p.23
ニュース2019年5月1日号 p.27

製品記事 DynaMarker® Small RNA II Ladder Marker
バイオダイナミクス研究所 製品特集
RNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)選択ガイド
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着色済みの一本鎖RNA分子量ラダーマーカー
DynaMarker® Prestain Ladder Marker for RNA

BioDynamics Laboratory 社の特許技術により作られた,一本鎖RNA電気泳動用の着色済み分子量マーカーです。

着色済みの一本鎖RNA分子量ラダーマーカー DynaMarker Prestain Ladder Marker for RNA   着色済みの一本鎖RNAサイズマーカー DynaMarker Prestain Marker for RNA

DynaMarker® Prestain Marker for RNA High(#DM260)

 

DynaMarker® Prestain Marker for Small RNA Plus(#DM253)



色付きだから解決できます!

「もう少し泳動距離を長くしたかった。」
「色素を目印に泳動を止めたのに,見たいところが既にゲルから抜けてしまった。」
「ブロッティングでしっかりトランスファーできているか心配だ。」
「ブロッティング後,メンブレンの裏表がわからなくなってしまった・・・・。」


これまでは,電気泳動の終点の確認にはBromophenol blueやXylene cyanolなどの低分子色素を基準としてきました。しかし,これらの色素はゲル濃度や泳動条件によって移動度が大きく変化してしまうため,泳動しすぎなどのトラブルの原因となっていました。特に,RNAのような貴重な試料の電気泳動において失敗は避けたいものです。

DynaMarker® Prestain Markerシリーズは低分子色素とは異なり,核酸鎖を骨格としているため,ゲル濃度や泳動条件による見かけ分子量の変化がほとんどなく,シャープなバンドが得られます。
さらに,メンブレンへの転写も可能ですので,ノーザンブロッティング時のブロッティング効率を確認できることも特長の一つです。またメンブレンの上下左右を間違えることもなくなります。


着色済みRNA分子量マーカーのメンブレン転写

RNA電気泳動,ノーザンブロッティングの実験操作法はこちらをご覧下さい。



特長

  • 低分子有機色素とは違い,独自の色素結合方法により核酸鎖へ直接色素を導入しているため,使用ゲル濃度が変わっても正確な分子量を示します。
  • 電気泳動中にも分離状況を確認できるため,最適な時間で泳動を停止できます。
  • ナイロンメンブレンへの転写も可能で,RNAが転写されているかどうかを確認することができます。
  • 青と赤(または青と紫)の配色で,視認性に優れています。
  • 加熱変性操作せずに,そのままアプライできます。
  • 未着色RNAマーカーと移動度が高い一致率を示します。
  • バンドのサイズが異なる2種類の製品があります。

仕様

品 名 RNA High Small RNA Plus
商品コード DM260 DM253
バンドのサイズ(base) 200~8,000 20~100
バンドの色 青,紫 青,赤
適用ゲル 変性アガロース 変性ポリアクリルアミド
対応する未標識RNAマーカー RNA High
(#DM160,#DM170)
Small RNA Ⅱ
(#DM192)
用途 高分子量RNAの
電気泳動
miRNA前駆体
までカバー


着色済みの一本鎖RNA分子量ラダーマーカー DynaMarker Prestain Ladder Marker for RNA

DM253の電気泳動(64倍速)



参考文献

#DM253の使用文献

  1. Wang, Y., et al., Mol. Genet. Genomics, 290 (2), 471 (2015). [PMID:25293935]
  2. Lin, C. Y., et al., Tansgenic Research., 20 (2), 261(2011).[PMID:20559871]

#DM253の紹介文献(プロトコル集)

  • “Northern Hybridization: A Proficient Method for Detection of Small RNAs and MicroRNAs.”
    Iram, S., Methods Mol. Biol., 1099, 179 (2014).[PMID:24243204]

[在庫・価格 :2021年11月30日 08時51分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
DynaMarker, Prestain Marker for RNA High
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文
着色済みのRNA分子量ラダーマーカー(Prestain RNA Ladder Marker)。約30回分。
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年9月15日号 p.23
ニュース2021年2月15日号 p.26

製品記事 DynaMarker® Prestain Ladder Marker for RNA
Long ssDNA Preparation Kit for 1.5kb & 3.0kb
バイオダイナミクス研究所 製品特集
RNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)選択ガイド
関連記事
DynaMarker, Prestain Marker for Small RNA Plus
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 4
キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文
着色済みのRNA分子量ラダーマーカー(Prestain RNA Ladder Marker)。約30回分。
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年9月15日号 p.23
ニュース2021年2月15日号 p.26

製品記事 DynaMarker® Prestain Ladder Marker for RNA
バイオダイナミクス研究所 製品特集
RNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)選択ガイド
関連記事

[在庫・価格 :2021年11月30日 08時51分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

DynaMarker, Prestain Marker for RNA High

文献数:0

キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文 着色済みのRNA分子量ラダーマーカー(Prestain RNA Ladder Marker)。約30回分。
法規制等
保存条件 -80℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年9月15日号 p.23
ニュース2021年2月15日号 p.26

製品記事 DynaMarker® Prestain Ladder Marker for RNA
Long ssDNA Preparation Kit for 1.5kb & 3.0kb
バイオダイナミクス研究所 製品特集
RNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)選択ガイド
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DynaMarker, Prestain Marker for Small RNA Plus

文献数:4

キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文 着色済みのRNA分子量ラダーマーカー(Prestain RNA Ladder Marker)。約30回分。
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年9月15日号 p.23
ニュース2021年2月15日号 p.26

製品記事 DynaMarker® Prestain Ladder Marker for RNA
バイオダイナミクス研究所 製品特集
RNA分子量ラダーマーカー(RNA Ladder Marker)選択ガイド
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冷蔵保存できる着色済みタンパク質分子量マーカー
DynaMarker® Protein MultiColor Ladder Marker, Stable

4℃で1年間保存可能な,天然タンパク質由来の着色済みタンパク質分子量ラダーマーカーです。独自のタンパク質着色技術により高い安定性を実現し,冷蔵庫で保存できます。分子量範囲の異なる2つのタイプ(Broad Range, Low Range)があります。

高い保存安定性イメージ 高い視認性イメージ 正確な分子量イメージ

製品一覧

商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。


品名 Protein MultiColor StableⅡ Protein MultiColor Stable, Low Range
分子量範囲 8.4~230 kDa 1.7~47 kDa
電気泳動図 DM660の電気泳動図 DM670の電気泳動図
適用バッファー Tris-Tricine SDS Buffer
商品コード DM660 DM660L DM670 DM670L
サイズ 120ロード 600ロード 40ロード 120ロード
包装 1.2 ml 5×1.2 ml 200μl 3×200μl

ロット毎の正確な分子量は製品添付のデータシートをご覧下さい。

特長

  • 従来のタンパク質分子量マーカーの多くは凍結保存の必要がありましたが,本製品は4℃で長期間安定なため,凍結・融解の操作は不要で,冷蔵庫で保存できます。
  • 4℃で均一な溶液です。あらかじめサンプルバッファーに溶解してありReady-to-useのため,そのままアプライできます。
  • すべてのバンドでシャープかつ強い色調を示します。
  • 電気泳動やエレクトロブロッティングのモニターに適しています。

■高い保存安定性

Protein MultiColor Stableシリーズは高い保存安定性を持つため,4℃での保存が可能です。

タンパク質安定性の検証

タンパク質安定性の検証
マーカーを37℃で3週間保存した後,SDS-PAGEでバンドの状態を確認した。
過酷条件で保存しても泳動像に変化がなかったため,高い保存安定性を持つことが分かる。

■正確な分子量

Protein MultiColor Stableシリーズの記載分子量は,分子量既知のタンパク質を基準とし,電気泳動的な移動度の差を基に算出しているため,正確な分子量を示します。

β-Amyloid(1-42)検出実験

β-Amyloid(1-42)検出実験
Protein MultiColor Stable, Low Rangeと4.5 kDaのβ-Amyloid(1-42)をポリアクリルアミドゲルで電気泳動後,ニトロセルロース膜へ転写した(セミドライ法)。転写した膜をβ-Amyloidモノクローナル抗体と反応させ,DAB発色により検出を行った。
本マーカーは検出工程を通して着色バンドが退色することなく,高い視認性を維持していた。また,分子量数千Daの低分子量域においても,正確な分子量を表していることが分かる。

メンブレン湿潤状態で画像取得


ポリアクリルアミドゲルの調製~電気泳動までの流れ(SDS-PAGE)

Laemmli法

Protein MultiColor Stable, Low Range(#DM670)はTrice-Tricine SDS-PAGE用です。Trice-Tricine SDS-PAGEのゲル組成,泳動バッファー組成はこちら「Tris-Tricine SDS-PAGE」をご覧下さい。

(クリックで開閉します)

準備する試薬

<ポリアクリルアミドゲル>

  • 1.5 M Tris-HCl (pH 8.8)
  • 0.5 M Tris-HCl (pH 6.8)
  • 30% アクリルアミド/ビス溶液:冷暗所保存
  • 10% SDS (sodium dodecyl sulfate:ドデシル硫酸ナトリウム)
  • 10% APS (ammonium persulfate:過硫酸アンモニウム):用事調製
  • TEMED (N,N,N’,N’-tetramethyl ethylenediamine)

<泳動バッファー>

  • Tris-Glycine SDS buffer:25 mM Tris, 192 mM Glycine, 0.1% SDS

<2×サンプルバッファー>

  • 125 mM Tris-HCl(pH6.8), 4% SDS, 20% glycerol, 10% 2-mercaptoethanol(もしくは200 mM DTT), 0.02% BPB

試薬の調製

1.5M Tris-HCl (pH 8.8) トリスヒドロキシメチルアミノメタン(Tris):18.2 g
超純水に溶解,塩酸(HCl)で pH 8.8 に調製し,100 mlとする
0.5M Tris-HCl (pH 6.8) トリスヒドロキシメチルアミノメタン(Tris):6.1 g
超純水に溶解,塩酸(HCl)で pH 6.8 に調製し,100 mlとする
30% アクリルアミド/ビス溶液(C:5%):冷暗所保存 アクリルアミド:28.5 g
※アクリルアミドの取り扱いには十分に注意すること。
N,N’- メチレンビスアクリルアミド:1.5 g
超純水に溶解し,100 mlとする
この溶液を0.22~0.45μmのフィルターで吸引ろ過する
10% SDS (sodium dodecyl sulfate) SDS(sodium dodecyl sulfate):10 g
超純水に溶解し,100 mlとする
10% APS(ammonium persulfate):用事調製 APS(ammonium persulfate):0.1 g
超純水1 mlに溶解する
10×Tris-Glycine SDS buffer
使用時は超純水で10倍希釈する
トリスヒドロキシメチルアミノメタン(Tris):30.28 g
Glycine:144.13 g
SDS(sodium dodecyl sulfate):10 g
超純水に溶解し,1 L とする(pH 調整は不要)
2×サンプルバッファー
ストック溶液は分注して-80℃で保存する
0.5 M Tris-HCl (pH 6.8):2.5 ml
10% SDS :4 ml
グリセロール:2 ml
2-メルカプエタノール:1 ml(もしくはDTT:0.3 g)
1% BPB溶液 :0.2 ml
超純水で溶解し,10 mlとする

手順

①プレートの組み立て

ポイント!画像 プレート,コーム,シールガスケットは70% エタノールで清拭してから組み立てる。
汚れているとゲルがうまく固まらず,綺麗な泳動像が得られない。

②分離ゲル溶液の調製

泡立たないように注意しながらゲル溶液を混合する。

表1.分離ゲル溶液の調製(ミニゲル2枚の場合)

分離ゲル濃度 6% 7.5% 10% 12.5% 15%
超純水(ml) 8.05 7.3 6.05 4.8 3.55
1.5 M Tris-HCl (pH 8.8) 3.75 3.75 3.75 3.75 3.75
30% アクリルアミド/ビス溶液 3.0 3.75 5.0 6.25 7.5
10% SDS 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15
TEMED 0.00375
(3.75μl)
0.00375
(3.75μl)
0.00375
(3.75μl)
0.00375
(3.75μl)
0.00375
(3.75μl)
10% APS 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05


③分離ゲルの重合(1時間以上)

  1. 調製した分離ゲル溶液をプレートに注ぐ
  2. 注いだ分離ゲル溶液の上に蒸留水を静かに重層する
  3. ゲルが固まるまで静置する
ポイント!画像 分離ゲル濃度が高い場合は,蒸留水ではなく,1-ブタノールを重層すると綺麗な境界面が得られる。

④濃縮ゲル溶液の調製(ミニゲル2枚の場合)

泡立たないように注意しながらゲル溶液を混合する。

表2.濃縮ゲル溶液の調製(ミニゲル2枚の場合)

濃縮ゲル濃度 3% 4% 5%
超純水(ml) 3.9 3.7 3.5
0.5M Tris-HCl(pH 6.8) 1.5 1.5 1.5
30% アクリルアミド/ビス溶液 0.6 0.8 1.0
10% SDS 0.06 0.06 0.06
TEMED 0.003
(3μl)
0.003
(3μl)
0.003
(3μl)
10% APS 0.06 0.06 0.06


⑤濃縮ゲルの重合(1時間以上)

  1. 重層した蒸留水またはを1-ブタノールを取り除く
  2. 調製した濃縮ゲル溶液を注ぐ
  3. 空気が入らないように注意しながらコームを挿し込む
  4. ゲルが固まるまで静置する

⑥試料の調製

  1. 分析するタンパク質溶液と 2×サンプルバッファーを1:1で混合する
  2. 95℃で5分間加熱した後、氷上に置く

⑦泳動槽へゲルをセット

  1. シールガスケット、クリップ、コームを外す
  2. 泳動槽へゲルをセットする
  3. 泳動バッファーを注ぐ
ポイント!画像 泳動の乱れを防止するために,ゲル板の下の気泡をしっかり除去すること。

⑧電気泳動

タンパク質分子量マーカー,調製した試料をアプライし,泳動スタート。

ポイント!画像 ・アプライする直前にウェルをピペッターなどで軽く洗浄し,ゲルの破片などの泳動の妨げとなるものを取り除く。
・ゲルの両端のレーンは泳動が乱れやすいのでなるべく使用しない。

オススメ!  
分離がワイドレンジになるSDS-PAGE用泳動バッファー
AllView PAGE Buffer® (#DS520)
いつもの泳動バッファーをAllViewに替えるだけ。自作ゲルでグラジエントゲルのような泳動が可能。


⑨バンドの確認

CBB染色や銀染色によりバンドを確認する。またはウエスタンブロッティングなどの次の実験に進む。

オススメ!  
CBB染色の時間を短縮したい,酢酸の刺激臭が苦手という方はこちら!
酢酸・アルコールフリー,短時間かつ高感度にCBB染色できるQuickBlue Staining Solution (#DS500)


Tris-Tricine SDS-PAGE

(クリックで開閉します)

準備する試薬

<ポリアクリルアミドゲル>

  • 49.5% アクリルアミド/ビス溶液(C:3% ):冷暗所保存
  • 3 M Tris-HCl(pH 8.45), 0.3% SDS
  • 10% APS(ammonium persulfate:過硫酸アンモニウム)
  • TEMED(N,N,N’,N’-tetramethyl ethylenediamine)

<泳動バッファー>

  • 陽極側バッファー:0.1 M Tris-HCl(pH 8.9)
  • 陰極側バッファー:0.1 M Tris, 0.1 M Tricine, 0.1 M SDS

<4×サンプルバッファー>

  • 150 mM Tris-HCl(pH7.0), 12% SDS, 6% 2-mercaptoethanol(もしくは400 mM DTT), 30% Glycerol, 0.05% CBB

試薬の調製

49.5% アクリルアミド/ビス溶液(C:5%):冷暗所保存 アクリルアミド:48 g
※アクリルアミドの取り扱いには十分に注意すること。
N,N’- メチレンビスアクリルアミド:1.5 g
超純水に溶解し,100 mlとする
この溶液を0.22~0.45μmのフィルターで吸引ろ過する
3 M Tris-HCl(pH8.45), 0.3% SDS トリスヒドロキシメチルアミノメタン(Tris):36.4 g
SDS(sodium dodecyl sulfate):0.3 g(0.3%)
超純水に溶解,塩酸(HCl)でpH 8.45に調製し,100 mlとする
10% APS(ammonium persulfate):用事調製 APS(ammonium persulfate):0.1 g
超純水1 mlに溶解する
10×陽極側バッファー
使用時は超純水で10倍希釈する
トリスヒドロキシメチルアミノメタン(Tris):121.14 g
超純水に溶解,塩酸(HCl)でpH 8.9に調製し,1 Lとする
10×陰極側バッファー
使用時は超純水で10倍希釈する
トリスヒドロキシメチルアミノメタン(Tris):121.14 g
Tricine:179.17 g
SDS(sodium dodecyl sulfate):10 g
超純水に溶解し,1 Lとする(pH 調整は不要)
4×サンプルバッファー
ストック溶液は分注して-80℃で保存する
0.5 M Tris-HCl(pH 7.0):3 ml
SDS(sodium dodecyl sulfate):1.2 g
グリセロール: 3 ml
2-メルカプエタノール:0.6 ml(もしくはDTT 0.6 g )
1% CBB溶液:0.5 ml
超純水で溶解し,10 mlとする

手順

①プレートの組み立て

ポイント!画像 プレート,コーム,シールガスケットは70% エタノールで清拭してから組み立てる。
汚れているとゲルがうまく固まらず,綺麗な泳動像が得られない。

②分離ゲル溶液の調製

表3.分離ゲル溶液の調製(ミニゲル2枚の場合)

分離ゲル濃度 16.5%
超純水 7.6 ml
3 M Tris-HCl(pH8.45), 0.3% SDS 10
49.5% アクリルアミド/ビス溶液 10
グリセロール 2.4
TEMED 0.01
(10μl)
10% APS 0.1


③分離ゲルの重合(1時間以上)

  1. 調製した分離ゲル溶液をプレートに注ぐ
  2. 注いだ分離ゲル溶液の上に蒸留水を静かに重層する
  3. ゲルが固まるまで静置する
ポイント!画像 分離ゲル濃度が高い場合は,蒸留水ではなく,1-ブタノールを重層すると綺麗な境界面が得られる。

④濃縮ゲル溶液の調製(ミニゲル2枚の場合)

泡立たないように注意しながらゲル溶液を混合する。

表4.濃縮ゲル溶液の調製(ミニゲル2枚の場合)

濃縮ゲル濃度 4%
超純水 8 ml
3 M Tris-HCl(pH8.45), 0.3% SDS 3
49.5% アクリルアミド/ビス溶液 1
10% SDS 0.06
TEMED 0.009
(9μl)
10% APS 0.09


⑤濃縮ゲルの重合(1時間以上)

  1. 重層した蒸留水またはを1-ブタノールを取り除く
  2. 調製した濃縮ゲル溶液を注ぐ
  3. 空気が入らないように注意しながらコームを挿し込む
  4. ゲルが固まるまで静置する

⑥試料の調製

  1. 分析するタンパク質溶液と 4×サンプルバッファーを3:1で混合する。
  2. 95℃で5分間加熱*1した後,氷上に置く

*1 SDS存在下において加熱すると凝集するタンパク質は,40℃で30~60分とする。


⑦泳動槽へゲルをセット

  1. シールガスケット、クリップ、コームを外す
  2. 泳動槽へゲルをセットする
  3. 泳動バッファーを注ぐ*2

*2 下部バッファー槽に陽極側バッファーを,上部バッファー槽には陰極バッファーをそれぞれ注ぐ。

ポイント!画像 泳動の乱れを防止するために,ゲル板の下の気泡をしっかり除去すること。

⑧電気泳動

タンパク質分子量マーカー,調製した試料をアプライし,泳動スタート。

ポイント!画像 ・アプライする直前にウェルをピペッターなどで軽く洗浄し,ゲルの破片などの泳動の妨げとなるものを取り除く。
・ゲルの両端のレーンは泳動が乱れやすいのでなるべく使用しない。

⑨バンドの確認

CBB染色や銀染色によりバンドを確認する。またはウエスタンブロッティングなどの次の実験に進む。

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[在庫・価格 :2021年11月30日 08時51分現在]

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Protein MultiColor, Stable II, DynaMarker
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キャンペーン期間 2021/11/15 ~ 2022/02/28
説明文
4℃で長期保存可能な,5色で着色済みのタンパク質分子量ラダーマーカー(Prestain Protein Ladder Marker)。分子量範囲は230 kDa, 141 kDa, 100 kDa, 71 kDa, 45 kDa, 30 kDa, 25 kDa, 17 kDa, 8.4 kDa。ミニゲル約120レーン分。
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年9月1日号 p.22

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説明文
4℃で長期保存可能な,5色で着色済みのタンパク質分子量ラダーマーカー(Prestain Protein Ladder Marker)。分子量範囲は230 kDa, 141 kDa, 100 kDa, 71 kDa, 45 kDa, 30 kDa, 25 kDa, 17 kDa, 8.4 kDa。ミニゲル約600レーン分。
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4℃で長期保存可能な,4色で着色済みのタンパク質低分子量用ラダーマーカー(Prestain Protein Ladder Marker)。分子量範囲は,47 kDa,31 kDa,22 kDa,17 kDa,8.8 kDa,3.8 kDa,1.7 kDa。ミニゲル約40レーン分。
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