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クオンテスト CRP ELISA キット

掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:80952

クオンテスト CRP ELISA キットは、ヒト試料中に含まれるCRP ( C-reactive protein )を、サンドイッチ法により比色定量するELISAキットです。

クオンテスト CRP ELISA キット外観

CRP ( C-reactive protein ) とは

CRP ( C-reactive protein ) は肺炎双球菌の細胞壁から抽出されたC多糖体と沈降反応を起こす血清蛋白である。急性炎症では発病後10時間以内に上昇することが知られている。また、CRPは同様な非特異的炎症反応である赤沈と比較して、貧血、高グロブリン血症、DIC、妊娠などの影響を受けないので、このような病態における炎症反応の判定に有用である。

近年、動脈硬化は慢性に経過する血管組織の炎症で、動脈硬化巣に浸潤した炎症性細胞から分泌される炎症性サイトカインによりCRPが肝臓で産生され微増することが知られており、さらにその濃度は血管内皮の機能障害の程度と相関し、その微増が狭心症や心筋梗塞を起こす危険因子として注目されている ( Ridker, 2001 )。


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測定原理

本キットは抗CRPモノクローナル抗体を用いたサンドイッチELISA法 ( Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay ) キットです。

  1. 抗体固相化プレート上の抗CRP捕捉抗体と試料中の抗原(CRP)を反応させる。
  2. 反応後、試料を洗浄操作により除去する。
  3. 捕捉抗体に結合した抗原とHRP (Horseradish peroxidase) 標識抗CRP抗体を反応させる。
  4. 余剰のHRP標識抗CRP抗体を洗浄操作により除去する。発色基質を加え、吸光度を測定し、検量線よりCRP濃度を求める。
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試料前処理

  • 血清・血漿:測定試料を5,000 − 25,000倍程度に希釈してください。

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操作方法

(1). 抗体固相化プレートを洗浄する。WB 300μL/ウェル×3回。
(2). 洗浄済みのプレート(1)にDiluent、各検量線試料、測定試料を 100μL/ウェル 分注する。 (2)洗浄済みのプレート(1)にDiluent、各検量線試料、測定試料を 100μL/ウェル 分注する。
(3). (2)のプレートにプレートシールを貼り、室温で1時間反応させる。 (3). (2)のプレートにプレートシールを貼り、室温で1時間反応させる。
(4). (3)のプレートの反応液を捨て、洗浄する。WB 300μL/ウェル×3回。
(5). 洗浄後のプレート(4)に、WR 100μL/ウェルを添加する。 (5). 洗浄後のプレート(4)に、WR 100μL/ウェルを添加する。
(6). (5)のプレートにプレートシールを貼り、室温で1時間反応させる。 (6). (5)のプレートにプレートシールを貼り、室温で1時間反応させる。
(7). (6)のプレートの反応液を捨て、洗浄する。WB 300μL/ウェル×3回。
(8). R-2 100μL/ウェルを、洗浄後のプレート(7)に添加する。 (8). R-2 100μL/ウェルを、洗浄後のプレート(7)に添加する。
(9). (8)のプレートを、マイクロプレートシェーカーなどで振とうし、遮光して室温で30分間反応させる。 (9). (8)のプレートを、マイクロプレートシェーカーなどで振とうし、遮光して室温で30分間反応させる。
(10). R-3 100μL/ウェルを、(9)のプレートに添加する。 (10). R-3 100μL/ウェルを、(9)のプレートに添加する。
(11). 450nmの吸光度を測定する。 (11). 450nmの吸光度を測定する。
(12). 測定値の算出
①検量線試料のCRP濃度に対する吸光度をプロットし、検量線を作成する。
②検量線より試料中のCRP濃度を読み取る。
(12). 測定値の算出<br/>①検量線試料のCRP濃度に対する吸光度をプロットし、検量線を作成する。<br/>②検量線より試料中のCRP濃度を読み取る。

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仕様

測定因子CRP ( C-reactive protein )
測定試料血清・血漿
測定波長450 nm
測定範囲0.0625 − 10 ng/mL
交差性Human
試料量5,000 − 25,000 倍希釈したサンプル100μL
同時再現性C.V. 15% 以下
法規制 (毒物及び劇物取締法)該当なし

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参考文献

  1. 金井正光, 臨床検査法提要, 改訂 33 版, 金原出版 (2010) : 419-422
  2. Ridker, Paul M. “High-sensitivity C-reactive protein.”Circulation 103.13 (2001): 1813-1818.

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価格

[在庫・価格 :2024年04月20日 13時55分現在]

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CRP ELISA キット 96測定用
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CRP ELISA キット 96測定用

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  • 商品コード:C-CP01Q
  • メーカー:AKJ
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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