Peprotech社 サイトカイン製品に関するFAQ

※ Peprotech社サイトカイン、ケモカイン、成長因子、抗体、ELISAキット、および細胞培養培地関連製品については、こちら「PeproTech社サイトカイン／抗体／ELISAキット製品特集」をご覧下さい。

Q-1. 組換え体タンパク質の安定性について教えて下さい。

A-1. 製品に添付されるCoA（Certificate of Analysis）に特に記載がない限り、Peprotech社の製品はすべて凍結乾燥品です。室温で非常に安定ですが、－20～－80℃での保存を推奨します。水溶液を加えて溶解した後、ほとんどの製品は4℃で短期間の保存を推奨しています。長期保存の際は、キャリアタンパク質（例：0.1％ BSA）を添加して、用途に合わせて分注し、－20～－80℃で凍結保存して下さい。凍結／融解はタンパク質変性の原因となりますのでご注意下さい。

Q-2. 製品のエンドトキシンレベルはどのくらいですか？

A-2. Peprotech社のアニマルフリー製品（商品コードが「AF」で始まる製品）では、エンドトキシンレベルは＜0.01 ng/μg of protein、または＜0.1 EU/μgを保証しています。アニマルフリー以外の製品では＜0.1 ng/μg of protein、または＜1 EU/μgを保証しています。実際の測定では多くの製品がさらに低いエンドトキシンレベルを示しています。詳細については当社テクニカルサポート（試薬担当）へお問い合わせ下さい。

Q-3. バイアル中のタンパク質が確認できないのはなぜですか？

A-3. 市販されている多くのタンパク質製品とは異なり、Peprotech社製品にはキャリアタンパク質や添加剤（BSA、HAS、ショ糖など）は含まれておらず、塩濃度も最低限に抑えて凍結乾燥を行っています。その結果、少量のタンパク質は凍結乾燥により、薄く目に見えないフィルム状になってバイアル中に存在する場合があります。開封前にバイアルを20～30秒間遠心分離し、キャップやバイアル内壁に付着したタンパク質を回収することをお勧めします。Peprotech社では、数々の品質管理方法によって、各バイアルに適正量の製品が含まれていることを保証しています。

Q-4. 比活性を示す「ED50」と「units/mg」の関連性は何ですか？

A-4. ED50は、活性が最大反応の50％のサイトカイン濃度として定義されます。この定義はそのサイトカインの用量反応曲線がシグモイド曲線を描く場合にのみ使用されます。ED50（ng/ml）をunits/mgに換算する式は以下を参照して下さい。

Q-5. どのようなサイトカインが種交差性を示しますか？

A-5. いくつかの例外はありますが、ほとんどのヒトサイトカインはマウス細胞において活性を示します。多くのマウスサイトカインもヒト細胞において活性を示しますが、ヒトサイトカインよりも比活性が低い場合があります。一方、IL-7など一部のヒトサイトカインは、マウスの細胞において、マウスサイトカインよりも高い活性を示します。インターフェロン、GM-CSF、IL-3、IL-4などは種特異性が高いことが知られています。一方、FGF、Neurotrophinは高度に保存されており、他動物種細胞に対しても高い活性を示します。

Q-6. 比活性と国際単位の間にはどのような関係がありますか？

A-6. 比活性と国際単位（IU）値の間に直接の相関関係や換算する計算式はありません。国際単位（IU）は、世界保健機関（WHO）による国際共同研究で認められている手順に基づいて規定される生物学的活性の単位（IU / ngなど）です。
WHO標準品は、国立生物学標準管理研究所（NIBSC）から提供されています。WHO標準品は異なるソースから得られた物質の活性を簡便に比較することを目的としていますが、比較方法が異なれば、得られるIU値が異なる場合があります。

Q-7. PeproTech社組換え体タンパク質についてどのようにして国際単位を決定していますか？

A-7. 可能な場合、WHO標準品と複数回の生物学的活性比較試験を行い、国際単位（IU）値を取得します。比較試験を複数回実行することで、製品、取り扱い、アッセイプロトコルなどの変動要因に起因する外れ値が説明できるようになり、信頼できる活性値を提供できます。