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タンパク質末端にタグを付加し選択的に蛍光標識できるキット Site-Specific Protein Labeling Kit

掲載日情報:2013/05/23 現在Webページ番号:7689

タンパク質のC末端またはN末端にタグを付加し、選択的に蛍光標識できるキットです。キットに含まれるベクターに目的タンパク質配列を挿入してタグを付加し、標識を行うタンパク質を発現させます。C末端とN末端を、フルオレセインおよびクマリンで二重標識できる製品もあります。

特  長

  • タンパク質のN末端やC末端にタグを付加して反応させるため、様々なタンパク質のC末端またはN末端を蛍光標識できます。
  • 標識効率が高く、操作が簡便です。
  • 1キット当たり5 mgのタンパク質の標識が可能です。
  • 位置選択的なタンパク質修飾は非常に需要が高く、本製品で蛍光標識されたタンパク質は、構造、リフォールディング、相互作用などの解析などを行う際に有用です。
  • 標識された蛍光色素の測定波長:励起440 nm/蛍光475 nm(クマリン)
    励起:495 nm/蛍光520 nm(フルオレセイン)

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キットの種類

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C末端標識用キット(#FP-301-COU)

タンパク質のC末端にタグを付加し、oxyamine-ketone結合を利用して、緩和な条件下でケト-クマリンと結合させます。

タンパク質末端を選択的に蛍光標識できるキット Site-Specific Protein Labeling Kit

タンパク質C末端の標識原理

タンパク質のチオエステル基がBisoxamineに置換された後、ケト-クマリンと速やかに反応する。

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N末端標識用キット(#FP-302-COU)

タンパク質のN末端にシステイン残基を含むタグを付加し、MPAAを利用したnative chemical ligation(NCL)法により、クマリン-チオエステルと結合させます。

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C / N末端標識用キット(#FP-303-FLU)

上記と同様の方法で、タンパク質のC末端をケト-フルオレセインで、N末端をクマリン-チオエステルで二重標識します。標識したタンパク質は、FRET(Fluorescence resonance energy transfer)アッセイに有用です。

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参考文献

1. Yi, L., et al., Angewandte Chemie Int. Ed., 49, 1~6 (2010).
2. Yi, L., et al., Angewandte Chemie Int. Ed., 50, 8287~8290 (2011).

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キット内容

キット構成品 #FP-301-COU #FP-302-COU #FP-303-FLU
Bisoxyamine
Keto-coumarin
MPAA:(4-carboxymethyl) thiophenol
Coumarin-thioester
Keto-fluorescein
Aniline
MESNA:Sodium 2-mercaptoethanesulfonate
pET Vector
pTWIN Vector
TEV protease
タンパク質末端を選択的に蛍光標識できるキット Site-Specific Protein Labeling Kit

各試薬の構造

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(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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