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喘息、腫瘍研究に有用です！ sPLA2 (Type X) Inhibitor Screening Assay Kit

掲載日情報：2026/08/06 現在Webページ番号：73648

ケイマン ケミカル /
Cayman Chemical Company
[メーカー略称：CAY]

ヒトsPLA2（Type X）に対する阻害活性を簡便に定量測定するアッセイキットです。sPLA2（Type X）は、ホスファチジルエタノールアミンおよびホスファチジルコリンのsn-2位を加水分解するホスホリパーゼです。ヒトsPLA2（Type X）に対する新規阻害物質の同定や阻害効果の評価は、がんおよび喘息の治療研究に有用です。

※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。


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sPLA2（Type X）とは

X型分泌性ホスホリパーゼA2（Secretory phospholipase A2、sPLA2（Type X）、sPLA2-X）は、ヒトではPLA2G10によってコードされる、カルシウム依存性PLA2スーパーファミリーのメンバーです。sPLA2（Type X）は、脾臓、胸腺、膵臓、肺、結腸のほか、末梢血白血球、好中球、ケラチノサイトで発現することが知られています。活性化されると、sPLA2（Type X）は細胞外に分泌され、パラクラインまたはオートクラインで作用します。また、ホスファチジルセリンよりもホスファチジルエタノールアミンおよびホスファチジルコリンを優先的に、sn-2位で加水分解し、遊離脂肪酸およびリゾリン脂質を遊離します。これらは、生理活性脂質代謝物の合成基質となります。
sPLA2（Type X）は、リンパ腫由来の細胞外小胞（EV）を加水分解し、そのサイズと形態を変化させることで、マクロファージによる取り込みを増加させるとともに、EVから分泌される脂質メディエーターの量を増加させます。sPLA2（Type X）の阻害は、Epstein-Barrウイルス誘導性B細胞リンパ腫のマウスモデルにおいてリンパ腫の増殖を抑制します。また、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫（DLBCL）患者では、マクロファージ中のsPLA2（Type X）レベルが生存率と負の相関を示します。さらに、非小細胞肺がん（NSCLC）患者では、血清エクソソーム中のsPLA2（Type X）タンパク質レベルが上昇しています。喘息患者では、喀痰中のsPLA2（Type X）レベルに加え、気管支マクロファージおよび円柱上皮細胞におけるsPLA2（Type X）レベルも上昇しています。これらのデータに基づき、sPLA2（Type X）はNSCLCの診断および予後予測バイオマーカーとなる可能性があり、またsPLA2（Type X）の阻害は、がんおよび喘息に対する治療戦略となる可能性があります。


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特長

  • 検出方法：比色
  • 検出の種別：定量
  • 測定波長：410 nm
  • フォーマット：384-well plate
  • Z´ Factor：0.91

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測定原理

本キットでは、1,2-diheptanoyl-sn-glycero-3-PC（di-C7-PC）の硫黄含有アナログを基質として使用します。sPLA2（Type X）によるsn-2位の加水分解で生じた遊離チオールをsPLA2 assay probeで検出し、410 nmの吸光度を測定することで酵素活性を定量します。


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測定例

sPLA2 Control Inhibitorによる組換えヒトsPLA2（Type X）の阻害

Inhibition of recombinant human sPLA2-Type X by sPLA2 Control Inhibitor

溶媒対照（Veh.）における活性を初期活性の100%とする。キット構成品のsPLA2 control inhibitor（LY315920／varespladib）のIC50値は11 nMであった。

各種有機溶媒がsPLA2（Type X）活性の測定値に及ぼす影響

The effect of solvent on the readout of sPLA2-X activity

DMF、DMSO、または短鎖アルコール（MeOH、EtOH）の濃度を変化させ、各溶媒がsPLA2（Type X）活性の測定シグナルに及ぼす影響を評価した。通常の測定条件では、阻害物質を溶解した希釈溶媒のアッセイにおける終濃度は2.9％となる。有機溶媒の濃度を段階的に変化させたところ、溶媒濃度の上昇に伴ってシグナルが変化する可能性が示されたため、適切な溶媒対照をアッセイに含める必要がある。点線は、sPLA2 Assay Buffer（1X）中でのsPLA2（Type X）活性を示す。


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キット内容

  • sPLA2 assay buffer
  • sPLA2 (Type X) substrate resuspension buffer
  • sPLA2 (Type X) substrate
  • sPLA2 assay probe
  • sPLA2 (Type X) enzyme (human, recombinant)
  • sPLA2 control inhibitor
  • 384-Well clear bottom black plate

※ 測定にはマイクロプレートリーダーが別途必要です。



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Anti-sPLA2 (human Type X), Rabbit-Poly
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Inhibitor

品名 化学式 CAS No. 商品コード
LY315920 C21H20N2O5 172732-68-2 18267
LY433771 C22H24N2O4 220862-64-6 35406


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お問い合わせ先

（テクニカルサポート 試薬担当）

reagent@funakoshi.co.jp

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