組織切片上でタンパク質の相互作用・修飾をダイレクトに検出します PLA(Proximity Ligation Assay)受託サービス
掲載日情報:2026/07/13 現在Webページ番号:73519
PLA(Proximity Ligation Assay)受託サービスは、タンパク質の相互作用・修飾を組織切片上で直接検出するサービスです。
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PLAとは
PLA(Proximity Ligation Assay)は、タンパク質間相互作用や翻訳後修飾を1分子レベルの感度で検出する解析法です。
・従来のIHC(免疫染色)では不可能だった「40 nm以内の近接」をシグナル化します。
・タンパク質同士の結合やリン酸化などの修飾状態を、組織形態を維持したままドットとして可視化します。
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PLAの原理
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目的に応じた2つのアプローチ法
本サービスでは、検証済みキットを用いた方法と、カスタム条件検討による方法の2つのアプローチ法があります。ご研究の目的や使用抗体、試料の種類に応じて、適した方法をご提案します。詳細は、当社受託・特注品担当までお問い合わせ下さい。
| アプローチ法 | 概要 |
|---|---|
| 検証済みキット | Navinci社NaveniBright PD1/PD-L1(#60033)を用いて解析を行います。条件検討にかかる時間を短縮でき、コストも抑えられます。 |
| カスタム条件検討 | お客様独自のターゲットに対し、抗体選定、条件最適化から試料の染色までをフルサポートします。 |
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使用例
正常な上皮構造では、細胞接着分子であるE-cadherinとシグナル伝達因子であるβ-cateninは複合体を形成しており、細胞膜上で両分子が機能的に近接している様子が、明瞭なドットとして検出されています。がんの浸潤・転移の指標であるEMT(上皮間葉転換)の初期段階では、この細胞膜上の複合体が崩壊し、フリーになったβ-cateninが核内へ移行します。PLAを用いることで細胞膜上の複合体を明瞭に検出できるため、がんの分化の評価や、EMTを抑制する薬剤のスクリーニング・薬効評価において有用なデータを取得できます。
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PLAと従来法の比較
| 比較項目 | PLA(本サービス) | 共免疫沈降(Co-IP) | FRET/BRET | 免疫染色(IHC/IF) |
|---|---|---|---|---|
| 主な検出対象 | 近接・直接結合 | タンパク質複合体 | 分子間距離(1~10 nm) | タンパク質の発現・局在 |
| 空間情報 | あり(1細胞レベル) | なし(細胞を破壊) | あり(生細胞も可) | あり |
| 感度・S/N比 | 極めて高い(RCA増幅) | 中程度 | 低い(背景光の影響大) | 抗体の性能に依存 |
| 試料形態 | 組織(FFPE可)・細胞 | 培養細胞・生検組織 | 生細胞(主に培養細胞) | 組織(FFPE可)・細胞 |
| 解析の簡便さ | 普通(一次抗体があれば可) | 普通 | 難しい(ベクター構築など) | 簡便 |
| 最大のメリット | 機能的な複合体形成や修飾状態をドットとして可視化できる。 | 結合定数や未知の複合体を網羅的に解析できる。 | 生細胞内での動的な距離変化をリアルタイムに観察できる。 | 組織全体における分布やおおまかな共局在を手軽に確認できる。 |
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参考文献
PLAの活用事例として、以下の論文が報告されています。
シグナル伝達の可視化
がん治療の標的であるERK5の核内移行メカニズムにおいて、特定の刺激(EGF)に応答したERK5とImportin β1の物理的近接をPLAにより細胞内で検出し、相互作用の動的な変化を定量的に示した。
Lombardi, Z., et al., Mol. Oncol., 19(1), 99-113(2025). [PMID:38965815]
免疫チェックポイント阻害剤の奏効予測
非小細胞肺がんにおけるICI治療において、FFPE組織内でのPD1とPD-L1の近接をPLAで検出し、従来のPD-L1発現量評価(TPS)と比較して、治療効果の層別化や予後予測に有用であることが示された。
Lindberg, A., et al., J. Thorac. Oncol., 20(5), 625-640(2025). [PMID:39743139]
神経変性メカニズムの解明
パーキンソン病に関与するLRRK2による活性酸素種(ROS)産生制御の解析において、PLAを用いてロテノン刺激に応答したLRRK2とp47phoxの近接を細胞内や脳組織で検出し、NOX2活性化の動的な変化を定量的に示した。
Keeney, M. T., et al., Sci. Transl. Med., 16(767), eadl3438(2024). [PMID:39356746]
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サービスの流れ
- 染色結果の評価や画像解析については、お客様の研究目的に合わせ、最適な手法をコンサルティングいたします。
- 解析の可否や実施方法を含め、まずは一度お気軽にご相談下さい。
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ご注文方法/価格
ご依頼の内容に応じてお見積りいたします。詳細は、当社受託・特注品担当までお問い合わせ下さい。
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