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細胞ライセート中のカスパーゼ-3/7活性測定キット Caspase-3/7 Cell-Based Activity Assay Kit

掲載日情報:2026/01/15 現在Webページ番号:73009

カスパーゼ-3およびカスパーゼ-7に特異的な基質を用いて、細胞ライセート中のカスパーゼ-3/7活性を蛍光により簡便に測定するキットです。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

カスパーゼ-3/7(Caspase-3/7)について

カスパーゼはアスパラギン酸特異的システインプロテアーゼファミリーに属し、アポトーシスと炎症の主要なメディエーターであると同時にパイロトーシス、ネクロトーシス、オートファジーにおいても役割を担います1~4。アポトーシスに関与するカスパーゼは、イニシエーター・カスパーゼ(Caspase-2、8、9)とエフェクター・カスパーゼ(caspase-3、6、7)に分類されています。
すべてのカスパーゼの前駆体は、切断後にカスパーゼが活性化されるプロドメインと、活性酵素を形成するために四量体を形成する大小の触媒サブユニットで構成されています。カスパーゼ-3および-7は普遍的に発現しており、カスパーゼ-8または-9による切断、あるいはグランザイムB経路を介して、それぞれ外因性または内因性のアポトーシス経路を通じて活性化されます5~7。カスパーゼ-3および-7の典型的な基質切断部位はAsp-Glu-Val-Asp(DEVD)で、2つ目のアスパラギン酸残基の後ろで切断されます1。これらのカスパーゼは、ポリ(ADP-リボース)ポリメラーゼ(PARP)、DNAプロテインキナーゼ(DNA-PK)、成長停止特異的タンパク質2(GAS2)、プロカスパーゼ-6など、複数の基質に作用します1。これらのカスパーゼの活性化はアポトーシスカスケードの機能的終点であり、アポトーシスのマーカーとして用いられます7~9。カスパーゼ-3および-7は、がん、心不全、神経変性疾患など複数の疾患における治療標的です。

参考文献

  1. Cohen, G.M., Biochem. J. , 326(Pt 1), 1-16(1997). [PMID:9337844]
  2. Mcllwain, D.R., et al., Cold Spring Harb. Perspect. Biol., 5(4), a008656(2013). [PMID:23545416]
  3. Sun, G., Semin. Cell Dev. Biol., 156, 66-73(2024). [PMID:37468421]
  4. Sahoo, G., et al., Mol. Neurobiol., 60(10), 5805-5837(2023). [PMID:37349620]
  5. Fernandes-Alnemri, T., et al., J. Biol. Chem., 269(49), 30761-30764(1994). [PMID:7983002]
  6. Juan, T.S., et al., Genomics, 40(1), 86-93(1997). [PMID:9070923]
  7. Ghavami, S., et al., J. Med. Genet., 46(8), 497-510(2009). [PMID:19505876]
  8. Yang, B., et al., Expert Opin. Ther. Targets, 17(3), 255-263(2013). [PMID:23294432]
  9. Hartmann, A., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 97(6), 2875-2880(2000). [PMID:10688892]

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特長

  • 細胞ライセート中のカスパーゼ-3/7活性を簡便に測定するキットです。
  • カスパーゼ-3/7に特異的な基質(N-Ac-DEVD-AFC)が活性カスパーゼ-3/7により分解される際に生じる蛍光を測定します。
  • 活性化カスパーゼ-3がポジティブコントロールとしてキット含まれています。
  • カスパーゼ-3/7阻害物質(N-Ac-DEVD-CHO)が、酵素活性に対する蛍光シグナルの特異性確認用のコントロールとしてキットに含まれています。
  • 測定波長:励起400 nm/蛍光505 nm

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使用例

>Jurkat細胞におけるcaspase-3/7の活性測定
活性型caspase-3を用いた陽性対照実験

図. Jurkat細胞におけるカスパーゼ-3/7の活性測定

(A)Jurkat細胞(2.5×105/well)にアポトーシス誘導物質のスタウロスポリン(5 μM)を加えて、37℃で3時間培養後、細胞ライセートを用いて本キットでカスパーゼ-3/7の活性化を測定した。
(B)ポジティブコントロール(活性型カスパーゼ-3)は、カスパーゼ-3/7阻害物質(N-Ac-DEVD-CHO)によって活性が阻害された。


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キット内容

  • Caspase-3/7 inhibitor (N-Ac-DEVD-CHO)
  • Caspase-3/7 substrate (Ac-DEVD-AFC)
  • Active caspase-3 positive control
  • DTT assay reagent
  • Cell-based assay buffer tablet
  • Cell-based assay lysis buffer
  • Staurosporine (apoptosis inducer)
  • 96-well solid plate (black)
  • Foil plate cover

測定には蛍光プレートリーダーが別途必要です


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価格

[在庫・価格 :2026年01月19日 18時35分現在]

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Caspase-3/7 Cell-Based Activity Assay Kit
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Caspase-3/7 Cell-Based Activity Assay Kit

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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