コドン/UTRの最適化からLNP封入まで一括対応します 自己増幅型RNA(saRNA)のカスタム設計・改変合成受託サービス
掲載日情報:2025/11/21 現在Webページ番号:72581
GenScript社は、自己増幅型RNA(saRNA)のカスタム設計から改変合成までを対応する受託サービスを提供しています。saRNAは自己増殖機構により、通常のmRNAに比べ少ない量でタンパク質が高発現し、長期に持続します。用途に応じて免疫応答の活性化が期待でき、ベクター選択による免疫原性の調整も可能です。
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自己増幅型RNA(saRNA)とは
レプリカーゼをコードし、細胞内で元のRNA鎖を複製するmRNAの一種です。saRNAは直鎖状の一本鎖RNAで、5'cap、3'polyA tail、5'と3'の非翻訳領域(UTR)を持つなど、通常のmRNAと多くの構造的類似点がありますが、通常のmRNAとは異なり、低用量で副作用が少なく、ワクチンの効果を長期間持続させる有望なツールとして期待されています。
saRNAの作用機序
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特長
- 免疫応答研究からin vivo CAR療法まで幅広く対応可能な、次世代saRNAです。
- in vitroおよびin vivoの発現プロファイルに最適化されています。
- 少量で、強力かつ持続的な発現を実現します。
- 多様な用途に応じて、免疫原性の異なるベクターを選択できます。
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使用例
LNPトランスフェクションを用いたHEK293T細胞におけるsaRNAの高発現
100 ngのGS-saRNA-1、GS-saRNA-2 Vectorを用いて作製したGenScript社のeGFP saRNA(未修飾)と、他社のeGFP saRNAを、Lipofectamine MessengerMAX(Thermo Fisher Scientific社)を用いてHEK293T細胞にトランスフェクションした。トランスフェクションの24時間後と48時間後にeGFP発現を蛍光顕微鏡で観察し、マイクロプレートリーダーで解析した。
saRNAは直鎖状RNAや環状RNAに比べて高発現を示す
GenScript社が設計したGluc saRNAは他社が設計したものより高発現を示した
GS-saGluc(GenScript社がGS-saRNA-1 Vectorを用いて調製したもの。5-メチルシトシン修飾済み)と、他社が設計したsaGluc(Client)の発現を比較した。その結果、GS-saGLucは他社が設計したsaGLucよりも高い初期発現と持続発現(10倍以上)を示した。
左:トランスフェクション後、12、24、48、96、144時間におけるルシフェラーゼ活性。
右:他社がデザインしたsaRNAに対するGlucの発現比(Fold change)。
GenScript社のsaRNAは、他社の最適化されていないsaeGFPと比較して、より高い純度と細胞発現、より低い免疫原性を示した
左:Agilent 5200キャピラリー電気泳動で検出したGenScript社と他社のsaRNAの完全性。
中央:100 ngのGS-saRNA-1、GS-saRNA-2 Vectorを用いて作製したGenScript社のeGFP saRNA(未修飾)と、他社のeGFP saRNAを、Lipofectamine MessengerMAX(Thermo Fisher Scientific社)を用いてHEK293T細胞にトランスフェクションした。トランスフェクションの24時間後と48時間後にeGFP発現を蛍光顕微鏡で観察し、マイクロプレートリーダーで解析した。
右:異なるeGFP saRNAをトランスフェクションしたA549細胞におけるIL-6レベルをELISAで検出した。
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サービスの流れ
- コドン/UTR最適化
・ あらゆる遺伝子を対象とした、タンパク質発現のためのコドン最適化
・ 200以上の因子をスクリーニングしたコドンの最適化(特許取得済み) - 遺伝子合成
・ 100 bp~6 kbの遺伝子インサートの合成
・ Poly (A) を組み込んだベクターへの遺伝子挿入 - クローニング/プラスミド合成
・ 直ちにIVTに使用できる直鎖化プラスミドDNAを調製
・ ベクターにコードされるPoly(A)領域は安定で、ばらつきはわずか±5~10 nt程度 - saRNA合成
・ 研究用グレードのカスタムsaRNA合成サービス
・ 追加精製と多様なQCオプション - 脂質ナノ粒子(LNP)パッケージ
・ ジェネリックイオン性脂質製剤
・ 1~30 mgのsaRNAをパッケージング
お客様のプロジェクトのニーズを満たすためのカスタムsaRNA合成サービス
- 対応可能なインサート長:100 bp~6 kb
- バッチスケール:100 μg~200 mg
- さまざまな用途に最適化されたベクター
| ベクター名 | 5'Cap構造の種類 | 修飾 | 適用 |
|---|---|---|---|
| GS-saRNA-1 | Cap-AU | m5C or none | 遺伝子補充療法用に設計された低免疫原性ベクター |
| GS-saRNA-2 | Cap-AG | m5C or none | がん免疫療法やワクチン用に設計された高免疫原性ベクター |
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資料
フライヤー
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