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老化細胞の検出に有用です Senescence-Associated β-Galactosidase Staining Kit

掲載日情報:2024/07/16 現在Webページ番号:72212

培養細胞の老化を簡便かつ迅速な方法で検出するキットです。pH6の条件にて本製品の染色液と細胞を37℃でインキュベーションすると、老化細胞ではβ-ガラクトシダーゼ活性によって青色に発色しますが、非老化細胞では発色しません。


細胞老化とは

安定かつ不可逆的に細胞周期が停止しており、アポトーシス抵抗性を持つような細胞の状態を細胞老化と呼びます。細胞老化には複製によるものとストレスによるものの2つの主要経路があり、p53、p21、p16やがん抑制遺伝子のRbに収束・終結するさまざまなシグナル伝達経路を通じて細胞老化を誘導します。
複製による老化は複製が引き起こすテロメア短縮によって開始され、内因性のDNA損傷の一種として認識されています。
酸化ストレス、化学療法、放射性、外傷のような外的あるいは内的ストレスは損傷DNAを蓄積させ、ストレス性の細胞老化を誘導します。
細胞老化のマーカーとしては、細胞増殖の欠如、大きく平たくなる形態変化、成長因子への応答の欠如、細胞老化随伴分泌現象(SASPs)の産生、リソソームのpH依存的酵素のβ-ガラクトシダーゼの発現量増加などが挙げられます。
老化細胞は加齢や肥満とともに増加し、筋ジストロフィー、骨粗鬆症、糖尿病、加齢性白内障、神経変性、動脈硬化などさまざまな疾患の促進に関係しています。
老化の誘導は腫瘍の発生を抑制しますが、腫瘍細胞の老化が持続してSASPsが産生されると、老化から脱出して腫瘍促進が誘導されます。



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測定原理

細胞老化が誘導されると、さまざまな表現型の変化が起こることに加えて、リソソームのpH依存性酵素であるβ-ガラクトシダーゼの発現が増加します。酸性pHで老化細胞をインキュベーションするとβ-ガラクトシダーゼがキットに含まれる無色の基質を切断して不溶性の発色産物が生成し、老化細胞と非老化細胞を視覚的に区別できるようになります。



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使用例

図1. HepG2細胞を用いたβ-ガラクトシダーゼの染色像

図1. HepG2細胞を用いたβ-ガラクトシダーゼの染色像

HepG2細胞を12ウェルプレートに75,000 cells/wellで播種し、PBSまたは500 μM過酸化水素のいずれかとともに1時間インキュベーションし、細胞を洗浄した。5日後、顕微鏡にてβ-ガラクトシダーゼ活性を確認した。


図2. SH-SY5Y細胞を用いたβ-ガラクトシダーゼの染色像

図2. SH-SY5Y細胞を用いたβ-ガラクトシダーゼの染色像

SH-SY5Y細胞を12ウェルプレートに50,000 cells/wellで播種し、溶媒または250 nMドキソルビシンで24時間処理し、細胞を洗浄した。1週間後、顕微鏡にてβ-ガラクトシダーゼ活性を確認した。



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キット内容

  • X-Gal reagent
  • Fixative solution
  • Staining buffer
  • Staining supplement
  • Buffer supplement


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価格

[在庫・価格 :2025年04月25日 20時55分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
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Senescence-Associated β-Galactosidase Staining Kit
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説明文
法規制等 医薬用外劇物
保存条件 -20℃ 法規備考
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Senescence-Associated β-Galactosidase Staining Kit

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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