抗ノロウイルス製品・素材の評価やスクリーニングに ノロウイルス粒子測定キット

（株）プロテックスが独自に開発したELISA法による抗ノロウイルス試験キットです。キットには、ノロウイルス粒子、同粒子を認識する抗体が固相化されたプレート、および検出抗体が含まれており、抗ウイルス製品（消毒剤や除菌シートなど）で処理したノロウイルス粒子をELISA法で測定することにより、抗ウイルス効果を評価できます。本製品は、ネコカリシウイルスなどの代替ウイルスを用いて行われていた従来の培養法による抗ノロウイルス試験とは異なり、簡便、安全（非増殖性・非感染性、カルタヘナ法非該当）かつ短時間で抗ウイルス製品の有効性を評価できます。

※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

被験物質とノロウイルス粒子液（本キット構成品）を混合する。一定時間静置後、抗ウイルス活性を中和する（中和液がELISAに影響がないこと、中和により抗ウイルス活性がなくなることを先にチェックする）。試料を段階希釈してELISA法で測定する。薬剤処理後のOD値と検量線からノロウイルス粒子/mlを求め、対数減少値、減少率を算出する。

200 ppm次亜塩素酸ナトリウム水溶液、70%エタノール溶液、1％クエン酸／70%エタノール溶液、ノロウイルスに対する効果を高めたとされる各社エタノール製剤（下表）のノロウイルス粒子に対する効果を上記の試験概要に従い評価した。
200 ppm次亜塩素酸ナトリウム溶液は、4logの減少値（減少率99.99％）となり、非常に高い抗ウイルス効果を示した。
70％エタノール溶液にクエン酸を1%添加することでノロウイルス粒子の減少率が69%から86%となったことから、抗ウイルス効果が酸性条件下で向上することが示唆された。ノロウイルス粒子に対する抗ウイルス効果を高めたとされる市販品の各社エタノール製剤では、当試験方法で評価を行った場合、抗ウイルス効果にばらつきが見られ、A社、C社製品では減少率が90%、B社製品では88%となり、エタノール溶液単体より高い抗ウイルス効果を示した。一方で、D社製品では、減少率が65%に留まった。

次亜塩素酸ナトリウム溶液およびエタノール溶液の各濃度／処理時間によるノロウイルス粒子に対する効果を上記の試験概要に従い評価した。粒子の減少数を対数減少値に変換して、ヒートマップとして示した（下図A）。図A右下の数値は、対数減少値を示す（例えば、4logは、99.99%の減少率を示す）。また、5分間処理した場合の粒子数の減少値および減少率を図Bに示す。200 ppm次亜塩素酸ナトリウム溶液では添加後5分でノロウイルス粒子の99.99%以上の減少が認められ、エタノール溶液では、70%エタノール溶液添加後5分で、粒子の69%の減少が認められた。

ノロウイルス粒子を、0、200、500 ppmの次亜塩素酸ナトリウム溶液で5分間処理し、処理した試料を透過型電子顕微鏡で観察した（下図A）。同様に処理した試料について、動的光散乱法（DLS）によって測定し、個数による粒径分布を評価した（下図B）。

キット構成品の模擬試料（ノロウイルス粒子）は単品でも販売しています。