抗ノロウイルス製品・素材の評価やスクリーニングに ノロウイルス粒子測定キット

ノンエンベロープウイルスであるノロウイルスは、ウイルス表面がタンパク質の殻（カプシド）で被われています。そのため、脂質性の膜を有するエンベロープウイルスとは異なり、アルコールなどの消毒薬や熱に対する抵抗性が強いと言われます。このカプシドは、内部の遺伝情報を保護し、宿主細胞に侵入するための鍵となる役割を果たしています。ウイルスのカプシドが損傷を受けると、内部の遺伝物質は外部の酵素や化学物質によって分解されたり、宿主細胞への侵入が阻害されることにより、感染力を失います。つまり、ノロウイルスのカプシドの破壊／非破壊は抗ウイルス作用の指標になります。

ヒトノロウイルスについて、株化細胞や実験動物組織で増殖させる方法はこれまで確立されていません。そのため、抗ノロウイルス能評価では、ネコカリシウイルスなどの代替ウイルスを用いた培養法が主流となっています。しかし、ネコカリシウイルスはヒトノロウイルスとは感受性が異なること、培養法ではウイルス宿主細胞の準備や細胞変性に時間が必要であること、多数の検体処理が難しいこと、およびウイルス粒子の個数を測定できない（プラーク法）といった課題がありました（下図）。

また、ノロウイルスの検出法では、培養法とは別にリアルタイムRT-PCRが広く利用されています。しかし、この方法は微量なRNAを検出するために、カプシドが破壊されて感染性を失ったウイルス由来の残存RNAも検出する可能性があります。そのため、活性／不活性ウイルスをリアルタイムRT-PCR法で区別することは困難であり、感染性を有するウイルスを検出する培養法の検査結果とは必ずしも相関しません。

（株）プロテックスでは、ノロウイルスの遺伝情報から外殻（カプシド）のみの遺伝情報を用いて、球形構造の人工ノロウイルスを生産し、ウイルス液の模擬試料として提供しています（下図）。同ウイルス粒子は、遺伝物質（RNA）を除いているため、増殖・感染しません。また、カルタヘナ・BSL非該当なので、一般実験室で使用できます。

本製品は、球形構造の壊れていない人工ノロウイルス粒子と、この粒子を特異的に認識する抗体を固相化したマイクロプレート（96ウェル）を用いて、抗ウイルス製品や素材の有効性の評価を行います。具体的には、固相化された抗体は構造が保たれている人工ノロウイルス粒子のみを認識します。そのため、消毒剤などの抗ウイルス試験において、抗ウイルス材料を作用させることで人工ノロウイルス粒子の構造が壊されると、抗体に認識される粒子量が減少します。この原理に基づき、ELISA法を用いて、抗ウイルス剤の作用前／後の人工ノロウイルス粒子量を定量的に測定することで、人工ノロウイルス粒子の減少量やその活性値などを分析することができます。