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抗体医薬品の体内動態制御研究に有用なFcRn:IgGリサイクルHMEC-1細胞 FcRn:IgG Recycling HMEC-1 Cell Pool(BPS Bioscience社)

掲載日情報:2025/03/25 現在Webページ番号:72109

FCGRT(Fc Gamma Receptor and Transporter、NM_004107.5)とβ2ミクログロブリン(β2M、NM_004048.4)を発現するHMEC-1細胞のプールです。本製品は、CMVプロモーターの制御下にある2A自己切断ペプチド(T2A)によって切断され、レンチウイルスによりHMEC-1細胞に導入されました。ヒト抗体(IgG)の取り込みとリサイクルの測定に有用です(ヒトFcRnは、マウスIgGと結合しません)。

FcRnを介したIgGのリサイクル機構図

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FcRnを介したIgGのリサイクル機構図

FcRnとIgGを結合させるために細胞を酸性下のFcRn Recycling Dilution Buffer(pH 6.0、#82209)内で目的の抗体(IgG)とともにインキュベートする。細胞を洗浄し、24時間後にリサイクリングされたIgGを分析する。リサイクルされたIgGは細胞培養培地中に存在する。細胞内に保持されているIgGは、細胞を溶解し、ELISAまたは他の方法で測定することができる。

胎児性Fc受容体(FcRn)とは

胎児性Fc受容体(Neonatal Fc receptor、FcRn)はヘテロ二量体タンパク質で、25種類以上の組織で発現しており、そのうち脾臓と腸では高レベルの発現が観察されています。また胎盤では母親のIgGを胎児に輸送します。FcRnは、FCGRT(Fc Gamma Receptor and Transporter)遺伝子と、β2-ミクログロブリン(β2-Microglobulin、β2M)で構成されており、IgGのFc領域に結合します。FcRnは、IgGを分解から保護し、リサイクル機構により血中の半減期を維持することで、効果的な体液性免疫に貢献します。IgGに加えて、血清アルブミンの恒常性を調節します。FcRnは、エンドソーム内の酸性下(約pH 6.0)でアルブミンとIgGのFc領域に結合し、血中アルブミンとIgGレベルを調節する上で重要な役割を果たします。FcRn/IgG複合体は、IgGがリソソームに輸送され分解されるのを抑制し、IgGを中性(約pH 7.0~7.4)の細胞外に再度放出(リサイクル)します。

FcRnを消失させることで、腫瘍細胞の増殖に必要なアミノ酸の分解を増加させ、がんに影響を及ぼすことが報告されています。FcRn改良型抗体は、FcRnとの結合性を上昇させて半減期の延長と治療効果の有効性改善します。一例として、Fc変異を導入することで半減期が延長された抗体カクテル(Evusheld)が、COVID-19の治療に使用されています。現在、同様の戦略を利用している他のいくつかの薬剤が臨床段階にあります。FcRnの特性を活用したさらなる研究と薬剤開発により、治療方法の選択肢がさらに広がることが期待されます。

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特長

  • 親株細胞:HMEC-1細胞株(ヒト皮膚微小血管内皮細胞、接着性)
  • Nivolumab、Rituximab、Trastuzumab、抗PCSK9抗体、抗IL-2Ra抗体で検証されています。
  • マイコプラズマ陰性を確認しています。
  • 2 vials(Each vial contains >1×106 cells in 1 ml of 7.5%DMSO and 92.5%FBS)

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適用

  • FcRnを介したリサイクルのプロファイルの決定
  • FcRnを介したIgGリサイクルの阻害物質のスクリーニング

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使用例

FcRnにおけるFCGRTおよびβ2Mの発現の解析

親株のHMEC-1細胞(青色)とFcRn HMEC-1細胞(緑色)抗FcRn抗体または抗β2M抗体で染色し、2つのサブユニットの発現を測定した。Y軸は細胞数、X軸は蛍光体の強度を示す。

FCGRTの発現解析

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FcRn内のFCGRTの発現解析

FCGRTの発現は、Anti-Human FcRn Antibody(R&D Systems #MAB8639)、PE Goat Anti-Mouse IgG(minimal x-reactivity)Antibody(BioLegend社 #405307)で検出した。

β2Mの発現の解析

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FcRn内のβ2Mの発現解析

β2Mの発現は、APC anti-human β2-microglobulin Antibody(BioLegend社 #316312)で染色した。


FcRnにおけるpH依存性抗体リサイクリング

本製品およびHMEC-1親細胞におけるpH依存抗体の解析

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Nivolumab、Rituximab、Trastuzumab、抗PSCK9抗体および抗IL2-Rα抗体をFcRn Recycling Dilution Buffer(pH 6.0、#82209)で40 nMに調製し、細胞に添加した。FcRn Recycling Dilution Bufferが酸性のため、FcRnとIgGの結合が促進された。4時間後、細胞を洗浄し温めたアッセイ培地を加え、細胞を24時間インキュベートした。細胞培養培地を回収し、ELISAで測定した。結果は相対発光単位(RLU)で示した。


FcRn阻害物質を用いたIgGのリサイクル阻害

FcRn阻害物質を用いたIgGのリサイクル阻害

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FcRn Recycling Wash Buffer(#82208)で調製したFcRn(FCGRT/β2M)Blocker(#101468)を細胞に添加した。1時間のインキュベーション後、FcRn BlockerとNivolumab(400 nM)をFcRn Recycling Dilution Buffer(pH 6.0)で、最終濃度の2倍の濃度で調製し添加した。4時間インキュベート後、細胞を洗浄し、さらに24時間インキュベートした。細胞培養培地を回収し、ビオチン標識PD-1タンパク質を用いたELISAによりNivolumabを測定した。ネガティブコントロールとして親株のHMEC-1細胞を用いた。結果は相対発光単位(RLU)で示した。

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別途必要な製品一覧

本製品の細胞培養および本製品を利用した細胞アッセイに、以下の製品のご利用をお勧めします。


専用培地

商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。

品名 メーカー略称 商品コード
Thaw Medium 18 BPS 82205
Growth Medium 18A BPS 82206
Assay Medium 8A BPS 82207
EGF Recombinant BPS 90201


細胞アッセイ用試薬

品名 メーカー略称 商品コード
FcRn Recycling Wash Buffer(pH 7.0~7.4) BPS 82208
FcRn Recycling Dilution Buffer(pH 6) BPS 82209
Human IgG ELISA Kit(Chemiluminescence) BPS 82611
Nivolumab(Anti-PD-1 Antibody)
Rituximab(Anti-CD20 Antibody)
Trastuzumab(Anti-HER2 Antibody)
Anti-Human Proprotein Convertase 9/PCSK9(Alirocumab)MAb(Hu135) RSD MAB10347
Anti-Human CD25/IL-2Rα(Basiliximab)MAb(Clone Hu107) RSD MAB9926
FcRn(FCGRT/β2M) Blocker BPS 101468
EGF Recombinant BPS 90201
PD-1 Human Recombinant, FLAG-Avi-His-tag, Biotin-labeled BPS 71325

細胞アッセイの測定にはELISA(化学発光)に対応したマイクロプレートリーダーが別途必要です。

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関連製品

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品名 メーカー略称 商品コード
Fc(IgG1): FcRn Inhibitor Screening Colorimetric Assay Kit BPS 78501
FcRn, His-Tag BPS 71285
FcRn(FCGRT/β2M), His-Tag, Biotin-Labeled, HiP(Human) BPS 71283
FcRn(FCGRT/β2M), His-Tag(Mouse) HiP Recombinant BPS 11349
Anti-CD20, Agonist, Neutralizing, Human/Murine, Recombinant, Monoclonal BPS 71209

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細胞株のご購入にあたって

BPS Bioscience社の細胞株のご購入の際には、BPS Bioscience License Disclosureをご確認いただくようお願いいたします。

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細胞ベーススクリーニングアッセイ受託サービスのご案内

ご購入やライセンシングが不要な本細胞株を利用した細胞ベーススクリーニングアッセイ受託サービスも承ります。詳細は当社受託・特注品担当(Tel.:03-5624-1645、e-mail:jutaku@funakoshi.co.jp)までお問い合わせ下さい。


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価格

[在庫・価格 :2025年04月25日 20時55分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
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納期 文献数
FcRn: IgG Recycling HMEC-1 Cell Pool
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説明文
※別途輸送費(約6万円)が必要な製品です。※ライセンス同意書が必要な製品です。 CMVプロモーターの制御下でFCGRTとB2Mを発現するHMEC-1細胞プール。ヒトIgG抗体の取り込みとリサイクリングを測定できます。マイコプラズマ陰性確認済み。※受注発注品。※推奨培地の商品コード:82205,82206,細胞種:HMEC-1,細胞数:Each vial contains >1 x 106 cells in 1 ml of 7.5% DMSO and 92.5% FBS,由来:human,産生:HMEC-1
法規制等
保存条件 液体窒素中での保存 法規備考
掲載カタログ

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FcRn: IgG Recycling HMEC-1 Cell Pool

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法規制等
保存条件 液体窒素中での保存 法規備考
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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