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重要ながん原性変異の正確な同定に有用なウサギモノクローナル抗体 KRAS G12D Mutant Recombinant Antibody

掲載日情報:2025/06/26 現在Webページ番号:72032

KRAS G12D変異に対する組換え(リコンビナント)ウサギモノクローナル抗体をご紹介します。G12D変異を他の近縁の変異と区別し、正確に検出できるように設計された特異性の高い抗体です。

KRAS G12D Mutant Recombinant Antibodyイメージ

KRAS(Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog)とは

KRASは、低分子GTP結合タンパク質のrasファミリーに属する遺伝子であり、1つのアミノ酸置換が活性化変異の原因となります。KRAS変異により産生された形質転換タンパク質が肺腺がん、粘液性腺腫、膵管がん、大腸がんなどのさまざまな悪性腫瘍に関与していることが示唆されています。また、選択的スプライシングにより、C末端領域が異なる2つのアイソフォームをコードする変異体が生じることも知られています。



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特長

  • KRAS遺伝子のG12D変異のみを認識し結合するため、交差反応を最小限に抑えることができます(単一アミノ酸特異性)。
  • 優れた一貫性、バッチ間の信頼性、長期的な再現性を提供する組換え(リコンビナント)抗体フォーマットです。
  • 高い感度と親和性を有しています。
  • ウエスタンブロッティングおよび免疫蛍光染色(IF)において明瞭なバンドやシグナルを示すことを実証済みです。
  • SPR(表面プラズモン共鳴)を使って、特異性、親和性、動態プロファイル、エピトープの重複を評価しています。
  • 免疫動物(クロナリティー):ウサギ(モノクローナル)
  • クローン名:29B

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使用例

図1. ウエスタンブロット像

図1. ウエスタンブロット像

全細胞ライセート(各40 μg)またはin vitro発現したKRAS G12 WTおよび変異体(各500 ng)を、本抗体(3 μg/ml)を用いて検出した。


図2. 免疫細胞染色像

図2. 免疫細胞染色像

試料:メタノール固定したPANC-1(KRAS G12ヘテロ接合型)、THP-1(NRASG12Dヘテロ接合型)、およびHEK293 KRAS WT細胞
本抗体(1/50希釈(20 μg/ml))およびAlexa Fluor 488標識抗ウサギ抗体を用いて可視化した。


図3. カイネティクス解析

図3. カイネティクス解析

本抗体(50 μg/ml)を用いてLSA Kinetic softwareによるカイネティクス解析を行った。
2種類のG12D抗原濃度において、結合および解離速度はそれぞれka=2.7×103 M-1 s-1およびkd=1.4×10-4 s-1を示し、KD値は50 nMであった。G12Gや、G12S、G12C、G12A、G12R変異を有するKRAS抗原との特異的結合は認められなかった。


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