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PD1/PD-L1、CD8/MHC-Iの相互作用、CD3の局在を高感度に同時検出できるisPLAキット Naveni Plex Kit

掲載日情報:2025/04/10 現在Webページ番号:72024

蛍光検出のマルチプレックスin situ近接ライゲーションアッセイ(isPLA、in situ Proximity Ligation Assay)キットです。3種類のターゲット(PD1/PD-L1、CD8/MHC-I、CD3)についてタンパク質間相互作用や局在を、高い特異性および感度で同時に検出できます。ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)ヒト組織試料で検証済みです。


Naveni Plex KitによるFFPEヒト扁桃腺組織の染色 Naveni Plex KitによるFFPEヒト扁桃腺組織の染色

図. Naveni Plex KitによるFFPEヒト扁桃腺組織の染色
マゼンタ色:PD1/PD-L1、シアン色:CD3、黄色:CD8/MHC-I、灰色:核(DAPI)
(左図:4倍、右図:15倍に拡大)

特長

  • 以下を同時に検出するように設計されており、腫瘍微小環境における複雑なタンパク質相互作用を明らかにします。
    • PD1/PD-L1の相互作用(活性化された免疫チェックポイント経路を解明)
    • CD8/MHC-Iの相互作用(重要なT細胞活性化プロセスの開始を解明)
    • CD3の局在(重要なT細胞マーカーを追跡)
  • 機能的プロテオミクスを提供するマルチプレックスisPLAです。がん免疫インターフェースにおける複数のタンパク質相互作用を同時にマッピングし、発現だけでなく機能性についても明らかにします。
  • 最適化されており、すぐに使用可能(ready-to-use)です。組織内の免疫環境をより深く理解できるように、標的タンパク質を厳選・検証しています。
  • シグナル増幅による二重の抗体認識により、感度と特異性が向上しています。マルチプレックス環境において最も困難なターゲットでも正確に検出できます。

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測定原理

Navinci Diagnostics社独自のオリゴヌクレオチドアームを結合させた3組の一次抗体(Navenibodies)をホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)組織試料とインキュベートし、PD1とPD-L1、CD8とMHC-I、およびCD3上の2つのエピトープ間の相互作用を検出します。Navenibodiesが近接している場合のみ、ローリングサークル増幅反応が起こり、それぞれのチャンネル(FITC、Cy3、Cy5)で強く明瞭なシグナルが得られます。

測定原理


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操作方法概略

操作方法概略

ステップ1. それぞれのNavenibodiesが標的タンパク質に結合する。
ステップ2. 近接結合した2つのNavenibodiesが環状DNA「ブリッジ」を介して結合する。
ステップ3. コネクターDNAが増幅され、複数の蛍光標識オリゴによって検出される。


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使用例

免疫回避とその仕組みの解析

T細胞の浸潤(CD3およびCD8)、細胞傷害性の関与(CD8/MHC-I)、免疫阻害(PD1/PD-L1)の相対レベルを測定し、免疫回避がT細胞の活性化とどのように相関するかを調査することにより、腫瘍による免疫攻撃の阻害に関する知見を得た。

使用例

Naveni Plex Kitによって同時検出されたPD1/PD-L1(マゼンタ色)、CD3/CD3(青緑色)、CD8/MHC-I(黄色)。灰色は核(DAPI)を示す。
図A:ホジキンリンパ腫(Hodgkin lymphoma)組織、図B:肺がん組織、図C:メラノーマ組織


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キット内容

  • Naveni Plex Navenibodies A PD1/PD-L1
  • Naveni Plex Navenibodies B CD3
  • Naveni Plex Navenibodies C CD8/MHC-I
  • Naveni block
  • Naveni diluent
  • Naveni enzyme 1, 2
  • Naveni Plex buffer 1/ABC
  • Naveni buffer 2
  • Naveni post block
  • Naveni Plex detection mix/ABC

その他、別途ご用意いただく試薬についてはデータシート(下記価格表に掲載)をご確認下さい。


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価格

[在庫・価格 :2025年05月01日 00時00分現在]

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(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。

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