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RT-PCRを簡便に同一チューブで行えます qScript XLT 1-Step RT-PCR Kit

掲載日情報:2025/03/11 現在Webページ番号:71667

動植物組織、環境試料、臨床試料、食品などに由来するPCR阻害物質を含むRNA試料から、逆転写とPCRを1チューブ、ワンステップで行える2液組成のRT-PCRマスターミックスです。


RNAテンプレートからの1-Step RT-PCRの例
プライマーデザイン

RNAテンプレートからワンステップRT-PCRを行った例
RNAテンプレートはテトラサイクリン耐性遺伝子(TcR)のin vitro転写物(1×105 copies)、プライマーはBに記載のものをそれぞれ200 μM用い、20 μlの反応系で各社キットによりワンステップRT-PCRを行った。逆転写反応およびhot-start DNA polymeraseの活性化までは各社キットの推奨プロトコルに従い、その後は94℃(15秒)、60℃(20秒)、72℃(2分)の反応を30サイクル行い、最後に72℃で5分間反応させた。得られた産物を0.8%アガロースゲル(0.5×TBE、0.25 mg/mlエチジウムブロミド)で電気泳動した。
本キットでは、いずれのサイズにおいても高収量で産物が得られている。


特長

  • cDNA合成とPCR増幅を同一チューブで行うため、インキュベーション間でチューブを開閉する必要がありません。
  • 動植物組織、環境試料、臨床試料、食品などに由来するPCR阻害物質を含むRNA試料からのRT-PCRに最適です。
  • マスターミックスに含まれている逆転写酵素qScript XLT One-Step reverse transcriptaseは、RNase H活性を低下させ、高温での活性と安定性を向上させたM-MLV reverse transcriptaseです。
  • マスターミックスに含まれているリボヌクレアーゼ阻害タンパク質により、試料中のRNAを分解から保護します。
  • マスターミックスに含まれているhot-start DNA polymeraseは、プルーフリーディング活性(3'-exonuclease)を有し、PCRのfidelityと産物の長さを向上させます。
  • 付属のGelTrack loading dyeを反応液に加えてRT-PCRを行うと、PCR産物をそのまま電気泳動に使用できます
    #95143-020には付属していません。

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使用例

HeLa由来Total RNAからの1-Step RT-PCRの例

HeLa細胞由来Total RNAからワンステップRT-PCRを行った例
ACTBは2 ngのHeLa細胞由来Total RNAから、それ以外は20 ngのHeLa細胞由来Total RNAから、本キットを用いて48℃(20分)、94℃(3分)の反応後、94℃(15秒)、60℃(15秒)、68℃(2分)の反応を35サイクルでワンステップRT-PCRを行った。得られた産物を0.8%アガロースゲルで電気泳動した。
CFB:Complement factor B
PP2A:Protein phosphatase 2A
ACTB:β-Actin
APC:Adenomatous polyposis coli


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キット内容

構成品名組成
qScript XLT One-Step reverse transcriptase25× concentrated mixture of qScript XLT reverse transcriptase and recombinant ribonuclease inhibitor protein
One-Step ToughMix2× concentrated reaction buffer containing dNTPs, magnesium chloride, hot-start DNA polymerase, and stabilizers
GelTrack loading dye 50× concentrated mixture of RT-PCR compatible, blue and yellow electrophoresis-tracking dyes
Nuclease-free water

#95143-020には付属していません。


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価格

[在庫・価格 :2025年04月25日 20時55分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
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納期 文献数
qScript XLT One-Step RT-PCR Kit (20reactions)
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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説明文
PCR阻害物質を含む血液や植物試料などの試料から,逆転写とPCRを1ステップで行える2液組成のRT-PCRマスターミックス。※GelTrack Loading Dyeは付属していません。
法規制等
保存条件 -20℃,暗所保存 法規備考
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2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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説明文
PCR阻害物質を含む血液や植物試料などの試料から,逆転写とPCRを1ステップで行える2液組成のRT-PCR用マスターミックス。付属のGelTrack Loading Dyeを反応液に加えてRT-PCRを行うと,PCR産物をそのまま泳動へ用いることができる。
法規制等
保存条件 -20℃,暗所保存 法規備考
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[在庫・価格 :2025年04月25日 20時55分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

qScript XLT One-Step RT-PCR Kit (20reactions)

文献数: 0

説明文 PCR阻害物質を含む血液や植物試料などの試料から,逆転写とPCRを1ステップで行える2液組成のRT-PCRマスターミックス。※GelTrack Loading Dyeは付属していません。
法規制等
保存条件 -20℃,暗所保存 法規備考
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説明文 PCR阻害物質を含む血液や植物試料などの試料から,逆転写とPCRを1ステップで行える2液組成のRT-PCR用マスターミックス。付属のGelTrack Loading Dyeを反応液に加えてRT-PCRを行うと,PCR産物をそのまま泳動へ用いることができる。
法規制等
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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