単一細胞（シングルセル）やスフェロイドの環境応答を長期間モニタリング！ CytoCHECK / SpheroCHECK SPAchip Detection Kitシリーズ
掲載日情報：2024/08/30 現在Webページ番号：70960
SPAchip（Suspended Planar-Array Chips）は表面に蛍光色素をプリントしたシリコン製のマイクロチップです。細胞培養液に添加するだけで細胞内に取り込まれ、単一細胞（シングルセル）やスフェロイドのpH、カルシウム濃度、遊離ヒドロキシラジカルといった細胞質内環境を長期間にわたってモニタリングできます。細胞の生存率や細胞の生理的条件に変化を与えることなく、1か月以上の継続観察が可能です。遅延型の薬剤反応評価や細胞分化プロセスの観察などに有用です。
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- SPAchipについて
- 単一細胞解析用製品（CytoCHECK）の特長
- 適用
- 対応した測定機器
- 製品ラインナップ
- 操作方法概略（細胞試料の場合）
- 各種セルベースアッセイプラットフォームの適用の比較
- 使用例
- キット内容
- FAQ
SPAchipについて
SPAchip（Suspended Planar-Array Chips）は3W×3D×1H μmの大きさのシリコン製のマイクロチップです。ポリマーペンリソグラフィー（Polymer pen lithography、PPL）技術を用いて、チップ表面に蛍光色素を集積させることができ、区画を区切って複数の蛍光試薬を集積させることで、マルチカラーの蛍光デバイスとして用いることもできます。SPAchipの一辺は一般的な細胞直径の1/10ほどで、培養液に添加するだけでエンドサイトーシスを介して細胞内に取り込まれ、細胞内において表面蛍光色素の特性に基づいた環境応答性を示します。また、蛍光色素の代わりにタンパク質、核酸、糖質、脂質や化学プローブを修飾することで、多様な検出対象を評価することも可能です。
動画
参考文献
- Torras, N., et al., "Suspended Planar-Array Chips for Molecular Multiplexing at the Microscale.″ Adv. Mater., 28(7), 1449～1454(2016). [PMID:26649987]
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単一細胞解析用製品（CytoCHECK）の特長
※ ☞ スフェロイド解析用製品（SpheroCHECK）の特長についてはこちらをご覧下さい。
以下の性質により、単一細胞内の検出対象の変化を長時間にわたって観察できます。
- SPAchipが取り込まれた単一細胞（シングルセル）の細胞内環境変化を経時的に観察できます。
- 細胞内に取り込まれたSPAchipは細胞質に留まり、細胞外やオルガネラに拡散しません。
- 蛍光色素が細胞内に拡散しないため、細胞毒性を低く抑えることができます。
- 蛍光色素をチップ上に集積させることで、蛍光色素は濃度低下や分解から保護されます。
- 蛍光退色の影響を受けにくい仕様です（1時間の強いレーザー光照射を13サイクル繰り返しても<20%の蛍光減衰しかみられません）。
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適用
- 細胞生存率の測定
- 細胞増殖率の測定
- 細胞の画像解析
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対応した測定機器
- 蛍光顕微鏡
- High Content Screening（HCS）/ High Content Analyze（HCA）アナライザー*1
- フローサイトメトリー
＊1 HCS / HCAアナライザーを用いる場合は、20倍以上の倍率の対物レンズをご使用下さい。このほか固定波長フィルターを備えた広視野蛍光顕微鏡やイメージングシステムも使用できます。
※ マイクロプレートリーダーは、SPAchipの観察には適していません。FAQの☞ Q-1. SPAchipはどのような実験機器で解析できますか？を併せてご確認下さい。
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製品ラインナップ
測定項目別Index
細胞内外のpH測定
細胞内外のpHを蛍光強度の変化によって追跡できるSPAchipキットです。代謝中のpH変動や外部刺激に対する応答など、時間経過に伴う細胞の変化や応答をリアルタイムで捉えることができます。細胞の恒常性維持、代謝、細胞間情報伝達、薬剤の有効性・細胞毒性の評価、疾患メカニズムなどの研究に有用です。
商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。
| 品名 | 測定波長 | 測定pH範囲 | 製品概要 | 商品コード | ||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 励起 | 蛍光 | |||||
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CytoCHECK SPAchip pH Green Single-Detection Kit ☞ 使用例 |
488 nm | 520 nm | 4.5～7.5 | 細胞内外のpHを緑色蛍光強度の変化によって追跡できるSPAchipキット。 |
S-001-PHG*2 |
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CytoCHECK SPAchip pH Red Single-Detection Kit |
546 nm | 610、707 nm | 4.5～9.0 | 細胞内外のpHを赤色蛍光強度の変化によって追跡できるSPAchipキット。 | S-001-PHR |
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CytoCHECK SPAchip pH Dual Detection Kit |
488 nm | 520 nm | 4.5～7.5 | 2種類の細胞内のpHを、それぞれ緑色および赤色蛍光強度の変化によって追跡できるSPAchipキット。共培養実験において、それぞれの細胞の測定が行える。 | D-001-PHGR |
| 546 nm | 610、707 nm | 4.5～9.0 | ||||
＊2 2023年2月末より#CPS-001PCおよび#CPS-002PDは#S-001-PHGに商品コードが変更となりました。製品の仕様に変更はありません。
スフェロイド内外のpH測定
スフェロイドの細胞内外のpHを緑色蛍光強度の変化によって追跡できるSPAchipキットです。pHの変動は、細胞の生存率、増殖率、代謝活性に直接影響し、最終的にはスフェロイドの形成と状態に影響を及ぼします。三次元細胞培養における再現性・信頼性の確保、および薬剤試験の有効性・細胞毒性を正確に評価するためには、最適なpH環境を維持することが不可欠です。がんの進行・転移、がん微小環境、薬剤の有効性・細胞毒性の評価、疾患メカニズムなどの研究に有用です。
商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。
| 品名 | 測定波長 | 測定pH範囲 | 製品概要 | 商品コード | ||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 励起 | 蛍光 | |||||
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SpheroCHECK SPAchip pH Green Single-Detection Kit ☞ 使用例 |
488 nm | 520 nm | 4.5～7.5 |
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SS-001-PHG |
細胞内のカルシウム濃度測定
細胞内のカルシウム濃度を蛍光強度の変化によって追跡できるSPAchipキットです。ニューロンが電気インパルスを発すると、カルシウムイオンが急増します。この変化を測定することで、ニューロンの活動を間接的にモニターすることができ、脳機能の研究に使用できます。カルシウムシグナル、神経活動、シナプスの可塑性、神経変性疾患、薬理学などの研究に有用です。
商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。
| 品名 | 測定波長 | 測定範囲 | 製品概要 | 商品コード | ||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 励起 | 蛍光 | |||||
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CytoCHECK SPAchip Calcium Single-Detection Kit ☞ 使用例 |
488 nm | 520 nm | 10～1,000 μM | 細胞内のカルシウム濃度を蛍光強度の変化によって追跡できるSPAchipキット。 |
S-002-CAG*3 |
＊3 2023年2月末より#CCS-003CTは#S-002-CAGに商品コードが変更となりました。製品の仕様に変更はありません。
細胞内のカルシウム濃度と細胞内外のpHの測定
細胞内のカルシウム濃度と、細胞内外のpHを蛍光強度の変化で追跡できるSPAchipキットです。1つの細胞における分化開始、増殖、代謝状態の維持という能力をより良く理解するためには、生きた単一細胞の生理学を包括的に研究することが重要です。細胞機能、細胞生存率・細胞毒性、細胞分化の過程、代謝経路、ミトコンドリアおよび細胞の健康状態、薬剤の有効性の評価、酵素反応などの研究に有用です。
商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。
| 品名 | 測定項目 | 測定波長 | 測定範囲 | 製品概要 | 商品コード | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 励起 | 蛍光 | ||||||
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CytoCHECK SPAchip Calcium & pH Multi-Detection Kit ☞ 使用例 |
Calcium | 488 nm | 520 nm | 10～1,000 μM | 細胞内のカルシウム濃度と、細胞内外のpHのそれぞれを蛍光強度の変化によって追跡できるSPAchipキット。 |
M-001-PC |
| pH | 546 nm | 610、707 nm | pH 4.5～9.0 | ||||
細胞内の遊離ヒドロキシルラジカル（•OH）の測定
細胞内の遊離ヒドロキシラジカルを蛍光強度の変化により特異的に追跡できるSPAchip Kitです。これまでの多くの研究により、細胞の生存、増殖、分化、細胞死、アポトーシス、フェロトーシスにおいて活性酸素がメッセンジャーとして働いていることが報告されています。神経変性疾患、がん治療、心血管系疾患、糖尿病および代謝活動、老化、炎症および自己免疫疾患などの研究に有用です。
商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。
| 品名 | 測定波長 | 製品概要 | 商品コード | ||
|---|---|---|---|---|---|
| 励起 | 蛍光 | ||||
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CytoCHECK SPAchip OHrad ROS Single-Detection Kit ☞ 使用例 |
488 nm | 520 nm |
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S-003-ROSG |
追加しました。
操作方法概略（細胞試料の場合）
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| ①細胞の播種 | ②化合物処理 | ③マーカーの染色 | ④細胞イメージの取得 | ⑤画像解析 | ||||
| （96-/384- well plate） | （High content cell imaging system） | （画像取得・解析ソフトウェア） |
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各種セルベースアッセイプラットフォームの適用の比較
| CytoCHECK Kit | Planar Array | Suspension Array | Live-cell Array | |
|---|---|---|---|---|
| マルチプレックス化 | Potentially High | Very High | High | High |
| シングルセル | Yes | No | No | Yes |
| リアルタイム観察 | Yes | No | No | Yes |
| 細胞内情報 | Yes | Yes | Yes | No |
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使用例
☞ CytoCHECK SPAchip pH Green Single-Detection Kit ☞ SpheroCHECK SPAchip pH Green Single-Detection Kit ☞ CytoCHECK SPAchip Calcium Single-Detection Kit ☞ CytoCHECK SPAchip Calcium & pH Multi-Detection Kit ☞ CytoCHECK SPAchip OHrad ROS Single-Detection Kit
CytoCHECK SPAchip pH Green Single-Detection Kit（#S-001-PHG）
フローサイトメトリーによるpH検出結果
SpheroCHECK SPAchip pH Green Single-Detection Kit（#SS-001-PHG）
さまざまなpHによる蛍光強度の変化
SPAchipを取り込ませたHEK293細胞株におけるスフェロイド形成過程のタイムラプス画像
SPAchipテクノロジーにより、スフェロイド形成におけるさまざまな時点でのpHを測定できる。下図は、HEK293細胞株（ヒト胎児腎臓由来）をSpheroCHECK SPAchip pH Green Single-Detection Kit（#SS-001-PHG）とインキュベートして取り込ませた後、スフェロイドの形成を経時的に観察した。
※ 赤色：生細胞の核（DRAQ5染色）
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| 24時間後 | 28時間後 | 48時間後 | 52時間後 |
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さまざまなpHにおけるスフェロイド内外の観察
SPAchipを取り込ませたHEK293細胞株からスフェロイドを形成させた。Intercellular pH Calibratorを用いてスフェロイド内外のpHを平衡化させた後、SPAchipの蛍光を測定した。赤色蛍光はDRAQ5で染色された生細胞の核を示す。
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図をクリックすると拡大します（🔍）
CytoCHECK SPAchip Calcium Single-Detection Kit（#S-002-CAG）
細胞内カルシウム濃度測定の創薬への応用例
細胞内カルシウム濃度の蛍光顕微鏡による経時的な解析
それぞれの細胞にDoxorubicin（Doxo）を添加後、5日間にわたって、細胞質内のカルシウム濃度の経時的な上昇が観察された。
CytoCHECK SPAchip Calcium & pH Multi-Detection Kit（#M-001-PC）
SH-SY5Y細胞株（ヒト神経芽腫由来）の細胞内カルシウムおよびpHの蛍光顕微鏡による観察
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CytoCHECK SPAchip OHrad ROS Single-Detection Kit（#S-003-ROSG）
線維芽細胞1095SK細胞株内のROSの検出
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図をクリックすると拡大します（🔍）
- 緑色：ROS
- 赤色：細胞質（CellMask Plasma Membrane Stain、Thermo Fisher Scientific社）
- 青色：核（Hoechst 33342）
- スケールバー：20 μm
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キット内容
- Sterile assay buffer
- Cotrol SPAchip
- Assay SPAchip
※ キットにより内容は異なります。
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FAQ
Q-2. SPAchipは蛍光退色の影響を受けますか？☟
Q-3. 生細胞の動的変化は追跡可能ですか？☟
Q-4. 細胞分裂にはどのような影響を与えますか？☟
Q-5. 他のアッセイ系と併用できますか？☟
Q-9. SPAchipは細胞内のどの部位に存在しますか？☟
価格 AFC000040,AFC000060,AFC000070,AFC000090,AFC000050,AFC000080,AFC000100
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