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形質導入された細胞内のベクターコピー数(VCN)をdPCRにより測定するキット MiQuant CAR-T Cell dPCR Lenti Kit

掲載日情報:2024/10/08 現在Webページ番号:70929

形質導入された細胞内のベクターコピー数 (VCN、Vector Copy Numbers) をデジタルPCR(dPCR)により簡便、迅速、高感度に測定するキットです。すべてのレンチウイルス形質導入システムに適応可能で、細胞製品の特性評価、細胞療法製造プロセスにおける工程内管理、および最終QCリリーステストに使用できます。また、研究開発における細胞培養試料内のVCNの決定にも使用できます。

VCN測定結果の検証例

VCN測定結果の検証例

WHOリファレンス試薬と本製品、他社製品を用いたVCNの測定結果を比較した。他社製品はWHOリファレンス試薬よりVNCの数値が低い結果が示されたが、本製品を用いた場合はほぼ同等の結果が得られた。

キット内容

  • MiQuant lenti mix
  • Positive control DNA
  • dPCR grade water

試料の調製には、MiQuant SP Beadsが別途必要です。

MiQuant CAR-T Cell dPCR Lenti Kit製品外観

MiQuant CAR-T Cell dPCR Lenti Kit製品外観


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VCN測定のワークフロー

① 試料の調製 本製品は、形質導入細胞から核酸を分離を目的とした磁気ビーズベースの抽出キットです。抽出操作は、手動または自動のいずれでも行えます(右図: KingFisher Flexを使用した例)。 ① 試料の調製
② デジタルPCR(dPCR) 本製品には、Taqポリメラーゼ、dNTP、バッファー、2種類のプライマー/プローブシステムなど、必要なすべての試薬が含まれています。duplex PCRシステムを用いることにより、ヒトPCBP2遺伝子(HEX標識プローブ)とレンチウイルス/CD19特異的ターゲット(FAM標識プローブ)を検出します。VCNの定量では標準曲線を作成する必要はありません。 ② デジタルPCR(dPCR)
③ 解析 VCNの計算は、手動または解析ソフトウェアを使用して行うことができます。dPCRの結果 [コピー数/μl] から倍数性と形質導入頻度を考慮してベクターコピー数に変換できます。 ③ 解析

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細胞および遺伝子治療アプリケーション(CAR-T細胞試料など)を目的とする形質転換細胞から核酸を迅速かつ高収率で抽出できる磁気ビーズベースの抽出キットです。MiQuantシリーズと併用にも最適です。2段階の結合メカニズムにより、洗浄操作と組み合わせてサンプルマトリックス内の不純物を除去します。核酸は、Elution bufferを用いて磁気ビーズから溶出します。抽出操作は、手動または自動(KingFisher Flexなど)で行うことができます。

適応試料

  • CAR-T細胞
  • ウイルスベクター

キット内容

  • Binding buffer
  • Elution buffer
  • Lysis buffer
  • Rehydration buffer
  • Wash buffer 1/2/3
  • Magnetic bead suspension
  • Proteinase K

MiQuant SP Beads製品外観

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価格

MiQuant CAR-T Cell dPCR Lenti Kit

[在庫・価格 :2025年04月25日 20時55分現在]

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(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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