酵母細胞から高品質のRNAを抽出するキット SPINeasy RNA Kit for Yeast
掲載日情報：2024/07/03 現在Webページ番号：70906
シリカメンブレンとスピンカラム技術をベースに、酵母細胞壁を40秒以内に均一化できるビーズ破砕法と組み合わせることで、幅広い酵母種から30分以内で高品質のRNAを抽出できるキットです。
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特長
- FastPrep装置とLysing Matrix YGを組み合わせることにより高収量・高収率を実現します。
- 有害な溶媒を使用せず夾雑高分子を迅速に除去する脱塩技術と、炭水化物を有する酵母細胞壁から酵素不使用で効果的にRNAを抽出できるスフェロプラスト法を組み合わせています。
- 高品質な全RNAを30分以内に抽出できます。
- 得られたRNAは、ノーザンブロッティング、RT-PCR、次世代シークエンシング（NGS）、マイクロアレイ、ハイブリダイゼーションなどに適用できます。
- 原理：シリカメンブレンテクノロジー
- フォーマット：ミニスピンカラム
- 適応試料種：酵母細胞
- 適応試料量：≦2 × 108 cells
- 参考収量：≦220 μg（試料によって異なります）
- 溶出量：50～100 μl
- 操作時間：30分（6 preps）
試料破砕装置FirstPrep
試料の効果的な破砕および最適な収量を得るために、キットに含まれるLysing Matrix YGと別売の☞ 試料破砕装置FastPrepの併用をお勧めします。
Fastprep-24 5G Instrument（Webページ番号 ☞ 34790）
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使用例
図1．本製品および他社RNA精製キットにより酵母細胞から抽出したRNAの完全性および純度の比較
酵母S. cerevisiae（図1A）およびP. pastoris（図1B）についてそれぞれ2 × 108 cellsから、本製品および他社RNA精製キット（X、Y、Z）を用いてそれぞれFastPrepとvortex法により全RNAを抽出・精製した。精製したRNAは、RNA Screen Tapeを用いてBioanalyzer 4150（Agilent社）で分析し、RIN値とO.D.比によりRNAの完全性と純度を決定した。
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図2．本製品および他社RNA精製キットにより酵母細胞から抽出したRNAのRT-qPCRによる比較
下流アプリケーションへの適用の検証のため、各キットで精製したRNAを試料としてiTaq Universal SYBR Green Supermix（BioRad社、#1725121）を用いたRT-PCR（+/RT）で酵母由来RNAを検出した。
S. cerevisiae（図 2A）およびP. pastoris（図 2B）から各キットで精製したRNAを希釈し、5 logレンジのテンプレート濃度の試料を調製した。iTaqのプロトコルに従いアクチン標的プライマーを用いて、Universal SYBRR Green One-Step Kit RT-qPCR reagents（BioRad社、#1725150）とQuantStudio3（Thermo Fisher Scientific社)で解析した。
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酵母細胞からのRNAの予想収量
| 酵母細胞数 | 予想収量（RNA） |
|---|---|
| 1 × 106 | 50～80 μg |
| 1 × 107 | 90～110 μg |
| 1 × 108 | 130～180 μg |
| 2 × 108 | 170～220 μg |
各社の酵母細胞からのRNA精製キットのスペックの比較
| メーカー | 酵母種 | 推奨細胞数 | 溶解方法 | DNA除去方法 | 操作時間（分） | |
|---|---|---|---|---|---|---|
| S. cerevisiae | P. Pastoris | |||||
| 本製品 | 220 μg | 185 μg | 2 × 108 cells | ビーズ破砕法 （Fastprep/Vortex） |
カラムによるゲノムDNA除去 | 15～30 |
| X社キット | 81.7 μg | 67.2 μg | 1 × 107 cells | 小型ビーズミル／Lyticase／Zymolyase | On-column DNase処理／ 精製後にDNase処理 |
47～55 |
| Y社キット | 110 μg | 85.2 μg | 4 × 108 cells | Lyticase | 精製後にDNase処理 | 60～70 |
| Z社キット | 98.4 μg | 83.2 μg | 5 × 107 cells | Zymolyase／ガラスビーズ （ビーズミル） |
ゲノムDNA除去カラム & on-column DNase処理 |
30～45 |
※ 他社RNA精製キットについては、記載細胞数の酵母から抽出したRNAを用い、各社プロトコルに記載の夾雑DNAの推奨除去方法を行った。
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キット内容
※ ☞ Lysing Matrixの各種単品についてはこちらをご覧下さい。
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価格
[在庫・価格 ：2024年12月12日 00時01分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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SPINeasy RNA Kit for Yeast, 50preps |
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[在庫・価格 ：2024年12月12日 00時01分現在]
SPINeasy RNA Kit for Yeast, 50preps
文献数： 0
- 商品コード：6565-050
- メーカー：GEN
- 包装：1kit
- 価格：¥42,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：1週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | 国内に在庫がなく，海外から取り寄せの場合は納期が異なります。 酵母試料中から30分以内に高純度のRNAを高収率で抽出できるキット。試料破砕装置FastPrep装置により酵母を効率的に溶解した後，精製用カラムでRNAを精製する。SKU：116565050 |
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| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 法規備考 | ||
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 | DNA / RNA の抽出・精製および細胞ライセート調製システム FastPrep システム特集 |
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