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細胞表面の糖鎖の標識、細胞の単離および糖タンパク質の標識および単離に有用です BioMagPlus Lectinシリーズ

掲載日情報:2023/10/26 現在Webページ番号:70852

植物レクチンである小麦胚芽凝集素(WGA;Wheat Germ Agglutinin)またはコンカナバリン A(Con A;Concanavalin A)BioMagPlus*にコーティングしたビーズです。細胞表面の糖鎖の標識および細胞の単離、また血清や細胞ライセート中の糖タンパク質の標識および単離に有用です。レクチンは、リンパ球の活性化、糖鎖ベースの治療法の探索のための細胞接着研究にも使用されています。

BioMagPlus:細胞の効率的な分離やタンパク質または他の生体分子の精製に用られる約1.5 μmの高性能超常磁性ビーズです。高い表面積により簡単かつ効率的な分離を可能にします。BioMagPlus製品の詳細についてはこちらをご覧下さい。

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製品ラインナップ

品名をクリックすると製品の詳細、商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

品名 濃度 レクチン結合 平均粒径 商品コード
BioMagPlus Wheat Germ Agglutinin 5 mg/ml A280により決定 約1.5 μm BP530
BioMagPlus Concanavalin A 約1.0 μm BP531

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BioMagPlus Wheat Germ Agglutinin(WGA)

小麦胚芽凝集素(WGA)を機能化BioMagPlus粒子に共有結合した製品です。血清または細胞溶解物からN-アセチルグルコサミン含有糖タンパク質の単離、または他のレクチン/糖鎖を介したプロセスの研究に有用です。

小麦胚芽凝集素(WGA)とは

小麦胚芽凝集素(WGA)は、2つの同一のサブユニットで構成される36 kDaのタンパク質です。その主な糖結合パートナーは N-アセチルグルコサミン(GlcNAc)であり、GlcNAcの二量体および三量体に最も確実に結合します。WGAは、細胞壁のペプチドグリカン層のGlcNAc部分を介してグラム陽性菌に結合します。またWGAは、末端にGlcNAc、キトビオース、またはシアル酸残基を持つ糖類と相互作用します。WGAにはタンパク質に結合した糖鎖は含まれず、血液型には依存しません。

使用例

BioMagPlus WGAによるトリプシン阻害物質の溶出物のTris Glycine SDS-PAGEゲル電気泳動

トリプシン阻害物質を異なる量のBioMagPlus WGAで溶出し、4~20%トリスグリシンSDS-PAGEゲル電気泳動およびGlycoGel Glycoprotein染色(左下図)またはCoomassie G250染色(右下図)により溶出を確認した。

GlycoGel Glycoprotein染色

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GlycoGel Stain Kit(#24693)染色

Coomassie G250染色(#03707)

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Coomassie G250染色(#03707


Lane 1~4 5 6 7 8 9
BioMagPlus WGA使用量
(トリプシン阻害物質対照試料)
1 ml 0.75 ml 0.5 ml 0.25 ml 0.1 ml

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BioMagPlus Concanavalin A(Con A)

コンカナバリン A (Con A)を機能化BioMagPlus粒子に共有結合した製品です。血清または細胞溶解物からマンノシルおよびグルコシルを含む糖タンパク質および多糖の単離、または他のレクチン/糖鎖を介したプロセスの研究に有用です。また、BioMagPlus Con AはChIPに比べていくつかの優位性があり、CUT&RUN法によるクロマチンのプロファイリングにも使用されています。

コンカナバリン A (Con A) とは

コンカナバリン A(Con A)は、4つの同一サブユニットで構成される104 kDaのタンパク質で、pHに応じて活性化された二量体または四量体として存在します。その糖鎖結合パートナーは、C-3、C-4およびC-6に修飾されていないOH基を持つα-D-グルコース、α-D-マンノース、タンパク質およびペプチドの末端グルコース残基です。Con Aは、赤血球(RBCs;Red Blood Cells)を凝集させ、免疫グロブリンや糖ペプチドと相互作用し、リンパ球の分裂を促進させます。また、一部の細菌と結合します。

Con A結合は、金属イオンによって媒介され、立体構造を安定化します。各結合部位にはカルシウムイオンおよびマンガンイオンが必要で、EDTAまたは他の金属キレート剤を含む緩衝液の使用により糖鎖結合能が失われます。


使用例

BioMagPlus Con Aによるアポトランスフェリンの結合と溶出

BioMagPlus Con Aによるアポトランスフェリンの結合と溶出

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アポトランスフェリンを異なる量のBioMagPlus Con Aで結合および溶出し(Lane 2~6)、0.3 mg/ml アポトランスフェリンのアプライ量を変えたバンド(Lane 7~10)と比較した。


Lane 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
試料
添加量
BioMagPlus Con A(ml) 0.3 mg/ml アポトランスフェリン(μl)
1 0.5 0.25 0.125 0.05 5 10 20 30

参考資料

Concanavalin A (Con A)

Con A微粒子は、Con A遊離タンパク質と同様の結合特性を有し、また結合活性を維持します。Zemらは、Con Aに結合したマイクロスフェアは、診断検査における糖鎖ベースの薬剤開発において、マイクロアレイの代替となる可能性があることを示しました1。一方で、Paiらは、 油中水エマルション技術によって調製されたCon Aマイクロスフェアは、未修飾Con Aに関するこれらの特性の文献値と同様のグルコースおよびSAPG-insulinへの結合特性があることを実証しました2。左の画像をクリックすると、詳細な技術情報をご覧いただけます。


参考文献

  1. Zem, G,C., et. al.,"Microbead Analysis of Cell Binding to Immobilized Lectin: an Alternative to Microarrays in the Development of Carbohydrate Drugs and Diagnostic Tests", Acta. Histochem., 108(4), 311~317 (2006). [PMID:16730370]
  2. Pai, C.M., et. al., "Concanavalin A microspheres for a self-regulating insulin delivery system", J. Pharm. Sci., 81(6), 532~536 (1992). [PMID:1522489]

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価格

BioMagPlus Wheat Germ Agglutinin

[在庫・価格 :2024年05月04日 12時15分現在]

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BioMagPlus Wheat Germ Agglutinin
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Wheat Germ Agglutininがコーティングされた超常磁性酸化鉄の粒子。血清または細胞溶解物からN-アセチルグルコサミン含有糖タンパク質の分離に有用。BioMagより粒子のサイズ分布が小さいBioMag®Plusを使用。粒径:~1.5 µm,表面修飾:Wheat Germ Agglutinin,蛍光:無,着色:無,磁気:有,粒子濃度:5 mg/mL
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(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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