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土壌試料からのマイクロバイオーム解析に適したゲノムDNAを効果的に抽出するキット SPINeasy DNA Pro Kit for Soil

掲載日情報:2023/04/21 現在Webページ番号:70829

土壌試料は、フミン酸、重金属、その他の芳香族化合物などのPCR阻害物質が存在する複雑な環境であり、下流の解析が難しいとされています。SPINeasy DNA Pro Kit for Soilは、バイオマスの少ない土壌や高度に汚染された土壌などのゲノムDNAの抽出が困難な土壌試料から、キットに含まれる破砕用ビーズLysing Matrix YB試料破砕装置FastPrep装置の組み合わせにより、土壌中の微生物を効果的に破砕し、マイクロバイオーム解析に適した高純度のゲノムDNAを抽出できるキットです。

SPINeasy DNA Pro Kit for Soil製品外観

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SPINeasy DNA Pro Kit for Soil(#6546-050)製品イメージ

FastPrep 24-5Gへのバナー

Fastprep-24 5G Instrument(Web記事番号 ☞ 34790

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特長

  • バクテリア、真菌、ウイルス、原生生物などのさまざまな微生物を効果的に溶解し、バイアスがないDNAが得られます。
  • 得られたDNAは、PCRで阻害を示さず、PCR阻害物質の除去操作は必要ありません。
  • FastDNA SPIN Kit for Soilと同様の収量が得られ、さらに純度の向上および処理時間の短縮をもたらします。
  • 得られたDNAは、長鎖断片PCR、qPCR、および次世代シークエンシング(16Sおよび全ゲノム)を含む下流のアプリケーションにそのまま使用できます。

製品仕様

DNA吸着法 シリカメンブレン
フォーマット ミニスピンカラム
バキュームマニホールド 使用可
試料 土壌(砂/堆肥/堆積物/表土など)
試料量 最大500 mg
標準収量 最大50 μg(試料により異なります)
溶出液量 30~100 μl
所用時間 30 min(6 preps)

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操作方法概略

SPINeasy DNA Pro Kit for Soilのワークフロー

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SPINeasy DNA Pro Kit for Soilのワークフロー

  1. 土壌試料の破砕
  2. 夾雑物(阻害物質)の除去
  3. シリカメンブレンへのDNA結合
    (遠心分離またはバキュームマニホールドを使用)
  4. 洗浄
  5. 遠心分離によるカラムの乾燥
  6. DNAの溶出

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使用例

各種土壌試料から得られたDNA品質の比較

図1.バイオマス含有量が異なる土壌試料(左:高、右:中)から抽出したゲノムDNAの品質

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図1.バイオマス含有量が異なる土壌試料(左:高、右:中)から抽出したゲノムDNAの品質

バイオマス(低)

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図2.低バイオマスの土壌試料から抽出したゲノムDNAの品質

バイオマス/PCR阻害物質(高、中、低)がさまざまな土壌試料(各250 mg)から、本製品および他社キットでゲノムDNAを抽出した。バイオマス(中)の土壌試料は、-20℃で12~24ヶ月間保存したものであり、抽出したDNAの収量と完全性に悪影響を及ぼすものが含まれている可能性がある。DNAの収量と純度(A260/280とA260/230比)は、分光光度計で4重測定して評価した。プロットの各ドットは、1回の抽出を示す。水平バーは中央値を示す。DNAの完全性は、ゲル電気泳動で評価した。バイオマス(低)の土壌試料の場合、本製品と他社キットの性能を比較するために同量のDNA溶出液をゲルにアプライした。

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DNAの増幅能によるPCR阻害物質存在の評価

未希釈のDNAを用いて、PCRと定量的PCRで、PCR阻害物質の存在の有無を評価した。

図3.DNAの増幅能によるPCR阻害物質存在の評価

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図3.DNAの増幅能によるPCR阻害物質存在の評価

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16S rRNA解析による微生物プロファイリング

図中に記載した4種類の抽出キットを使用し、高バイオマスの土壌試料から抽出したDNAについて、バクテリアの16S rRNA遺伝子の超可変領域V4(hypervariable region V4)に対するプライマーを使用して増幅した。NovaSeq PE250プラットフォーム(Illumina社)でNGS解読を行い、Qiime 2パイプラインで解析を行った。

図4.16S rRNA解析による微生物プロファイリング

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図4.16S rRNA解析による微生物プロファイリング

  • :各キットについて、3回ずつDNA抽出・NGS解析を行い(technical replicate)、得られた各種バクテリアの存在比を示した。
    グラフ中のパーセント表記は、土壌試料中に存在するグラム陽性菌ファーミキューテス門(Firmicutes、黄色)の平均存在比を示す。
  • :各キットで得られたDNAについてのα多様性(α-diversity)希釈化曲線。グラフの横軸はシークエンス深度を、縦軸は確認されたOTU(Operational Taxonomic Unit)(縦軸)を示す。

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キット内容

  • Lysing matrix YB
  • RNase A solution
  • Buffer S1~S6
  • Column S
  • 2.0 ml collection tube
  • 2 ml microcentrifuge tube
  • 1.5 ml microcentrifuge tube

試料破砕操作には、FastPrep-24 5G Instrumentまたはボルテックスが必要です。その他の必要な試薬・装置類は、製品マニュアルをご確認下さい。


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価格

[在庫・価格 :2025年04月25日 20時55分現在]

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詳細 商品名
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納期 文献数
SPINeasy DNA Pro Kit for Soil, 50 preps
1週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 12
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  • お問い合わせ
説明文
国内に在庫がなく,海外から取り寄せの場合は納期が異なります。 DNA抽出が困難な土壌試料からマイクロバイオーム解析に適した高純度かつバイアスのないゲノムを抽出するキット。試料破砕装置FastPrep装置によりバクテリア,真菌類,ウイルス,原生生物を含む幅広い生物を効率的に溶解した後,精製用カラムでゲノムDNAを精製する。SKU:116546050
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2024年6月1日号 p.23
ニュース2023年7月1日号 p.23
ニュース2025年3月1日号 p.9

製品記事 DNA / RNA の抽出・精製および細胞ライセート調製システム FastPrep システム特集
関連記事 細胞培養から解析まで、あらゆる研究デザインに対応

[在庫・価格 :2025年04月25日 20時55分現在]

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SPINeasy DNA Pro Kit for Soil, 50 preps

文献数: 12

説明文 国内に在庫がなく,海外から取り寄せの場合は納期が異なります。 DNA抽出が困難な土壌試料からマイクロバイオーム解析に適した高純度かつバイアスのないゲノムを抽出するキット。試料破砕装置FastPrep装置によりバクテリア,真菌類,ウイルス,原生生物を含む幅広い生物を効率的に溶解した後,精製用カラムでゲノムDNAを精製する。SKU:116546050
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2024年6月1日号 p.23
ニュース2023年7月1日号 p.23
ニュース2025年3月1日号 p.9

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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