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複数断片の繋ぎ合わせによる長鎖配列のプラスミドへの挿入が可能です! Quick PCR Plus Assembly Kit

掲載日情報:2024/03/05 現在Webページ番号:70812

PCR産物(DNA断片、インサート)のプラスミドへの挿入を、プレミックス試薬により単一チューブで迅速・簡便・効率的に行えるキットです。複数のDNA断片を繋ぎ合わせることが可能なため、長鎖配列のプラスミドへの挿入が可能となります。形質転換用のE. coliコンピテントセルがセットになったQuick PCR Plus Assembly Kit with Competent Cells(#78532)もあります。

DNA insertion into plasmid of choice

1つのDNA断片のプラスミドへの挿入

  • 迅速
  • 簡便
  • 効率的
DNA assembly and insertion

複数のDNA断片を用いた長鎖配列のプラスミドへの挿入


Quick PCR Plus Assembly Kitの適用

製品ラインナップ

商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

品名 Quick PCR Plus Assembly Kit Quick PCR Plus Assembly Kit
with Competent Cells
使用回数 10 reactions 50 reactions 10 reactions 50 reactions
商品コード 78531-1 78531-2 78532-1 78532-2
キット内容 Assembly mix(2×) ●(100 μl) ●(500 μl) ●(100 μl) ●(500 μl)
Chemically competent E. coli cells* ●(10 tubes) ●(50 tubes)

Quick PCR Plus Assembly Kit with Competent Cellsに含まれるコンピテントセルは、使用回数の本数分のチューブにあらかじめ分注されているため、使用前に一度解凍して小分け・冷凍保存する必要がなく、そのまま使用できます。
コンピテントセルが含まれないキットは、DH5αなどのコンピテントセルを別途ご用意下さい。


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プライマー設計の概要

DNA断片同士、およびDNA断片と線状化プラスミドが互いに20 bpの相同領域(オーバーラップ)を持つように、オーバーハングを有したPCR用プライマーを設計して下さい。推奨する相同領域の標準的な長さは20 bpですが、以下についてご注意下さい。

注意事項

  • プラスミドとDNA断片の間に少なくとも16 bpの相同領域が存在することを確認して下さい。
  • プラスミドとDNAの間の相同領域が50 bpを超えると、反応効率が低下する可能性があります。

A. 1つの断片を線状化プラスミドに挿入する場合の例

Step 1. プラスミドの線状化(BamHⅠとNotⅠ制限酵素消化)

Step 1. プラスミドの線状化(BamHⅠとNotⅠ制限酵素消化))

Step 2. 挿入するDNA断片(目的遺伝子、オープンリーディングフレーム)の選択

Step 2. 挿入するDNA断片(目的遺伝子、オープンリーディングフレーム)の選択

Step 3. 目的遺伝子の配列を含んだプライマーの設計

Step 3. 目的遺伝子の配列を含んだプライマーの設計

線状化プラスミドへの1つのDNA断片の挿入の模式図

線状化プラスミドへの1つのDNA断片の挿入の模式図

B. 複数のDNA断片を線状化プラスミドに挿入する場合の例

Step 1~2はAを参照。

Step 3. オーバーラッピングプライマーの設計

オーバーラッピングプライマーの設計

図をクリックすると拡大します(🔍)


線状化プラスミドへの複数のDNA断片(この場合2つ)の挿入の模式図

線状化プラスミドへの複数のDNA断片(この場合2つ)の挿入の模式図

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h2 class="hdg-A" FAQ /h2

Q-1. Chemically competent E. coli cellsは、単品でも購入することは可能ですか?

A-1. ご希望により、カタログ品としてご購入いただけます。詳細は、当社テクニカルサポートサポート(試薬担当)までお問い合わせ下さい。

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価格

Quick PCR Plus Assembly Kit

[在庫・価格 :2025年04月25日 20時55分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
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納期 文献数
Quick PCR Plus Assembly Kit
2週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。