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安定性と薬物動態(PK)が大幅に向上したFc領域変異体Fc-KIH融合サイトカイン Fc-KIH融合組換え体サイトカイン(AdipoGen Life Sciences社)

掲載日情報:2023/09/28 現在Webページ番号:70737

Knobs-into-holes(KIH)技術を利用したFc変異体Fc-KIHを融合した単量体のサイトカインです。発現系は哺乳動物細胞(HEK293細胞)であり、低エンドトキシンで、in vitroおよびin vivoでの実験系で使用が可能です。Fc-KIHタンパク質は、サイトカイン活性を維持しながら、安定性が大幅に向上し、薬物動態(PK、Pharmacokinetics)を大幅に向上することができます。

IL-2 (Human)(monomeric):Fc-KIH (Human) (rec.)(#AG-40B-0224)

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IL-2 (Human)(monomeric):Fc-KIH (Human)(#AG-40B-0224

参考文献 Knobs-tnto-holesについて

  • Ridgay, J.B., et al., "'Knobs-into-holes' engineering of antibody CH3 domains for heavy chain heterodimerization", Protein Eng., 9(7), 617~621 (1996). [PMID:8844834]

各サイトカインの機能

IL-2とは ☟

IL-2 Superkine (Fc) とは ☟

IL-2(Switch-2)とは ☟

IL-7とは ☟

IL-12とは ☟

IL-23とは ☟

IL-27とは ☟

IL-33(oxidation resistant)とは ☟

IL-37とは ☟

IL-38とは ☟



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特長

  • 純度:≧95%(SDS-PAGE)
  • エンドトキシン含有量:<0.01EU/μg protein(LAL法)
  • 形状:凍結乾燥物(PBS含有)

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製品ラインナップ

商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

Fc-KIH (Human)融合タンパク質 産生 商品コード 種反応性 配列 変異 M.W.
(SDS-PAGE)
IL-2 (Human)(monomeric)

IL-2 (Human)(monomeric):Fc-KIH (Human)(#AG-40B-0224)

HEK293細胞 AG-40B-0224 Human
(Mouse)
Human IL-2(aa 21~153) 約48 kDa/28 kDa
IL-2 (Mouse)(monomeric)

IL-2 (Mouse)(monomeric):Fc-KIH (Human)(#AG-40B-0225)

HEK293細胞 AG-40B-0225 Mouse
(Human)
Mouse IL-2(aa 21~169) 約50 kDa/28 kDa
IL-2 Superkine(monomeric)

IL-2 Superkine(monomeric):Fc-KIH (Human)(#AG-40B-0222)

HEK293細胞 AG-40B-0222 Human
Mouse
Human IL-2(aa 21~153) H9 約45 kDa/28 kDa
IL-2 Superkine H9T
(monomeric)

IL-2 Superkine H9T:Fc-KIH (Human)(#AG-40B-0223)

HEK293細胞 AG-40B-0223 Human
Mouse
Human IL-2(aa 21~153) H9T 約45 kDa/28 kDa
IL-2(Human) Switch-2
(monomeric)

IL-2(Human)(Switch-2)(monomeric):Fc-KIH(Human)(#AG-40B-0234)

HEK293細胞 AG-40B-0234 Human
Mouse
Human IL-2(aa 21~153) pH-resistant Switch-2 約45 kDa/28 kDa
IL-7(Human)(monomeric)

IL-7 (Human) (monomeric):Fc-KIH (Human) (#AG-40B-0238)

HEK293細胞 AG-40B-0238 Human
Mouse
Human IL-7(aa 26~177) 約60 kDa/28 kDa
IL-12(Mouse) CHO細胞 AG-40B-0240 Mouse Mouse IL-12A/p35
(aa 23~215)
Fc Knobs and Mouse IL-12B/p40(aa 23~335)
Fc Holes form the Mouse IL-12
約60 kDa/75 kDa
IL-23(Mouse)

IL-23 (Mouse):Fc-KIH (Human) (#AG-40B-0235)

CHO細胞 AG-40B-0235 Human
Mouse
Mouse IL-23A/p19
(aa 22~196)
Fc Knobs and Mouse IL-12B/p40(aa 23~335)
Fc Holes form the Mouse IL-23
約75 kDa/55 kDa
IL-27(Mouse)

IL-27 (Mouse):Fc-KIH (Human) (#AG-40B-0236-C050)

CHO細胞 AG-40B-0236 Human
Mouse
Mouse IL-27A/p28
(aa 29~234)
Fc Knobs and Mouse IL-27B/EBI3(aa 19~228)
Fc Holes form the Mouse IL-27
約62 kDa/60 kDa
IL-33(oxidation resistant)(Human)(monomeric)

IL-33(oxidation resistant)(Human)(monomeric):Fc-KIH (Human) (#AG-40B-0233-C050)

HEK293細胞 AG-40B-0233 Human
Mouse
Human IL-33(aa 112~270) Oxidation
resistant
約55 kDa/28 kDa
IL-37 (Human)(monomeric)

IL-37 (Human)(monomeric):Fc-KIH (Human)(#AG-40B-0221)

HEK293細胞 AG-40B-0221 Human
Mouse
Human IL-37(aa 46~218) Δ5CysS-S、Y85A 約55 kDa/28 kDa
約90 kDa(Monomer)(SEC)
IL-38
(aa 1~152) (Human)
(monomeric)
HEK293細胞 AG-40B-0241 Human Human IL-38(aa 1~152) 約53 kDa/28 kDa
IL-38
(aa 20~152) (Human)
(monomeric)

IL-38 <br>(aa 20~152) (Human):Fc-KIH (Human)(#AG-40B-0226)

HEK293細胞 AG-40B-0226 Human Human IL-38(aa 20~152) 約50 kDa/28 kDa
IL-38
(aa 3~152) (Mouse)
(monomeric)

IL-38 <br>(aa 3~152) (Mouse):Fc-KIH (Human)(#AG-40B-0227)

HEK293細胞 AG-40B-0227 Mouse Mouse IL-38(aa 3~152) 約52 kDa/28 kDa
  • H9:L80F、R81D、L85V、I86V、I92F変異を含む。
  • H9T:H9(L80F、R81D、L85V、I86V、I92F変異を含む)に加え、新規のQ126T変異を含む。
  • pH-resistant Switch-2:T37H、R38L、T41S、F42Y、K43G変異を含む。
  • Oxidation resistant:C208S、C232S変異を含むことにより、IL-33の酸化を防止する。

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使用例

CTLL-2マウス細胞傷害性T細胞増殖の増加の検証

グルタミン、10%FBSを含むRPMI培地に、さまざまな濃度のIL-2(Human)(monomeric):Fc-KIH(Human)(#AG-40B-0224)(左下図)、IL-2(Mouse)(monomeric)):Fc-KIH(Human)(#AG-40B-0225)(右下図)またはFc-KIH (Human) IgG1 Control (rec.) (#AG-35B-0015)を添加してCTLL-2マウス細胞傷害性T細胞増殖の増加を検証した。細胞の増殖は、PMS/MTS(CellTiter 96 AQueous One Solution Cell Proliferation Assay、Promega社)を使用して定量した。IL-2(Human)(monomeric):Fc-KIH(Human)およびIL-2(Mouse)(monomeric)):Fc-KIH(Human)のED50はいずれも<40 pMであった。

CTLL-2マウス細胞傷害性T細胞の増殖の増加(#AG-40B-0244使用)

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マウス細胞傷害性T細胞の増殖の増加(#AG-40B-0244使用)

CTLL-2マウス細胞傷害性T細胞の増殖の増加(#AG-40B-0225使用)(#AG-40B-0225使用)

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マウス細胞傷害性T細胞の増殖の増加(#AG-40B-0225使用)


IL-2レセプター(IL-2R)活性化の解析

IL-2(Human/Mouse)(monomeric):Fc-KIH(Humman)によるIL-2レセプター活性化の解析

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IL-2(Human/Mouse)(monomeric):Fc-KIH(Humman)によるIL-2レセプター活性化の解析

遺伝子操作によるIL-2Rを発現する細胞株よりなるIL-2 Bioassay(Promega社、#JA2201)を使用して、IL-2(Human)(monomeric):Fc-KIH(Human)(#AG-40B-0224)、IL-2(Mouse)(monomeric)):Fc-KIH(Human)(#AG-40B-0225)またはFc-KIH (Human) IgG1 Control(#AG-35B-0015)によるIL-2Rの活性化を解析した。
IL-2がIL-2Rに結合するとレセプター下流シグナル伝達により誘導される発光をルミノメーターで測定した。

IL-2 Superkine(monomeric):Fc-KIH(Humman)によるIL-2レセプター活性化の解析

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IL-2 Superkine(monomeric):Fc-KIH(Humman)によるIL-2レセプター活性化の解析

遺伝子操作によるIL-2Rを発現する細胞株よりなるIL-2 Bioassay(Promega社、#JA2201)を使用して、IL-2 Superkine(monomeric):Fc-KIH(Humman)(#AG-40B-0222)、IL-2 Superkine(Fc)(#AG-40B-0111)、またはFc-KIH (Human) IgG1 Control (#AG-35B-0015)によるIL-2Rの活性化を解析した。
IL-2がIL-2Rに結合するとレセプター媒介経路シグナル伝達により誘導される発光をルミノメーターで測定した。IL-2 Superkine(monomeric):Fc-KIH(Humman)は、二量体のIL-2 Superkineに比べてよりIL-2Rを活性化したことが分かる。


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関連製品 ネガティブコントロール

2つの異なるベクターを使用して製造した組換え体Fc-KIH (Human) IgG1 Controlです。1つのベクターは分子量29 kDaのタンパク質よりなる小さなリンカーが付与されたFc Knobs分子の配列をコードしています。もう一つのベクターは、分子量29 kDaのFc Hole分子の配列をコードしています。これらの2つのベクターはHEK293細胞に導入すると、二量体化されて最終産物であるFc-KIH(Human) IgG1が分泌されます。
商品コードをクリックすると製品の価格表をご覧いただけます。

品名 商品コード 配列 M.W.
Fc-KIH (Human) IgG1 Control

Fc-KIH (Human) IgG<sub>1</sub> Control(#AG-35B-0015)

AG-35B-0015 Fc(Human)IgG1(KIH technology) 約28 kDa

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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