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12(S)-HETE測定キット（Cayman社） 12(S)-HETE ELISA Kit

掲載日情報：2022/04/28 現在Webページ番号：70711

ケイマン ケミカル /
Cayman Chemical Company
[メーカー略称：CAY]

試料中の12(S)-HETEを競合法により比色定量するキットです。

※ Cayman Chemical社メーカーサイトにおいて製品情報、または同社製品データシートをご覧いただく場合、Internet Explorer（IE）以外のブラウザをご利用下さい。
※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

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12(<i>S</i>)-HETE検量線例

12(S)-HETE ELISA Kit（#534571）検量線例

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12(S)-HETEとは

12(S)-HETEの形成

12(S)-HETEは、血小板および内皮細胞内で12-リポキシゲナーゼ（12-LO）によるアラキドン酸の12(S)-HpETEへの酸化とその後のヒドロキシル部分の還元によって形成されるヒドロキシ脂肪酸です。またIL-4またはIL-13の刺激に応答したマウスのマクロファージの白血球12/15-LOによっても形成されます。1～4。

12(S)-HETEの役割

12(S)-HETEは、12(S)-HETEレセプター（12-HETER）、ロイコトリエンB4レセプター2（BLT2、leukotriene B4 receptor 2）、VE-カドヘリン、NF-κB、Rho関連キナーゼ（ROCK）、およびc-Jun N末端キナーゼ1（JNK1）などの様々なレセプターとシグナル伝達経路を介し、炎症プロセス、かゆみの知覚、血管収縮、インスリンシグナル伝達、および細胞遊走に関与します2,3,5。

12(S)-HETEと疾病との関連

12(S)-HETEは、ADP、トロンボキサンA2（TXA2、Thromboxane A2）、コラーゲンなどの様々なアゴニストに反応して血小板で産生されます6。12(S)-HETEは、血漿および血小板内レベルは血小板凝集と相関しています。動脈血栓症のマウスモデルにおいて、12-LOXの薬理学的阻害は血小板の動員、血栓形成、および血管閉塞を減少させますが、マウスのレーザー誘起による止血凝血塊形成には影響しません7。本態性高血圧症の患者では、血小板産生と12(S)-HETEの尿中排泄が増加します8。12(S)-HETEは、in vitroおよびマウスモデルにおいて多くのがん細胞の遊走を誘発し、12(S)-HETEのレベルは結腸がんの悪性度と正の相関があります5。

参考文献

  1. Tang, D.G. and Honn, K.V., "12-Lipoxygenase, 12(S)-HETE, and cancer metastasis.", Ann. N.Y. Acad. Sci., 744, 199～215 (1994). [PMID：7825842]
  2. Kriska, T., et al., "Macrophage 12(S)-HETE enhances angiotension II-induced contraction by a BLT2 (leukotriene B4 type-2 receptor) and TP (thromboxane receptor)-mediated mechanism in murine arteries.", Hypertension, 79(1), 104～114 (2022). [PMID：34784723]
  3. Chakrabarti, S.K., et al., "12/15-Lipoxygenase products induce inflammation and impair insulin signaling in 3T3-L1 adipocytes.", Obesity (Silver Spring), 17(9), 1657～1663 (2009). [PMID：19521344]
  4. Singh, N.K. and Rao, G.N., "Emerging role of 12/15-lipoxygenase (ALOX15) in human pathologies." Prog. Lipid Res., 73, 28～45 (2019). [PMID：30472260]
  5. Nguyen, C.H., et al., "Cancer cell-derived 12(S)-HETE signals via 12-HETE receptor, RHO, ROCK and MLC2 to induce lymph endothelial barrier breaching.", Brit. J. Cancer, 115(3), 364～370 (2016). [PMID：27362730]
  6. Tourdot, B.E. and Holinstat, M., "Targeting 12-lipoxygenase as a potential novel antiplatelet therapy.", Trends Pharmacol. Sci., 38(11), 1006～1015 (2017). [PMID：28863985]
  7. Adili, R., et al., "First selective 12-LOX inhibitor, ML355, impairs thrombus formation and vessel occlusion in vivo with minimal effects on hemostasis.", Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 37(10), 1828～1839 (2017). [PMID：28775075]
  8. González-Núñez, D., et al., "Increases levels of 12(S)-HETE in patients with essential hypertension.", Hypertension, 37(2), 334～338 (2001). [PMID：11230294]

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操作方法概略

アセチルコリンエステラーゼ（AChE）を用いて、AChE標識測定物質（AChEトレーサー）、非標識測定物質（スタンダードまたは試料中の測定物質）が限られた数の結合部位を奪い合う競合法により、標的物質を比色定量します。
AChEトレーサーは、自己不活性化せず、安定かつ幅広いpH域で使用可能で、通常の塩や保存剤の影響を受けません。
そのため Cayman社のAChEトレーサーを使用したELISAキットは高感度です。

12(<i>S</i>)-HETE ELISA Kitの操作方法概略

  1. 抗ウサギIgG抗体プレートにはがコート済みのプレートをブロッキング処理する。
  2. トレーサー、抗血清、およびスタンダードまたは試料を加えてインキュベートする。
  3. プレートを洗浄し、未結合の因子を除去する。
  4. Ellman's試薬を加えて呈色させる（測定波長：405～420 nm）。

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特長

  • Solid Plateは96ウェルプレートが一体型のタイプです。
  • フォーマット：96 well
  • 測定原理：ELISA（競合法）
  • 測定動物種：ヒト
  • 測定試料：血清、血漿（EDTA）
  • 測定方法：比色
  • 測定波長：405～420 nm
  • 測定範囲：0.091～200 ng/ml

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交差性

因子名 交差性（％） 因子名 交差性（％）
12(S)-HETE 100 12(S)-HETE ＜0.01
5(S),12(S)-DiHETE* 23.3 5(S)-HETE ＜0.01
12(S)-HpETE 5.1 Arachidonic Acid ＜0.01
Leukotriene B4 3.8 Lipoxin B4 ＜0.01
15(S)-HETE 2.5 Thromboxane B2 ＜0.01
12-OxoETE 1.1 Prostaglandin D2 ＜0.01
12(R)-HETE 0.11 Prostaglandin E2 ＜0.01
5(R)-HETE 0.01 Prostaglandin F2α ＜0.01

＊ ヒトの血清および血漿では報告がありません。

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キット内容

  • 12(S)-HETE ELISA polyclonal antiserum
  • 12(S)-HETE-AChE tracer
  • 12(S)-HETE ELISA standard
  • ELISA buffer concentrate
  • Wash buffer concentrate
  • Polysorbate 20
  • Mouse anti-rabbit IgG-coated 96 well plate
  • Ellman's reagent
  • ELISA tracer dye
  • ELISA antiserum dye
  • 96-well cover sheet

※ 測定にはマイクロプレートリーダーが必要です。


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価格

12(S)-HETE ELISA Kit（Solid plate）

[在庫・価格 ：2025年04月25日 20時55分現在]

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12(S)-HETE EIA Kit (Solid Plate)
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※Solid Plateは96ウェルプレートが一体型のタイプです。 試料中の12(S)-HETEを競合法により比色定量するキット。
法規制等 医薬用外毒物
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12(S)-HETE EIA Kit (Solid Plate)

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説明文 ※Solid Plateは96ウェルプレートが一体型のタイプです。 試料中の12(S)-HETEを競合法により比色定量するキット。
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お問い合わせ先

（テクニカルサポート 試薬担当）

reagent@funakoshi.co.jp

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