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世界初!シングルセルドロップレットPCRを用いたコピー数異常細胞の高感度定量 SinChroによる染色体・遺伝子コピー数解析受託サービス

掲載日情報:2024/02/16 現在Webページ番号:70675

(株)TG Genomicsの独自技術「SinChro」による遺伝子・染色体コピー数の解析サービスです。血液試料や培養細胞などの細胞集団試料に含まれるコピー数異常細胞の数を、ハイスループットかつ高感度に定量することができます。コピー数異常が原因となる疾患の発症メカニズム解析や、培養細胞の品質管理などに有用です。

SinChroとは

背景

主要な固形腫瘍や血液腫瘍では、染色体の欠失、または増幅(コピー数異常)が高頻度に起こっていることが知られています。例えば、染色体13番の欠失は多発性骨髄腫(MM: Multiple Myeloma)のおよそ50%、慢性リンパ性白血病(CLL: Chronic Lymphocytic Leukemia)のおよそ80%で起こっています1。また、大腸がんでは染色体18番の長腕の欠失がおよそ50%の症例で報告されています2。さらに、iPS細胞やES細胞は長期間にわたる培養で、染色体の異常を生じることが知られています。
従来、これらの測定はFISHなどの細胞遺伝学的解析、またはPCRや次世代シークエンスといった分子生物学的解析によって行われてきました。しかし、FISHはスループット性が低いため大規模解析には向きません。また、PCRや次世代シークエンスでは、解析細胞集団から抽出されたDNAを対象に細胞集団のターゲットのコピー数の平均値解析を行うため、コピー数異常細胞の割合が少ない場合は測定値(平均値)が正常と変わらず、異常細胞が存在したか見分けがつかなくなる問題がありました。
(株)TL Genomicsが新たに開発したSinChro法は、これらの課題を解決した画期的な染色体異常検出技術になります。

■ 参考文献
1. 日本内科学会雑誌第100巻第7号・平成23年7月10日
2. Baudis, M., BMC Cancer, 7:226 (2007). [PMID: 18088415]


SinChroの原理

SinChroは、デジタルPCR機器を用いてシングルセルドロップレットPCRを行う技術です。細胞集団試料中のひとつひとつの細胞を微小な区画(ナノリットルサイズ)に封じ込め、その区画内で細胞からのDNA抽出とDNA増幅を行い、独自の手法を用いてターゲット遺伝子のコピー数を蛍光強度に変換し、区画ごとに解析を行います。これによって、それぞれの細胞のターゲット遺伝子のコピー数を測定します。
FISHなどの従来技術では、コピー数異常細胞の割合は数%以下のレベルでは正確に検出できませんでしたが、本技術では一度に10,000個の細胞を測定し、10個程度しか存在しないコピー数異常細胞でも検出・定量できます(感度0.1%程度)。

SinChroの原理


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特長

  • 細胞集団中の染色体のコピー数異常や欠損・増幅を検出できます。
  • 染色体欠失、染色体部分欠失(微小欠損)、染色体増幅(トリソミーなど)の解析が可能です。
  • 染色体の特定領域のコピー数異常も解析できます。
  • コピー数異常細胞が全体の0.1%程度でも検出することができます。
  • 浮遊細胞、接着細胞のいずれの試料も測定可能です。

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解析データ例

正常核型の細胞に、0.1%程度の割合で13番染色体の長腕が1本欠損している細胞を混合した試料の測定結果

13番染色体と18番染色体(コントロール)のPCR増幅量をそれぞれ縦軸と横軸に、シングルセルごとの結果をプロットすることで、フローサイトメトリーのようなドットプロットを得ることができます。これにより、わずかなコピー数異常の割合も検出することが可能です。

解析データ例


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解析対象遺伝子ラインナップ・目安価格

標的遺伝子・染色体 サンプル数 価格 納期
以下の中から1ターゲット:
ヒトChr 5番長腕、7番長腕、8番全域、13番長腕、17番短腕(TP53付近)、
20番長腕、21番長腕、X全域、Y全域
1~4 試料 70,000円/1試料 30日
5~10 試料 50,000円/1試料
11~24 試料 40,000円/1試料
25~ 試料 30,000円/1試料
ご希望の染色体、遺伝子を標的としたカスタム解析 お問い合わせ下さい 90日

上記の価格・納期は目安となります。正式なお見積は以下お問い合わせ先(受託・特注品業務担当)よりお申込み下さい。
病原性試料(ウイルス感染の可能性がある血液試料など)の解析はできません。
ヒト以外の染色体や遺伝子を対象としたカスタム解析も可能です。詳細は当社受託・特注品担当までお問い合わせ下さい。


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納品物

  • 解析報告書および生データ(qlpファイル、ddpcrファイル)

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