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マウス胎児線維芽細胞（MEF）馴化培地 Mouse Embryonic Fibroblast Conditioned Media
掲載日情報：2023/12/20 現在Webページ番号：70644
ES細胞（胚性幹細胞）およびiPS細胞（人工多能性幹細胞）の増殖をサポートし、多能性を維持するための馴化培地です。
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使用例
図1. 本製品で培養したiPS細胞の免疫蛍光細胞染色像
ヒトiPS2幹細胞を、4 ng/mlの組換えヒトFGF basic（#233-FBまたは#4114-TC）を添加した本製品（#AR005）で培養した結果、多能性幹細胞マーカーであるSSEA-4、Oct-3/4、Oct-4A、およびE-カドヘリンを発現した。
A. SSEA-4の発現は、マウス抗ヒト／マウスSSEA-4モノクローナル抗体（#MAB1435）およびNorthernLights (NL) 493標識ロバ抗マウス二次抗体（#NL009、緑色) を用いて検出した。Oct-3/4の発現は、ヤギ抗ヒトOct-3/4ポリクローナル抗体（#AF1759）およびNL557標識ロバ抗ヤギ二次抗体（#NL001、赤色）を用いて検出した。核はDAPIで対比染色した。
B. Oct-4Aの発現は、マウス抗ヒトOct-4Aモノクローナル抗体（#MAB17591）およびNorthernLights (NL) 493標識ロバ抗マウス二次抗体（#NL009、緑色) を用いて検出した。E-カドヘリンの発現は、ヤギ抗ヒトE-カドヘリンポリクローナル抗体（#AF648）およびNL557標識ロバ抗ヤギ二次抗体（#NL001、赤色）を用いて検出した。核はDAPIで対比染色した。
※ 幹細胞の免疫蛍光細胞染色のプロトコルはこちら（メーカーウェブサイト）をご覧下さい。
図2. 本製品で培養したES細胞の免疫蛍光細胞染色像
ヒトES細胞を、4 ng/mlの組換えヒトFGF basic（#233-FB）を添加した本製品（#AR005）で培養した結果、多能性幹細胞マーカーであるSSEA-4およびOct-3/4を発現した。
A.B. SSEA-4およびOct-3/4の発現は、マウス抗ヒト／マウスSSEA-4モノクローナル抗体（#MAB1435、赤色）およびヤギ抗ヒトOct-3/4ポリクローナル抗体（#AF1759、緑色）を用いて検出した。核はDAPIで対比染色した。
※ 幹細胞の免疫蛍光細胞染色のプロトコルはこちら（メーカーウェブサイト）をご覧下さい。
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マウス胎児線維芽細胞（MEF）馴化培地について
なぜMEF馴化培地を用いて幹細胞を培養するのか？
マウス胎児線維芽細胞（MEF）はES細胞（胚性幹細胞）やiPS細胞（人工多能性幹細胞）のフィーダー細胞として使用されており、成長因子、サイトカイン、栄養素を産生することにより、幹細胞の増殖と多能性の維持をサポートします。しかし、MEFを使用するのは手間がかかり、MEFの汚染が重大な懸念事項となります。
MEF馴化培地はMEFの効率的な代替品であり、ES細胞培養において最も広く用いられているフィーダーフリーシステムの1つで、幹細胞の増殖と多能性をサポートするために必要な可溶性因子が含まれています。
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特長
- ES細胞（胚性幹細胞）およびiPS細胞（人工多能性幹細胞）の培養に広く使用されているフィーダーフリー培養システムです。
- ロット間の一貫性により、実験のばらつきが減少します。
- フィーダー細胞（MEF）が不要です。
- フィーダー細胞からの汚染がありません。
- 別売りのFGF basic（4 ng/ml）（#233-FBまたは#4114-TC）を添加して完全培地を作製できます。
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操作方法概略
本製品は、以下の手順でヒト多能性幹細胞の培養に使用できます。
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使用文献
- Zywitza, V., et al., Sci. Rep., 12(1):3100 (2022). [PMID：35260583]
- Chiang, J.C., et al., Nat. Commun., 9(1):5180 (2018). [PMID：30518921]
- Ness, C., et al., Mol. Vis., 23:680～694 (2017). [PMID：29033534]
- Zhou, X., et al., Stem Cell Reports, 3(1):204～214 (2014). [PMID：25068132]
- Mandal, S., et al., Stem Cells, 29(3):486～495 (2011). [PMID：21425411]
- Cheli, Y., et al., Oncogene, 30(20):2307～2318 (2011). [PMID：21278797]
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セット内容
- MEF conditioned media
※ FGF basic（#233-FBまたは#4114-TC）、Accutase（ICT社 #AT104）、Cultrex Reduced Growth Factor Basement Membrane Extract（RGF BME）（#3433-005-01）、DMEM/F12は含まれません。別途ご用意下さい。
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価格
[在庫・価格 ：2024年04月28日 00時00分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Conditioned Media, MEF <Mouse Embryonic Fibroblast Conditioned Media> |
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5 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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[在庫・価格 ：2024年04月28日 00時00分現在]
Conditioned Media, MEF <Mouse Embryonic Fibroblast Conditioned Media>
文献数： 5
- 商品コード：AR005
- メーカー：RSD
- 包装：100ml
- 価格：¥46,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
マウス胚性線維芽細胞（MEF）馴化培地。 |
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| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 |
Human Pluripotent Stem Cell Functional Identification Kit StemXVivo Endoderm / Ectoderm / Mesoderm Kit ヒト ES 細胞培養用製品 CryoDefend-Stem Cell |
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